雌二醇化学发光免疫检测试剂盒使用说明书(共7页)

1、 雌二醇 化学发光免疫检测试剂盒使用(shyng)说明书 ( 美国(mi u)DRG 编号: CLA-4664 规格(gug)：96T)企业名称：德国DRG诊断设备有限公司地址：德国玛堡市斐恩贝塔思路18号1简介1.1预期用途此DRG 化学发光免疫检测试剂盒可用于血清和血浆中雌二醇的体外定量检测.1.2前言（略）2实验原理此CLIA检测试剂盒采用化学发光免疫检测法,基于竞争法原理.微孔内预先包被有兔抗雌二醇分子特性性结合位点的多克隆抗体.患者样本中内源性雌二醇与辣根过氧化物酶(HRP)标记的雌二醇（酶联物） 竞相与预包被的抗体结合。 孵育后，洗板洗去未结合的酶联物. 结合的过氧化酶复合物（酶联

2、物）与患者样本中雌二醇的量成反比.加入底物液后,发射光的强度与样本中雌二醇的浓度成反比3注意事项试剂盒仅供体外诊断用试剂盒相关有害物质的信息请参阅物料安全数据单（MSMD）试剂盒中的所有试剂包括人血清/血浆对HIV/II，HbsAg和HCV已检测为阴性，但所有的试剂在使用和处理的过程中都应当作潜在生物有害物质进行处理勿用嘴移液,同时避免样品和试剂接触皮肤和试剂.实验区内禁止饮食,化妆处理试剂和样品时应戴一次性手套。微生物污染可能会导致结果失败按照相应的国家生物安全管理条理进行操作不要使用过期的试剂,有效期见试剂标签所有试剂的量都应按说明来，使用校正的移液器和发光仪可得到最佳的结果发光底物液（试

3、剂A和试剂B）对光感染,应避光瓶装保存.不要混合使用不同批次的试剂、板条，即使是同一批次不同板条的也不建议。试剂盒的运输和贮存环境不同可能会导致结果有轻微的变化化学物质、即用试剂或稀释试剂，需根据相关国家生物危害安全条例或规范，视为潜在有害物质处理。产品的物料安全数据单（MSMD）可直接向DRG索取。物料安全数据单（MSMD）符合EU-Guideline 91/155 EC4试剂盒组成4.1提供(tgng)的试剂微孔(wi kn)板，12x8(可拆),96孔 包被(bo bi)有抗雌二醇 抗体（兔多抗）标准品，（标准品0-5）,6瓶，1ml，即用浓度为：0 25 100 250 500 - 1

4、000 pg/mL 单位换算: 1 pg/mL = 3.67 pmol/L含0.3% Proclin、0.005%硫酸庆大小诺霉素作防腐剂酶联物,1瓶, 12 mL,即用 辣根过氧化物酶(HRP)标记雌二醇 含0.3% Proclin、0.015% BND、0.010% MIT作为防腐剂4.化学发光底物液试剂A，1瓶，2ml，注意：光敏感试剂B，1瓶，2ml，注意：光敏感试剂C，1瓶，3ml见“试剂准备”5.洗涤液，1瓶，30ml，(40倍浓缩) 见“试剂准备提示：额外的样品稀释液向DRG公司另购4.1.1实验所需器材(但本试剂盒没有提供)化学发光仪各种规格的标准精密移液管吸水纸蒸馏水或去离子

5、水4.2存储条件及稳定性未开封的试剂在2-8下可保存至有效期，不要使用过期的试剂打开的试剂必须保存在2-8，微孔板也必须保存于2-8，一旦打开了微孔板的袋子，需小心地将其重新密封开封的试剂盒如按以上描述的贮存条件可保存2个月4.3试剂准备使用前，将所有试剂和所需微孔板平衡至室温洗涤液加 30 mL浓缩洗涤液至1170 mL 去离子水中,制成总体积为1200 mL的稀释洗涤液。此稀释洗涤液置室温下可稳定保存2周化学发光底物液首先用1个单位的试剂A与1个单位的试剂B混匀,再按1:2的比例用试剂C稀释上述混合液,制成即用的底物液.上述制成底物液仅可保存一个小时,使用时,最好新鲜制取,现配现用.如果使

6、用所有的微孔板,准备所需底物液步骤如下:各加入(jir)1.5 mL的试剂(shj)A和试剂B至3mL试剂(shj)C中,充分混匀.4.4试剂盒废弃处理试剂盒的废弃应根据相关国家规范处理。产品的特殊信息请见物料安全数据单。4.5损坏的试剂盒万一试剂盒成分严重受损，收到试剂盒后，最迟一周以书面形式通知DRG。损坏的试剂成分不能用于实验。保存至有效解决方案出现。然后，根据相关官方规范处理5样品本实验可用血清,血浆(EDTA,肝素，柠檬酸)切勿使用溶血,黄疸或脂血的样品请注意:含有叠氮化钠的样品不可用于本实验.5.1样品收集血清：静脉穿刺采血，等待凝集，室温下离心分离出血清。未完全凝固时不可进行离心

