实验诊断教学ppt课件

1、实验诊断课件教学第三章 出血、血栓与止血检测 生理形状下，血液在血管内流动，它既不会溢出血管外引起出血，也不会在血管内凝固构成血栓，这主要是由于机体内存在着完善的止凝血与抗凝血机制，这种机制呈动态平衡形状。机体的止血机制包括，血管壁和血小板的止血作用凝血因子和抗凝血因子的止血作用纤维蛋白溶解因子和抗纤溶因子的溶栓作用等。 病理形状下，止凝血和抗凝血机制的动态平衡失调，假设止凝血机制亢进或抗凝血机制减退便会构成血栓，临床上出现血栓性疾病。反之，假设止凝血机制减退，或抗凝血机制亢进，便会引起出血，临床上出现出血性疾病，本章重点引见血栓与止血的检测以及检测工程的选择和运用。第一节 血管壁检测第二节

2、血小板检测第三节 凝血因子检测第四节 抗凝系统检测第五节 纤溶活性检测第六节 血液流变学检测第七节 检测工程的选择和运用本章重点、难点内容及习题第一节 血管壁检测一出血时间 原理将毛细血管刺破，血液自然流出到自然停顿所需的时间。 参考值测定器法：6.92.1min，超越9min为异常。 临床意义 BT延伸见于： 1、血小板明显减少，如血小板减少性紫癜； 2、血小板功能异常； 3、血管异常，如遗传性出血性毛细血管扩张症； 4、药物，如服用乙酰水杨酸等。二血管性血友病因子抗原测定 原理 在含血管性血友病因子抗体的琼脂凝胶板中参与一定量受检血浆，在电场作用下泳动一定时间出现抗原-抗体反响构成的火箭样

3、沉淀峰，其高度与受检血浆中VWF浓度呈正相关，计算血浆中血管性血友病因子抗原的含量。 VWFAg是血管内皮细胞促凝目的之一，它由血管内皮细胞合成和分泌，参与血小板的粘附和聚集反响，起促凝作用。 1、减低：见于血管性血友病VWD，是诊断VWD及其分型的目的之一。 2、增高：见于血栓性疾病，如急性冠状动脉综合症ACS，心梗，心绞痛，脑血管病变，DM，妊高症，肾小球疾病，大手术后，恶性肿瘤，免疫性疾病，感染性疾病，MDS等。第二节 血小板检测 一血小板计数 二血小板相关免疫球蛋白测定PAIg 参考值PAIgG为078.8ng/107血小板； PAIgM为07.0ng/107血小板； PAIgA为02

4、.0ng/107血小板。 临床意义增高：主要见于ITP患者。也见于输血后紫癜、SLE等。 察看病情：治疗有效，PAIg程度下降；复发那么升高。三血小板粘附实验血小板粘附(PAgT)实验常用玻璃柱法、玻璃球法和玻璃器法。原理血小板具有粘附损伤的血管外表或异物外表的特性。当一定数量的血小板粘附于异物外表上，测定粘附前与粘附后血小板总数的百分率，即为血小板粘附率()。参考值玻璃柱法:62.58.61临床意义1.PAgT增多:见于血凝形状和血栓性疾病，如心绞痛2.PAgT减低:见于血小板无力症、血友病、宏大血小板综合征。原理采用血小板聚集仪比浊法进展血小板聚集实验(PAgT):在富血小板血浆(PRP)

5、中参与诱导剂时，由于血小板发生聚集，悬液的浊度就发生相应的改动，透光度添加。四血小板聚集实验参考值血小板聚集图像的参考值见表临床意义 1.PAgT减低:见于血小板无力症、宏大血小板综合征。 2.PAgT增多:鉴于血液高凝形状和血栓性疾病，如心肌堵塞。第三节 凝血因子测定 一活化部分凝血活酶时间测定 原理活化部分凝血活酶时间(APTT)测定，在受检血浆中参与部分凝血活酶磷脂悬液，在Ca2+的作用下察看血浆凝固所需求的时间，是内源性凝血系统的挑选实验。参考值3243S，较正常对照值延伸10S以上异常临床意义是目前引荐运用的内源凝血系统的挑选实验，又是监测肝素治疗的首先目的。 延伸，见于因子、PK，

