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文档简介
1、Good is good, but better carries it.精益求精,善益求善。GMS-六胺银-真菌-GMS六胺银-GROCOTTS改良法目的:鉴别真菌。原理:真菌细胞壁的粘多糖成分被氧化形成醛基。醛基与硝酸银反应,再将银还原成可见的金属形式。对照:含有真菌的组织。由曲霉病和肺结核病的组织块是首选的。固定:10%甲醛技术:4-5m石蜡切片。设备:酸清洗玻璃器皿,染色缸,微波炉。试剂:2%铬酸:三氧化铬Chromiumtrioxide10.0gm蒸馏水Distilledwater500.0ml混合溶解,保存期6个月。警告:腐蚀性酸,可能致癌,避免接触和吸入。1%偏重亚硫酸钠Sodiu
2、mMetabisulfite:偏重亚硫酸钠Sodiummetabisulfite5.0gm蒸馏水Distilledwater500.0ml混合溶解,保存期6个月。5%硼砂:四硼酸钠Sodiumborate5.0gm蒸馏水Distilledwater100.0ml混合溶解,保存期6个月。六胺银备用液:3%六亚甲基四胺Methenamine(四氮六甲圜hexamethylenetetramine)100.0ml5%硝酸银Silvernitrate5.0ml混合,盛于酸清洗过的棕色瓶中,冷藏,保存期3个月。警告:腐蚀性,可能致癌。工作液:六胺银备用液StockSilverMethen.25.0ml蒸
3、馏水Distilledwater25.0ml5%硼砂Borax2.5ml使用前新鲜配制,用后丢弃。0.5%氯化金:氯化金Goldchloride0.5gm蒸馏水Distilledwater100.0ml混合溶解,盛于酸清洗过的瓶中,冷藏,保存期1年。警告:避免接触和吸入。0.2%亮绿:亮绿LightgreenSFyellow.0.2gm蒸馏水Distilledwater100.0ml冰醋酸Glacialaceticacid0.2ml混合溶解。保存期6个月。警告:避免接触和吸入。安全:穿戴手套、护目镜和白大衣。保持所有打开盖的热溶液于通风橱中。避免接触和吸入染料和化学品。铬酸:对皮肤和粘膜有腐蚀
4、性,高度毒性,影响靶器官为肾。致癌物质。偏重亚硫酸钠:侵入途径为摄入,能引起胃肠道不适,对皮肤、眼睛和粘膜有刺激性。硝酸银:剧烈的皮肤和眼睛刺激,氧化剂。摄入将导致严重的胃肠道不适。可能致癌:可疑的肿瘤发生因素。硫代硫酸钠:摄入毒性。能引起胃刺激,接触对皮肤、眼睛和呼吸系统有刺激性。亮绿SFYellowish:可能致癌。程序:1.脱蜡至无水酒精。2.*2%铬酸微波高火45seconds,放置5minutes。3.流水冲洗蒸馏水稍洗。4.1%偏重亚硫酸钠温室1minute。5.流水冲洗,蒸馏水稍洗3changes。6.*六胺银工作液微波高火70seconds,在热溶液中摇动玻片,直至组织应呈褐纸
5、袋色。7.蒸馏水稍洗2changes。8.0.5%氯化金1minute或直至灰色。9.蒸馏水稍洗。10.5%Hypo,3minutes.11.流水冲洗,蒸馏水稍洗。12.亮绿液1minute.13.蒸馏水稍洗。14.脱水、透明和封固。*传统方法:5%铬酸60C水浴1hour。银液:60C水浴1hour或直至棕色。结果:真菌:黑色背景:绿色注意:1.如果铬酸变褐色是需要更换,传统方法5%铬酸胜于2%,高浓度的铬酸容易在微波处理时引起组织掉片。2.如果微生物不变黑色,检查:a.铬酸是否新鲜。b.偏重亚硫酸钠是否新鲜。c.硼砂是否新鲜f。3.如果银液出现混蚀或在染色缸上出现银镜时,重新配制溶液。参考
6、文献:SheehanD,HrapchakB,TheoryandpracticeofHistotechnology,2ndEd,1980,pp243-246,BattellePress,OhioLunaL,ManualofHistologicStainingMethodsoftheAFIP,3rdEd,1968,pp230-231,McGraw-Hill,NYCrookham,J,Dapson,R,HazardousChemicalsintheHistopathologyLaboratory,2ndED,1991,Anatech程序卡GMS-METHENAMINESILVER,GROCOTTS,
