HPLC法测定阿奇霉素散剂的含量

1、HPLC法测定阿奇霉素散剂的含量【摘要】目的建立HPL法测定阿奇霉素散剂的含量。方法采用8柱，以0.045l/L磷酸二氢胺溶液乙腈(21)(用三乙胺调pH至7.35)为流动相，流速1l/in，检测波长210n，柱温40。结果阿奇霉素的线性范围为50.31006g/l，平均回收率100.1%，r=1.0000，RSD=0.8%(n=9)。结论HPL法测定结果与微生物检定法比拟无显著性差异。本方法可准确、快速、简便地测定阿奇霉素散剂的含量。【关键词】高效液相色谱法；阿奇霉素散剂；含量测定ntentdeterinatinfazithryinpderbyHPLABSTRATbjetiveTestabl

2、ishanHPLethdfrthedeterinatinfazithryinpder.ethdThehratgraphinditinsereasflled:8lun,0.045l/Laniuphsphatenbasislutinaetnitrile(21)(adjustedtpH7.35ithtriethylaine)asbilephase,teperature:40,theflrate:1.0l/in,detetinavelength:210n.ResultsThelinearrangeasintherangef50.31006g/l(r=1.0000),andtheeanrevery(n=

3、9)as100.1%(RSD=0.8%).nlusinTheethdisrapid,sipleandauratetdeterinethententfazithryinpder.KEYRDSHPL;Azithryinpder;ntentdeterinatin阿奇霉素为氮杂内酯类抗生素，日抗基和?中国药典?2022年版1均采用微生物检定法测定其含量，?欧洲药典?4.6版和USP26版中均采用HPL法，专属性较强，试验周期短，但均使用的是聚合物极性柱，?欧洲药典?柱温为70，USP采用电化学检测器，其采用的设备在我国药检部门尚未普及2。抗生素微生物检定法操作较为复杂，试验周期长，影响因素多，误差较大

4、。本文采用HPL法测定阿奇霉素散剂含量，可使阿奇霉素与其有关物质得到较好的别离，方法简便、快速、准确。3方法与结果3.1方法的专属性考察精细称取阿奇霉素对照品20g，分别置10l容量瓶中，进展如下破坏试验：酸破坏：参加0.1l/L的盐酸溶液溶解并稀释至刻度，室温放置2h；碱破A：辅料空白；B：阿奇霉素对照品；：供试品；D：阿奇霉素与红霉素对照品(1：阿奇霉素；2：红霉素)图1HPL色谱图略坏：参加0.1l/L氢氧化钠溶液溶解并稀释至刻度，制成约2g/l的溶液，室温放置2h；氧化破坏：参加5%双氧水溶解并稀释至刻度，室温放置2h；热破坏：60加热破坏6h，加流动相溶解并稀释刻度。按上述色谱条件进

5、样记录图谱(图2)，结果说明阿奇霉素对热较稳定，其它条件均不稳定，破坏产生的各相关杂质峰与主峰均能基线别离，说明该色谱条件能准确测定阿奇霉素的含量。3.2线性关系精细称取阿奇霉素对照品，加流动相溶解并稀释，摇匀，制成2g/l的储藏液。精细量取储藏液0.5、1、2.5、5、10l分别置于10l容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，在上述色谱条件下分别进样20l，每一组浓度进样3次，记录峰面积。以阿奇霉素素对照品浓度x(g/l)对色谱峰面积y绘制标准曲线，其回归方程为：y0.4791x-1.7562r=1.0000结果说明，阿奇霉素浓度在50.31006g/l范围内呈良好线性关系。3.3进样精细度对

6、同一份对照品溶液，连续进样6次，按上述色谱条件测定峰面积，RSD为0.07%。3.4稳定性试验取上述溶液分别放置0、1、4、6、8和12h后测定，其峰面积根本一致，RSD为0.8%，说明溶液在12h内稳定。3.5最低检测限按信噪比31计，阿奇霉素的检测限为60ng。3.6加样回收率试验精细称取份含量的同一批号的样品，各置50l容量瓶中，分别参加精细称定的阿奇霉素对照品，用流动相制成相当于含量测定浓度的80%、100%和120%的溶液，3个浓度各测定三次，计算回收率，低、高、中三种浓度回收率分别为99.2%、100.8%和100.4%；RSD分别为0.66%、0.75%和0.36%，得平均回收率

7、为100.1%。因此选获得高效液相色谱法准确度较好。图2方法的专属性图谱略表1含量测定略4讨论(1)阿奇霉素为大环内酯类抗生素，紫外吸收较弱，取其末端吸收210n波长处测定，可得到满意的响应值。柱温较低时峰形拖尾，在40时明显改善。(2)对多种不同的流动相如乙腈0.1%三乙胺水溶液(3070)(用磷酸调pH值至4.0)3；0.5%磷酸二氢铵乙腈(7327)；甲醇水(928)4等进展试验，结果显示，以0.045l/L磷酸二氢胺溶液乙腈(21)(用三乙胺调pH至7.35)为流动相时峰形较好，保存时间适宜，主峰与辅料及杂质峰(红霉素峰)能到达基线别离。(3)阿奇霉素散剂中的辅料如十六醇、蔗糖等在210n处有吸收，但均与主峰很好别离，不干扰对阿奇霉素的含量测定。(4)虽然采用HPL法和微生物检定法对阿奇霉素散剂的含量进展测定没有显著性差异，但HPL法快速、简便，精细度高，误差小，结果准确。【参考文献】1国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)S.北京：化学工业出版社，2022：2912TheUnitedStatesPharapEialnventinIn.TheUnitedStatesPharapeialS.RhvilleD:TheUnitedStatesPharapeialv