6、HMWK和纤维蛋白原缺乏。缩短，见于血栓性疾病和血栓前形状。二血浆凝血酶原时间测定 原理 血浆凝血酶原时间(PT)测定，在受检血浆中参与组织凝血活酶和Ca2+，使凝血酶原转变为凝血酶，后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，察看血浆凝固所需求的时间。PT是反映外源性凝血系统的挑选实验 参考值 PT正常值为1113S,病人测定值超越对照值3s以上为异常 临床意义 1.PT延伸:见于先天性凝血因子、及纤维蛋白原缺乏 2.PT缩短:见于血液高凝形状和血栓性疾病如DIC早期 3.口服抗凝剂的监测三血浆纤维蛋白原测定原理在受检血浆中参与一定量凝血酶，后者使血浆中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白。临床意义增高：见于DM

7、，急性心梗，急性传染病，风湿热，急性肾小球肾炎，肾病综合症，灼伤，MM，休克，大手术后，妊高症，急性感染，恶性肿瘤以及血栓前形状，部分老年人等。减低：见于DIC，原发性纤溶症，低无纤维蛋白原血症，重症肝炎和肝硬化。四血浆因子定性实验原理在受检血浆中参与Ca+溶液，使纤维蛋白原变成纤维蛋白凝块，将此凝块置入5mol/L尿素溶液中，假设受检血浆缺乏因子，那么构成的可溶性纤维蛋白凝块易溶于尿素溶液中。临床意义假设纤维蛋白凝块在24h内完全溶解，那么表示因子缺乏，见于先天性因子缺乏症和获得性因子明显减低，如肝病，SLE，DIC，原发性纤溶症，恶性肿瘤，恶性贫血，溶血性贫血以及抗抗体等。第四节 抗凝系统

8、检测一血浆凝血酶时间原理TT是在受检血浆中参与“规范化凝血酶溶液，测定开场出现纤维蛋白丝所需求的时间。临床意义延伸：见于低无纤维蛋白原血症，和异常纤维蛋白原血症，血中FDP增高，血中有肝素或类肝素物质存在。二甲苯胺蓝纠正实验原理甲苯胺蓝呈碱性，有中和肝素的作用，在TT延伸的受检血浆中参与少量甲苯胺蓝，再测定TT。假设延伸的TT恢复到正常或明显缩短，那么表示受检血浆中有类肝素物质存在或肝素增多，假设不缩短，那么表示受检血浆中存在其他抗凝血酶类物质或缺乏纤维蛋白原。临床意义血中类肝素物质增多，见于严重肝病，DIC，过敏性休克，运用氮芥类药物，放疗后，肝叶切除后，肝移植后等。三APTT交叉实验 本实

9、验是用于鉴别凝血因子缺乏或有抗凝物质的存在，延伸的APTT，假设能被1/2量的正常新颖血浆所纠正，表示受检血浆中能够缺乏凝血因子，假设不能纠正那么表示受检血浆中能够存在抗凝物质。第五节 纤溶活性检测 纤溶酶可将已构成的血凝块加以溶解，产生纤维蛋白原的降解产物，从而反映纤溶活性。纤溶活性加强可致出血，纤溶活性降低可致血栓一优球蛋白溶解时间血浆优球蛋白组分含有纤维蛋白原,纤溶酶原和组织型纤溶酶原激活物等,但不含纤溶酶抑制物。将受检血浆参与到PH4.5的酸性溶液中使优球蛋白沉淀,经离心除去纤溶抑制物,并将沉淀溶于缓冲溶液中,再参与钙或凝血酶使其凝固。在37下察看凝块完全溶解所需时间参考值加钙法120

