GMS-六胺银-真菌讲课稿

1、Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善。GMS-六胺银-真菌-GMS六胺银-GROCOTTS改良法目的：鉴别真菌。原理：真菌细胞壁的粘多糖成分被氧化形成醛基。醛基与硝酸银反应，再将银还原成可见的金属形式。对照：含有真菌的组织。由曲霉病和肺结核病的组织块是首选的。固定：10%甲醛技术：4-5m石蜡切片。设备：酸清洗玻璃器皿，染色缸，微波炉。试剂：2%铬酸：三氧化铬Chromiumtrioxide10.0gm蒸馏水Distilledwater500.0ml混合溶解，保存期6个月。警告：腐蚀性酸，可能致癌，避免接触和吸入。1%偏重亚硫酸钠Sodiu

2、mMetabisulfite:偏重亚硫酸钠Sodiummetabisulfite5.0gm蒸馏水Distilledwater500.0ml混合溶解，保存期6个月。5%硼砂：四硼酸钠Sodiumborate5.0gm蒸馏水Distilledwater100.0ml混合溶解，保存期6个月。六胺银备用液：3%六亚甲基四胺Methenamine(四氮六甲圜hexamethylenetetramine)100.0ml5%硝酸银Silvernitrate5.0ml混合，盛于酸清洗过的棕色瓶中，冷藏，保存期3个月。警告：腐蚀性，可能致癌。工作液：六胺银备用液StockSilverMethen.25.0ml蒸

3、馏水Distilledwater25.0ml5%硼砂Borax2.5ml使用前新鲜配制，用后丢弃。0.5%氯化金：氯化金Goldchloride0.5gm蒸馏水Distilledwater100.0ml混合溶解，盛于酸清洗过的瓶中，冷藏，保存期1年。警告：避免接触和吸入。0.2%亮绿：亮绿LightgreenSFyellow.0.2gm蒸馏水Distilledwater100.0ml冰醋酸Glacialaceticacid0.2ml混合溶解。保存期6个月。警告：避免接触和吸入。安全：穿戴手套、护目镜和白大衣。保持所有打开盖的热溶液于通风橱中。避免接触和吸入染料和化学品。铬酸：对皮肤和粘膜有腐蚀

4、性，高度毒性，影响靶器官为肾。致癌物质。偏重亚硫酸钠：侵入途径为摄入，能引起胃肠道不适，对皮肤、眼睛和粘膜有刺激性。硝酸银：剧烈的皮肤和眼睛刺激，氧化剂。摄入将导致严重的胃肠道不适。可能致癌：可疑的肿瘤发生因素。硫代硫酸钠：摄入毒性。能引起胃刺激，接触对皮肤、眼睛和呼吸系统有刺激性。亮绿SFYellowish：可能致癌。程序：1.脱蜡至无水酒精。2.*2%铬酸微波高火45seconds，放置5minutes。3.流水冲洗蒸馏水稍洗。4.1%偏重亚硫酸钠温室1minute。5.流水冲洗，蒸馏水稍洗3changes。6.*六胺银工作液微波高火70seconds，在热溶液中摇动玻片，直至组织应呈褐纸

5、袋色。7.蒸馏水稍洗2changes。8.0.5%氯化金1minute或直至灰色。9.蒸馏水稍洗。10.5%Hypo,3minutes.11.流水冲洗，蒸馏水稍洗。12.亮绿液1minute.13.蒸馏水稍洗。14.脱水、透明和封固。*传统方法：5%铬酸60C水浴1hour。银液：60C水浴1hour或直至棕色。结果：真菌：黑色背景：绿色注意：1.如果铬酸变褐色是需要更换，传统方法5%铬酸胜于2%，高浓度的铬酸容易在微波处理时引起组织掉片。2.如果微生物不变黑色，检查：a.铬酸是否新鲜。b.偏重亚硫酸钠是否新鲜。c.硼砂是否新鲜f。3.如果银液出现混蚀或在染色缸上出现银镜时，重新配制溶液。参考

6、文献：SheehanD,HrapchakB,TheoryandpracticeofHistotechnology,2ndEd,1980,pp243-246,BattellePress,OhioLunaL,ManualofHistologicStainingMethodsoftheAFIP,3rdEd,1968,pp230-231,McGraw-Hill,NYCrookham,J,Dapson,R,HazardousChemicalsintheHistopathologyLaboratory,2ndED,1991,Anatech程序卡GMS-METHENAMINESILVER,GROCOTTS,

