矿泉水卫生微生物检验记录

1、第 页 共 页矿泉水卫生微生物检验记录样品编号： 检验开始时间： 年 月 日样品名称： 检验完成时间： 年 月 日检测项目： 检测依据：GB 8538-2016 一、大肠菌群测定（多管发酵法）：1.吸取10ml水样接种到盛有10ml双料乳糖胆盐发酵培养液的试管中，共接种5管；2.吸取1ml水样接种到盛有10ml单料乳糖胆盐发酵培养液的试管中，共接种5管；3.吸取1ml水样接种到9ml灭菌生理盐水的试管中，混匀，用5ml灭菌吸管吸取5ml稀释液分别加到5支盛有10ml单料乳糖胆盐发酵培养液的试管中，每管1ml（即0.1ml水样）；轻摇试管，使液体充分混合，置361培养箱内培养25h，观察每管是否

2、产气，若产气该管则为阳性，如不产气则为大肠菌群阴性。自检测阳性管中取一环培养液，接种到亮绿乳糖胆盐培养液（BGLB）管中，置361培养箱内培养48h；观察BGLB管中的产气情况，如有产气，则可确定为“大肠菌群阳性”，如不产气则为“大肠菌群阴性”。记下BGLB管里产气的阳性试管数。接种量mL1010101010111110.10.10.10.10.1培养时间（h）培养温度（）乳糖胆盐初发酵125361225361325361425361525361亮绿乳糖胆盐证实试验148361248361348361448361548361注： eq oac(,+)产酸产气；+产酸不产气或有可疑菌落；-不产酸

3、不产气或无可疑菌落；G-b革兰氏阴性杆菌；G+b革兰氏阳性杆菌； G+c革兰氏阳性球菌。结果： 根据证实为大肠菌群阳性的管数，查MPN检索表，得：12345 MPN/100ml MPN/100ml MPN/100ml MPN/100ml MPN/100ml电子天平编号: 使用状况 试验前： 试验后：培养箱编号： 使用状况 试验前： 试验后：检测人： 校核人： 审核人：样品编号：粪链球菌测定（滤膜法）：根据水质污染情况确定稀释倍数，用无菌镊子夹取滤膜边缘部分，将粗糙面向上，贴在滤床上，固定好滤器，过滤。每张滤膜过滤250mL水样或稀释液。将过滤后的滤膜直接转移至KF链球菌琼脂培养基上，同时避免在

4、滤膜和培养基之间夹留着气泡。将平皿倒扣，放置在（ ）的恒温培养箱，培养（ ）h后，取出挑去可疑菌落进行镜检，并且计数。从滤膜上挑取典型菌落，接种到脑-心浸淬琼脂培养基斜面上，在（ ）培养（ ）h，做证实性试验，如有菌落生长，则作过氧化氢酶实验、脑心浸淬琼脂复培养和胆汁肉汤食盐证实是否存在粪链球菌。编号试验12345空 白培养条件推测性试验过滤器加样量（ml）/KF链球菌琼脂培养48h/361红色菌落数/粉红色菌落数/染色镜检/确证性试验脑-心浸淬琼脂培养48h/361过氧化氢酶(阳性/阴性)/脑-心浸淬琼脂复培养/2448h/361胆汁肉汤实验/3d/361结果报告典型菌落数/确认性阳性数/结

5、果（CFU/250ml）/注： +生长或有可疑菌落；-不生长或无可疑菌落；G+c革兰氏阳性球菌；G-c革兰氏阴性球菌；电子天平编号: 使用状况 试验前： 试验后：培养箱编号： 使用状况 试验前： 试验后：检测人： 校核人： 审核人：样品编号： 三、铜绿假单胞菌（滤膜法）用无菌镊子夹取滤膜边缘部分，将粗糙面向上，贴在滤床上，固定好滤器，过滤。每张滤膜过滤250mL水样或稀释液。将过滤后的滤膜直接转移至CN琼脂平板上，同时避免在滤膜和培养基之间夹留着气泡。将平皿倒扣，放置在（ ）的恒温培养箱，培养（ ）h后，观察菌落并且计数所有显蓝色或绿色（绿脓色素）的菌落，并进行绿脓菌素确证性试验。从滤膜上挑取