7、。血浆：将全血收集到含有抗凝剂的离心管内，采集后立即离心5.2样本存储样品瓶装加盖置于2 C至 8 C下可保存5天需存储更长时间,需置于-20C冻存。实验前，解冻的样品需倒置几次5.3样本稀释初次实验时,如发现样品高于最大标准品浓度,样品可用零标准品稀释10倍或100倍 并重测。计算时需考虑稀释因子示例:a) 1:10稀释 10 L血清+ 90 L零标准品（充分混匀）b)1:100稀释 10 L上述a) 1：10稀释液 + 90 L零标准品（充分混匀）6实验步骤6.1一般注意事项实验前将所有试剂平衡至室温，混匀，避免产生气泡实验一旦开始，所有步骤必须无中断，完整地进行下去为了避免交叉污染，使用

8、新的一次性加样枪头，加各标准品、质控品、样品 光强度(qingd)是孵育时间和温度的相关函数.实验前将所有试剂准备好，盖子打开，所需板条固定等，这样可以确保每个步骤间隔时间一致，无中断。一般情况下,酶反应(fnyng)与时间和温度成线性比例关系6.2检测(jin c)步骤每次试验都应建立一条标准曲线。取实验所需板条固定于板架上用新的一次性加样枪头,各加20ul的标准品，质控品和样品于相应的孔内每孔加100ul酶联物，充分混匀10秒.充分混匀这一步骤很重要室温下孵育35min（无需盖板）迅速弃去孔内液体每孔用400ul的稀释洗涤液洗板5次，吸水纸上拍干,去除残留液滴.重要提醒：实验的灵敏度和精确

9、度直接受洗板正确与否的影响.每孔加50ul现配的化学发光底物液室温下孵育10min 化学发光底物液孵育后，20min内于发光仪上读取相对光单位(RLU)6.3结果计算计算各标准品，质控品和样品的相对光单位(RLU)平均值在半对数坐标纸上，以标准品的RLU的均值为Y轴，浓度为X轴绘制标准曲线从标准曲线上通过RLU均值找到相对应的浓度值全自动法：自动法用最合适的4参数对数拟合法计算，它是首选计算方法，其它函数方法得出的结果可能会有细微的不同.样品浓度可直接从标准曲线上读取，样品浓度高于最高标准品浓度的则需进一步稀释.结果计算时要乘以稀释因子6.3.1典型标准曲线示例下以数据仅供演示示范,不能用于实

10、验数据的获取.建议(jiny)用RLU/RLUmax比值(bzh)作为结果分析,因各个厂商的化学发光仪的不同导致读取RLU值的不同,但RLU/RLUmax的比值总是(zn sh)恒定不变的7期望值强烈建议每个实验室建立自已的正常与非正常值以下数值可作为参考性别5 95%百分位男10 - 36 pg/mL女绝经前绝经后13 - 191 pg/mL11 65 pg/mL8质控说明根据GLP规范要求，质控品应该与标准曲线（标准品）同时检测。检测一定统计学意义数量的质控品建立质控品均值和可接受范围，保证实验的有效性。建议根据相关国家或联邦规范处理质控品。使用质控品是为了验证实验的有效性。建议同时使用正

11、常和病理水平的质控品。质控品和相应的值请详见试剂盒内的质控单（QC单）。QC单上详细说明参考均值和范围，并提及当前使用批次号，实验结果应与QC单上参考值作对比分析。同时建议执行国家或国际质量评估体系，保证实验的准确性。使用适当的统计学方法分析质控品的值和趋势。如果实验结果没有满足建立的质控品的可接受范围值，实验应视为无效。如果实验无效，请检查以下技术指标：加样和计时装置；酶标仪；试剂效期；存储及孵育条件；洗板步骤。如果检查完上述情况，均没有问题的话，请联系经销商或DRG公司。9性能指标9.1检测范围实验盒的检测范围：0 1000 pg/mL.9.2抗体特异性（交叉反应）下表为相关物质与试验交叉反应的情况9.3分析(fnx)灵敏度分板灵敏度是由均值减去20份零标准品2个标准差计算(j sun)得出，为2.5 pg/mL9.4精密度9.4.1板内差板内差结果(ji gu)如下所示9.4.2板间差板间结果如下所示：9.5回归样品按1：1通过加入已知浓度雌二醇液进行校准分析期望值通过加的未稀释样品的半值和已知溶液的半值计算获得。%回归值通过多重稀释计算，期望达100.9.6线性度10局限性（略）本译文(ywn)仅供参考，详情请以原文为准中国独家总