7、MODIFIED对照：含有真菌的组织。由曲霉病和肺结核病的组织块是首选的。技术：4-5m石蜡切片。程序：1.脱蜡至无水酒精。2.*2%铬酸微波高火45seconds，放置5minutes。3.流水冲洗蒸馏水稍洗。4.1%偏重亚硫酸钠温室1minute。5.流水冲洗，蒸馏水稍洗3changes。6.*六胺银工作液微波高火70seconds，在热溶液中摇动玻片，直至组织应呈褐纸袋色。7.蒸馏水稍洗2changes。8.0.5%氯化金1minute或直至灰色。9.蒸馏水稍洗。10.5%Hypo,3minutes.11.流水冲洗，蒸馏水稍洗。12.亮绿液1minute.13.蒸馏水稍洗。14.脱水、透

8、明和封固。*传统方法：5%铬酸60C水浴1hour。银液：60C水浴1hour或直至棕色。结果：真菌：黑色背景：绿色安全：所有打开盖的热溶液于通风橱中。避免接触和吸入染料和化学品。2%铬酸：三氧化铬Chromiumtrioxide10.0gm蒸馏水Distilledwater500.0ml混合溶解，保存期6个月。警告：腐蚀性酸，可能致癌，避免接触和吸入。1%偏重亚硫酸钠:偏重亚硫酸钠Sodiummetabisulfite5.0gm蒸馏水Distilledwater500.0ml混合溶解，保存期6个月。5%硼砂：四硼酸钠Sodiumborate5.0gm蒸馏水Distilledwater100.

9、0ml混合溶解，保存期6个月。六胺银备用液：3%六亚甲基四胺Methenamine(四氮六甲圜hexamethylenetetramine)100.0ml5%硝酸银Silvernitrate5.0ml混合，盛于酸清洗过的棕色瓶中，冷藏，保存期3个月。警告：腐蚀性，可能致癌。工作液：六胺银备用液StockSilverMethen.25.0ml蒸馏水Distilledwater25.0ml5%硼砂Borax2.5ml使用前新鲜配制，用后丢弃。0.5%氯化金：氯化金Goldchloride0.5gm蒸馏水Distilledwater100.0ml混合溶解，盛于酸清洗过的瓶中，冷藏，保存期1年。警告：

10、避免接触和吸入。0.2%亮绿：亮绿LightgreenSFyellow.0.2gm蒸馏水Distilledwater100.0ml冰醋酸Glacialaceticacid0.2ml混合溶解。保存期6个月。5%硝酸银备用液：硝酸银Silvernitrate25.0gm蒸馏水Distilledwater500.0ml用酸清洗过的瓶。冷藏，保存期6个月。警告：腐蚀性，可能致癌。日期：技师：使用限期：3%六亚甲基四胺六亚甲基四胺Methenamine30.0gm蒸馏水Distilledwater1000.0ml用酸清洗过的瓶。冷藏，保存期6个月。警告：避免接触和吸入。日期：技师：使用限期：1%偏重亚硫

11、酸钠：偏重亚硫酸钠Sodiummetabisulfite5.0gm蒸馏水Distilledwater500.0ml混合溶解，保存期6个月。警告：避免接触和吸入。日期：技师：使用限期：1%偏重亚硫酸钠日期：技师：六胺银备用液：3%六亚甲基四胺(四氮六甲圜hexamethylenetetramine)100.0ml5%硝酸银Silvernitrate5.0ml混合，盛于酸清洗过的棕色瓶中，冷藏，保存期3个月。警告：腐蚀性，可能致癌。日期：技师：使用限期：5%硼砂：四硼酸钠Sodiumborate5.0gm蒸馏水Distilledwater100.0ml混合溶解，保存期6个月。日期：技师：使用限期：2%铬酸：三氧化铬Chromiumtrioxide10.0gm蒸馏水Distilledwater500.0ml混合溶解，保存期6个月。警告：腐蚀性酸，可能致癌，避免接触和吸入。日期：技师：使用限期：2%铬酸日期：技师：0.5%氯化金：氯化金Goldchloride0.5gm蒸馏水Distilledwater100.0ml混合溶解，盛