6、典型菌落，做证实性试验，证实是否存在铜绿假单胞菌。最终的铜绿假单胞菌菌落计数按式计算：N=P+F(CF/nF)+R(CR/nR)式中：P呈蓝/绿色的菌落数； F显荧光的菌落数； R呈红褐色的菌落数； nF进行产氨测试的显荧光菌落数； CF产氨阳性的显荧光菌落数； nR进行产氨、氧化酶、金氏B培养基上显荧光测试的红褐色菌落数； CR产氨、氧化酶、金氏B培养基上显荧光测试均呈阳性的红褐色菌落数； 编号试验12345空白培养条件菌落培养过滤器加样量（ml）/CN琼脂平板4048h/ 361结果观察呈蓝/绿色菌落数P0/绿脓菌素确证性试验阳性菌落数P/显荧光(非蓝/绿色)菌落数F/ 进行产氨测试的 显

7、荧光菌落数 nF2024h/ 361W乙酰胺肉汤试验产氨阳性显荧光 菌落数CF/呈红褐色不发荧光的菌落数 R/确证性试验进行产氨、氧化酶、金氏B培养基上显荧光测试的红褐色菌落数nR/产氨、氧化酶、金氏B培养基上显荧光测试均呈阳性的红褐色菌落数 CR/结果（CFU/250ml）/注： +生长或有可疑菌落；-不生长或无可疑菌落；电子天平编号： 使用状况 试验前： 试验后：培养箱编号： 使用状况 试验前： 试验后：检测人： 校核人： 审核人：样品编号： 产气夹膜梭菌在100级洁净工作台进行过滤操作，用无菌镊子夹取滤膜边缘部分，将粗糙面向上，贴在已灭菌的滤床上，固定好滤器，过滤。每张滤膜过滤50mL水

8、样或稀释液（如水样含菌较多，可用0.1%的蛋白胨水将水样按比例系时候进行检测）。水样滤完后，关上阀门取下滤器，用灭菌镊子夹取滤膜边缘部分，移放在SPS培养基上，滤膜截留细菌面向上。倒置于厌氧培养装置内于361厌氧培养24h，计数平板上的黑色菌落数。挑取平板上生长的可以黑色菌落35个，分别接种FT培养基，于361培养1824h。用上述培养液涂片，镜检。产气荚膜梭菌为革兰氏阳性粗大杆菌，其耐热菌株可能形成卵形芽孢，位于菌体中央或近端，其宽度一般不大于菌体。用接种针穿刺接种动力-硝酸盐培养基，于361厌氧培养24h，观察接种线的生长情况，判断有无动力。然后滴加甲萘胺液和对氨基苯磺酸液各0.5ml，观察硝酸盐是否被还原。产气荚膜梭菌无动力，能将硝酸盐还原为亚硝酸盐。取生长旺盛的FT培养液1ml接种于含铁牛乳培养基，在46水浴中培养2h后观察有无“暴烈发酵”现象，在5h内不发酵者为阴性。产气荚膜梭菌能发酵乳糖，凝固酪蛋白并大量产气，呈“暴烈发酵”现象，但培养基不变黑。用接种环取FT培养液点种于卵黄琼脂平板（每张平板至少接种10个点），于361厌氧培养24h，观察接种点的变化。产气荚膜梭菌会产生卵磷脂酶，分解卵黄中的卵磷脂，接种点的底部及周围形成乳白色的浑浊带。 编号试验12345空白培养条件菌落培养过滤器加样（ml）/SPS培养基24h/ 361确证性试验F