10、min 加凝血酶法为(12324)min临床意义 本实验敏感性低，特异性高1、纤维蛋白凝块70min内完全溶解2、纤维蛋白凝块在超越120min还不溶解二D-二聚体定量实验原理 D-二聚体是交联纤维蛋白降解产物之一，为继发性纤溶特有的代谢物。将D-二聚体单抗包被在酶标反响板，参与受检血清，血浆中的D-二聚体与包被在反响板D-二聚体单抗结合，然后再加酶标志的D-二聚体抗体，与包被的D-二聚体结合，最后参与底物显色，显色深浅与血浆中D-二聚体含量呈正相关。临床意义阴性是排除深静脉血栓和肺血栓栓塞重要实验；阳性是诊断DIC和察看溶血栓治疗的有用实验，凡有血块构成的出血，本实验均可阳性。三血浆纤维蛋白

11、原降解产物定性实验原理于受检血浆中参与血浆蛋白降解产物，假设血液中FDP浓度多，胶乳颗粒发生凝集。临床意义FDP增高见于原发性纤溶和继发性纤溶，后者如DIC,恶性肿瘤，急性早幼粒白血病，肺血栓栓塞，深静脉血栓构成，肾脏疾病，肝脏疾病，器官移植排斥反响，溶血栓治疗等。四血浆硫酸鱼精蛋白副凝固实验原理在受检的血浆中参与硫酸鱼精蛋白溶液，假设血浆中存在可溶性纤维蛋白单体与纤维蛋白降解产物复合物那么鱼精蛋白使其解离析出纤维蛋白单体，纤维蛋白单体自行聚合成肉眼可见的纤维状物，此为阳性反响。临床意义 阳性：见于DIC早中期 本实验是鉴别原发性纤溶和继发性纤溶的实验之一。第六节 血液流变学检测血液流变学是运

12、用物理和化学的手段研讨血液中细胞成分与血浆成分在宏观和微观下的变形和流动特性，也是研讨与血液直接接触的血管构造的流变特性。一、全血粘度测定临床意义增多:见于血浆球蛋白和(或)血脂增多的疾病，如多发性骨髓病、原发性巨球蛋白血症、糖尿病、高脂血症减低：见于贫血，重度纤维蛋白原和其他凝血因子缺乏症。二、血浆黏度测定临床意义见于血浆球蛋白和血脂增高的疾病，如多发性骨髓瘤，原发性巨球蛋白血症，糖尿病，高脂血症，动脉粥样硬化等。第七节 检测工程的选择和运用 血栓与止血的检测主要用于临床有出血倾向、出血病患者以及血栓前形状、血栓病患者的临床诊断、鉴别诊断、疗效察看和预后判别等，也用于抗血栓和溶血栓药物治疗的

13、监测等。一一期止血缺陷筛检实验的选择和运用 一期止血缺陷是指血管壁和血小板缺陷所致出血病。选用血小板计数(PLT)和出血时间BT作为筛检实验，根据筛检实验的结果，大致由以下四种情况：1、BT和PLT都正常 除正常人外，多数是由单纯血管壁通透性和或脆性添加所致的血管性紫癜所致。临床上常见于过敏性紫癜、单纯性紫癜和其他血管性紫癜等。2、BT延伸，PLT减少 多数是由血小板数量减少所致的血小板减少症。临床上多见于原发性和继发性血小板减少性紫癜。3、BT延伸、PLT增多 多数是由血小板数量增多所致的血小板增多症。临床上多见于原发性和反响性血小板增多症。4、BT延伸、PLT正常 多数是由血小板功能异常或

14、某些凝血因子严重缺乏所致的出血病，如血小板无力症、贮藏池病以及低无纤维蛋白原血症、血管性血友病vWD等。二二期止血缺陷筛检实验的选择和运用 二期止血缺陷是指凝血因子缺乏或病理性抗凝物质存在所致的出血病。选用APTT和PT作为筛检实验，大致有以下四种情况：1、APTT和PT都正常 除正常人外，仅见于遗传性和获得性因子缺陷症。2、APTT延伸,PT正常 多数是由内源性凝血途径缺陷所引起的出血病，如遗传性和获得性因子、缺陷症等。3、APTT正常，PT延伸 多数是由外源性凝血途径缺陷所引起的出血病，如遗传性和获得性因子缺陷症等。4、APTT和PT都延伸 多数是由共同凝血途径缺陷所引起的出血病，如遗传性

