HPLC法测定脑灵素胶囊中淫羊藿苷的含量

1、HPLC法测定脑灵素胶囊中淫羊藿苷的含量【摘要】目的建立HPL法测定脑灵素胶囊中淫羊藿苷的含量。方法用Diansil184.6200，5色谱柱，流动相：乙腈-水26：74，流速：1.0l/in，检测波长：270n。结果淫羊藿苷在0.04040.504g范围内与峰面积线性关系好，=0.99998，平均回收率为98.8%，RSD为1.3%n=6。结论本法测定简便，结果准确，重复性和别离度好，可用于脑灵素胶囊的质量控制。【关键词】HPL【Abstrat】bjetiveTestablishaHPLethdfrthedeterinatinfiariininNalingsuapsules.ethdADia

2、nsil18lun2004.6,5asusedithabilephasefaetnitrile-ater26:74.Theflrateas1.0l/inandthedetetinavelengthas270n.ResultsThelinearrangefiariinas0.04040.504gr=0.99998.Theaveragereveryas98.8%ithRSD1.3%n=6.nlusinThedeterinatinethdissiple,aurateandanbeusedfrthequalityntrlfNalingsuapsules.【Keyrds】HPL;iariin;Nalin

3、gsuapsule;deterinatin脑灵素胶囊为?卫生部药品标准中药成方制剂第八册?收载的品种1，由黄精、淫羊藿、五味子等十五味中药组成，具有补气血、健脑安神等成效。用于治疗神经衰弱，健忘失眠，头晕心悸，身倦无力，体虚自汗，阳痿遗精等症。原标准中无含量测定方法，方中淫羊藿为主要药味,其有效成分为淫羊藿苷。为能有效地控制药品质量，本研究用HPL测定淫羊藿苷，建立质量控制标准。1仪器与试药ShiadzuHPL色谱仪L-20ALiquidhratgraph,SIL-20AAutSapler,SPD-20ADideArrayDetetr,T-10ASVPlunvenLSlutin色谱工作站。水为

4、级纯化水，乙腈为色谱纯，其他为分析纯。淫羊藿苷对照品购自中国药品生物制品检定所批号：110737-202212;脑灵素胶囊：吉林百姓堂药业批号：20220702，平=0.3513g；批号：20220803，平=0.3622g；批号：20221102，平=0.3557g；规格：0.35g/粒.2试验方法与结果2.1色谱条件色谱柱：Diansil18柱4.6200，5，柱温：35，流动相：乙腈-水26：74，流速：1.0l/in，检测波长：270n。2.2溶液的制备2.2.1对照品溶液的制备精细称取淫羊藿苷对照品10.09g，加50%甲醇制成每1l含淫羊藿苷20.18g的溶液，备用。2.2.2供试

5、品溶液的制备取本品10粒，混匀，取2g，精细称定，置锥形瓶中，加50%甲醇50.00l，称重，超声处理功率250，频率33kHz40in，放冷，用50%甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液。2.2.3阴性对照溶液的制备取缺淫羊藿的处方，按供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。2.3系统适用性试验分别取对照品溶液、样品溶液、阴性对照溶液进样10l，色谱图见图1。淫羊藿苷峰保存时间为21.333in，阴性对照色谱图在淫羊藿苷峰位置无干扰峰，与其他组分别离完全，别离度为1.7，理论板数以淫羊藿苷峰计算为6239。图1HPL色谱图2.4线性关系考察精细汲取对照品溶液2、5、10、20、25l，按上述色

6、谱条件测定，以峰面积为纵坐标，以进样量为横坐标，进展线性回归，得方程：Y=-4.95103+2.23106X，=0.99998，线性范围为0.04040.504g。2.5精细度试验取对照品溶液连续进样7次，每次10l，峰面积积分值RSD=0.3%2.6重复性试验取同一批号20220702样品6份，按供试品液制备方法制备，依法测定，结果淫羊藿苷含量RSD=1.2%，说明本法重复性好。2.7稳定性试验取同一样品溶液20220702在0、6、12、24h分别进样10l，依法测定，淫羊藿苷峰面积RSD=1.3%，说明样品溶液在24h内稳定。2.8加样回收试验取含量的样品20220702，精细参加淫羊藿

7、苷对照品适量，按样品测定方法测定含量，计算回收率，结果见表1。表1回收率试验结果2.9样品测定取3批样品，按2.2.2项下方法制备样品溶液，依法测定淫羊藿苷的含量，结果见表2。表23批样品含量测定结果3讨论3.1考察流动相中乙腈对淫羊藿苷保存时间和别离度的影响。曾采用抗骨增生胶囊中测定淫羊藿苷的流动相乙腈-水30：702，乙腈-水28：72、乙腈-水27：73，结果说明乙腈量增大，保存时间提早，但别离效果差，与杂质峰无法别离，以乙腈-水26：74较适宜。3.2在提取方法中，利用黄酮类化合物与聚酰胺柱有亲和力，先水洗洗去杂质，再醇洗得淫羊藿苷类的方法，可除去大局部杂质峰，但某些保存时间与淫羊藿苷接近、影响别离度的关键峰不能除去；同样，碱水提取后酸化，用正丁醇萃取，还是不能解决这个问题。而且操作步骤增加，影响含量的准确性3。3.3在实验过程中，曾采用稀乙醇2、70%乙醇、50%甲醇、甲醇为提取溶剂，超声处理功率250，频率33kHz30in、40in、50in、60in4，滤过，取滤液，结果说明超声40in、50in、60in含量几乎无变化，且用50%甲醇测得含量最高，应选用50%甲醇超声40in。【参考文献】1卫生部药品标准.中药成方制剂第八册.144.2国家药典委员会.中国药典