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文档简介

1、基因测序技术简介主讲人：徐德阳目录一、测序技术发展与比较二、illumina测序原理三、Pacbio测序原理全基因组测序的英文是Whole Genome Sequencing，简称WGS，目前默认指的是人类的全基因组测序。所谓全（Whole），指的就是把物种细胞里面完整的基因组序列从第1个DNA开始一直到最后一个DNA，完完整整地检测出来，并排列好，因此这个技术几乎能够鉴定出基因组上任何类型的突变。第一代DNA测序技术用的是1975年由桑格（Sanger）和考尔森（Coulson）开创的链终止法，以及1976-1977年由马克西姆（Maxam）和吉尔伯特（Gilbert）发明的化学法（链降解）

2、。在1977年，由桑格老人家测定了第一个基因组序列噬菌体phiX-174。http:/smcg.cifn.unam.mx/enp-unam/03-EstructuraDelGenoma/animaciones/secuencia.swf目录一、测序技术发展与比较二、illumina测序原理三、Pacbio测序原理测序流程Illumina测序原理上机测序的文库Illumina测序原理测序流程Illumina测序原理cBotIllumina测序原理测序芯片FlowcellLane：八条相对独立通道两端小孔：进液孔与出液孔Oligo：DNA小片段，通过化 学键连接在Flowcell上， 能与文库两端

3、碱基互补配对oligoIllumina测序原理Index变性：双链DNA变 为单链DNA， 杂交在Flowcell上结合方式：碱基互补配对原则杂交Illumina测序原理延伸RCR扩增模版：杂交结合链引物：OligoIllumina测序原理变性Original template： 与Flowcell 氢键连接， 不稳定Newly synthesized strand： 与Flowcell 磷酸二酯键 连接，稳定Illumina测序原理成簇二代测序核心技术之一：桥式扩增Illumina测序原理桥式扩增搭“桥”： DNA链与周围Oligo 通 过碱基互补配对结合 PCR扩增： 以DNA链为模版 以新结合的Oligo为引物Illumina测序原理变性结果：一条DNA链变成两条Illumina测序原理继续桥式扩增Illumina测序原理线性化Illumina测序原理切割Illumina测序原理阻断ddNTPs 阻断阻止继续扩增一簇完全相同的DNA链增强检测信号ead1 Illumina测序原理Read1 测序引物杂交目录一、测序技术发展与比较二、illumina测序原理三、 Pacbio测序原理Pacbio测序原理Pacbio测序原理Pacbio测序原理Pacbio测序原理Oxford NanoporeMinION它是基于电信号而不是光

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