15、和获得性因子、凝血酶原因子和纤维蛋白原因子缺陷症。 此外，临床运用肝素治疗时，APTT也相应延伸；运用口服抗凝剂治疗时，PT也相应延伸；同时运用肝素、华法林以及纤溶综合症、抗磷脂抗体时，APTT与PT可同时延伸。三纤溶亢进筛检实验的选择和运用 纤溶亢进性出血指纤维蛋白原和某些凝血因子被纤溶酶降解所引起的出血。可选用FDPs和D-D作为筛检实验，大致由以下四种情况：1、FDPs和D-D均正常 表示纤溶活性正常，临床的出血病症能够与纤溶症无关。2、FDPs阳性，D-D阴性 实际上只见于纤维蛋白原被降解，而纤维蛋白未被降解，即原发性纤溶。实践上这种情况多属于FDPs的假阳性，见于肝病、手术出血、重型

16、DIC、纤溶早期、猛烈运动后、类风湿关节炎、抗RhD抗体存在等。3、FDPs阴性，D-D阳性 实际上只见于纤维蛋白被降解，而纤维蛋白原未被降解，即继发性纤溶。实践上这种情况多数属于FDPs的假阴性，见于DIC、静脉血栓、动脉血栓和溶血栓治疗等。4、FDPs和D-D都阳性 表示纤维蛋白原和纤维蛋白同时被降解，见于继发性纤溶，如DIC和溶血栓治疗后。这种情况临床最为多见。四抗血栓和溶血栓治疗监测工程的选择和运用 临床上常用抗血栓药以预防血栓构成，常用溶血栓药以溶解血栓。但是，这些药物运用过量会呵斥出血，用量缺乏那么达不到预期疗效。因此在运用这些药物的过程中，必需选择相应的目的作实验室监测。1、普通

17、肝素uFH：首选APTT作为监测实验，使APTT测定值维持在正常对照的1.5-2.5倍。2、低分子肝素LMWH：较大剂量可选用抗因子Xa活性测定，预防性用药使其维持在0.2-0.4抗活化因子Xa国际单位/ml，治疗用药使其维持在0.5-0.7抗活化因子Xa国际单位/ml。3、血小板计数：无论运用uFH或LMWH，均需察看血小板计数，假设血小板计数小于50X109需暂时停药。4、溶栓治疗的监测：可选用纤维蛋白原Fg、凝血酶原TT、和纤维蛋白原降解产物作为出血监测实验室目的。目前，多数作者以为，Fg在1.2-1.5g/ml，TT在正常对照1.5-2.5倍，FDP在300-400mg/L最为适宜。血

18、浆凝血因子及其特征因子名称合成部位半寿期(h)功能分类凝血途径纤维蛋白原肝72-108结构蛋白、细胞粘附共同凝血酶原肝60-96维生素K依赖蛋白酶原共同组织因子多种细胞辅因子外源钙离子易变因子肝、血小板15-36辅因子共同稳定因子肝3-6维生素K依赖蛋白酶原外源抗血友病球蛋白肝等15辅因子内源Chrismas因子肝18-24维生素K依赖蛋白酶原内源Stuart-Prower因子肝30-50维生素K依赖蛋白酶原共同血浆凝血活酶前质肝52蛋白酶原内源接触因子肝48-6蛋白酶原内源纤维蛋白稳定因子肝巨核细胞72-120转谷氨酰胺酶原激肽释放酶原肝35蛋白酶原内源高相对分子质量激肽原肝150辅因子内源内源性途径外源性途径活性外表激肽释放酶前激肽释放酶高分子量激肽源反响断裂催化释放aE+aCa2+激肽(碎片)aa+PF3Ca2+a-Ca2+-复合物PF3Ca2+组织因子()+Ca2+Ca2+- 复合物a凝血酶a+磷脂Ca2+Ca2+Ca2+Ca2+a-Ca2+-复合物PF3Ca2+Ca2+RVV磷脂(凝血活酶)凝血酶原凝血酶纤维蛋白原纤维蛋白单体+肽可溶性纤维蛋白巩固的纤维蛋白aa+PF3Ca2+凝血酶