7、MODIFIED对照:含有真菌的组织。由曲霉病和肺结核病的组织块是首选的。技术:4-5m石蜡切片。程序:1.脱蜡至无水酒精。2.*2%铬酸微波高火45seconds,放置5minutes。3.流水冲洗蒸馏水稍洗。4.1%偏重亚硫酸钠温室1minute。5.流水冲洗,蒸馏水稍洗3changes。6.*六胺银工作液微波高火70seconds,在热溶液中摇动玻片,直至组织应呈褐纸袋色。7.蒸馏水稍洗2changes。8.0.5%氯化金1minute或直至灰色。9.蒸馏水稍洗。10.5%Hypo,3minutes.11.流水冲洗,蒸馏水稍洗。12.亮绿液1minute.13.蒸馏水稍洗。14.脱水、透
8、明和封固。*传统方法:5%铬酸60C水浴1hour。银液:60C水浴1hour或直至棕色。结果:真菌:黑色背景:绿色安全:所有打开盖的热溶液于通风橱中。避免接触和吸入染料和化学品。2%铬酸:三氧化铬Chromiumtrioxide10.0gm蒸馏水Distilledwater500.0ml混合溶解,保存期6个月。警告:腐蚀性酸,可能致癌,避免接触和吸入。1%偏重亚硫酸钠:偏重亚硫酸钠Sodiummetabisulfite5.0gm蒸馏水Distilledwater500.0ml混合溶解,保存期6个月。5%硼砂:四硼酸钠Sodiumborate5.0gm蒸馏水Distilledwater100.
9、0ml混合溶解,保存期6个月。六胺银备用液:3%六亚甲基四胺Methenamine(四氮六甲圜hexamethylenetetramine)100.0ml5%硝酸银Silvernitrate5.0ml混合,盛于酸清洗过的棕色瓶中,冷藏,保存期3个月。警告:腐蚀性,可能致癌。工作液:六胺银备用液StockSilverMethen.25.0ml蒸馏水Distilledwater25.0ml5%硼砂Borax2.5ml使用前新鲜配制,用后丢弃。0.5%氯化金:氯化金Goldchloride0.5gm蒸馏水Distilledwater100.0ml混合溶解,盛于酸清洗过的瓶中,冷藏,保存期1年。警告:
10、避免接触和吸入。0.2%亮绿:亮绿LightgreenSFyellow.0.2gm蒸馏水Distilledwater100.0ml冰醋酸Glacialaceticacid0.2ml混合溶解。保存期6个月。5%硝酸银备用液:硝酸银Silvernitrate25.0gm蒸馏水Distilledwater500.0ml用酸清洗过的瓶。冷藏,保存期6个月。警告:腐蚀性,可能致癌。日期:技师:使用限期:3%六亚甲基四胺六亚甲基四胺Methenamine30.0gm蒸馏水Distilledwater1000.0ml用酸清洗过的瓶。冷藏,保存期6个月。警告:避免接触和吸入。日期:技师:使用限期:1%偏重亚硫
11、酸钠:偏重亚硫酸钠Sodiummetabisulfite5.0gm蒸馏水Distilledwater500.0ml混合溶解,保存期6个月。警告:避免接触和吸入。日期:技师:使用限期:1%偏重亚硫酸钠日期:技师:六胺银备用液:3%六亚甲基四胺(四氮六甲圜hexamethylenetetramine)100.0ml5%硝酸银Silvernitrate5.0ml混合,盛于酸清洗过的棕色瓶中,冷藏,保存期3个月。警告:腐蚀性,可能致癌。日期:技师:使用限期:5%硼砂:四硼酸钠Sodiumborate5.0gm蒸馏水Distilledwater100.0ml混合溶解,保存期6个月。日期:技师:使用限期:2%铬酸:三氧化铬Chromiumtrioxide10.0gm蒸馏水Distilledwater500.0ml混合溶解,保存期6个月。警告:腐蚀性酸,可能致癌,避免接触和吸入。日期:技师:使用限期:2%铬酸日期:技师:0.5%氯化金:氯化金Goldchloride0.5gm蒸馏水Distilledwater100.0ml混合溶解,盛
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