参照EP方案在不同检测系统评价尿微量白蛋白试剂的分析性能(共6页)

1、PAGE PAGE 8参照(cnzho)EP方案在不同检测(jin c)系统评价(pngji)尿微量白蛋白试剂的分析性能摘要：目的 通过不同检测系统测定尿微量白蛋白的分析性能评价，以探讨新成生物公司尿微量白蛋白测定试剂盒与英国朗道测定试剂盒在分析性能上的差异。方法 在同一台全自动生化分析仪上，同时对两个检测系统的正确度、精密度、最低检测限、测定范围、方法学比对共五项性能指标进行评价。结果 在正确度实验，新成和朗道试剂的相对偏差分别都小于10%。精密度试验，两种试剂的批内CV分别都小于5%。两种试剂的检测低限分别为：0.87mg/L、0.27mg/L。线性试验结果，新成试剂的回归方程和相关系数分

2、别为： Y0.9827X+0.5455，R20.9987（浓度范围0-400mg/L），朗道试剂的回归方程和相关系数分别为：Y1.0356X-0.9091，R20.9996（浓度范围0.0-202.8mg/L），新成试剂的测定范围更广。方法比对试验，试验结果表明两种试剂相关性良好，回归方程和相关系数分别为：Y1.2555X-1.6888，R20.9976。结论 两种检测系统对尿微量白蛋白的测定能得到一致的结果，其性能指标均能满足临床使用要求，无明显差异。关键词：尿微量白蛋白；分析性能评价；CLSI EP方案The evaluation of the analytical performance

3、 by CLSI EP protocols between two different detection system of microalbuminuria TIAN Xiujun(Department of Clinical Laboratory,the Fourth People,s hospital of zibo city,Shandong province 255000)Abstract :Purpose Through evaluate the analytical performance between two different detection systems of m

4、icroalbuminuria, to probe the analytical performance of sichuan xincheng conpanys detecting system,and find the differences between the xincheng detecting system and the England RANDOX detecting system. Methods On the same automatic biochemical analyzer, evaluate the two detection systems five indic

5、ators such as accuracy, precision, minimum detection limit, linear range and the method comparison. Results In the accuracy test, the two reagents relative deviation are less than 10%. In the precision test, the within run coefficient of variation are less than 5%. The two reagents minimum detection

6、 limit respectively are 1.03mg/L and 0.27mg/L. In the linear test,the linear regression equation and correlation coefficient of xinchengs reagent : Y0.9827X+0.5455，R20.9987(the linear range is 0-400mg/L); The linear regression equation and Correlation coefficient of RANDOXs reagent : Y1.0356X-0.9091

7、，R20.9996 (the linear range is0.0-202.8mg/L); the xincheng reagents linear range is wider than the RANDOXs. In the method comparison test, the test results show that the two reagents correlation is good, the linear regression equation and correlation coefficient Y1.2555X-1.6888，R20.9976.The Conclusi

8、on The determination of the microalbuminuria within xinchengs reagent and RANDOXs reagent can get the consistent result, all the performance indexs can meet the request of the clinical, theres no significant difference between the two kands of reagents.Key Words: microalbuminuria;The evaluation of t

9、he analytical performance; CLSI EP尿微量白蛋白（MAlb）是指尿中白蛋白在30一300mg/L范围内的临床病理指征，即超出正常参考值上限(shngxin)而未检出临床蛋白尿的中间阶段1。在正常(zhngchng)生理状态下，肾小球滤过(l u)的滤液中仅仅含有极少量的白蛋白，且大部分被肾小管重吸收。因此尿白蛋白的异常增多对肾脏功能损伤的诊断有重要的参考价值。同时，MAlb是检测血管损伤的重要指标，是糖尿病、高血压、心血管疾病、肾病血管损伤的指标，对判断疾病发生、发展、预后有重要的参考价值。在过去的研究中临床上重视糖尿病患者MAlb的变化，但是近年的研究发现MA

10、lb对分析血管相关疾病的进展具有十分重要的意义。因此扩大MAlb检查的应用范围，已经作为心血管疾病、高血压等疾病的常规检查项目。通过这一检查可以发现潜在病变，为疾病的早期诊断、早期治疗提供有用的信息及实验室指标。现在尿微量白蛋白的检测方法主要包括ELISA方法、Albustix法、免疫比浊法、RIA方法2，另外临床上也有尿液白蛋白的简易试条半定量法。如Micral-Test、Clinitek Strips法等，用随意尿标本，结果以白蛋白/肌酐比值或白蛋白/比密比值表示，用于白蛋白尿的过筛。相比之下，免疫比浊法精度高，操作简便，在全自动生化分析仪上就能进行，在临床上得到了广泛的应用。本文就四川新

11、成生物科技有限责任公司尿微量白蛋白检测试剂盒（免疫比浊法）和朗道尿微量白蛋白测定试剂盒（免疫比浊法）的分析性能进行评价，以了解其差异。具体实验结果如下：材料与方法1.检测系统检测(jin c)系统1试剂(shj)：四川新成生物科技有限责任公司(n s)尿微量白蛋白测定试剂盒（免疫比浊法）及配套校准品（批号：0309021）。检测系统2试剂：朗道尿微量白蛋白测定试剂盒（免疫比浊法）及配套校准品。（批号：141710）检测系统1、2用仪器：日立7060全自动生化分析仪（HITACH 7180）。检测系统1、2用样本：本院门诊随机尿液标本40例。检测系统1、2用质控品：MAlb专用质控品（四川新成生

12、物科技有限责任公司）Level-1: MAlb高值，靶值为127mg/L,批号：0409011，Level-2：MAlb低值，靶值为33 mg/L，批号：0409011。2. 实验方法有关正确度、精密度、最低检测限、线性范围评价实验、方法比对实验等评价指标参照相关CLSI EP方案及国内外惯用方法进行。2. 1实验参数实验参数设置按照试剂说明书要求进行编写。2.2 正确度参照在CLSI EP-10文件中对准确度的定义，正确度表示测量结果与真值的一致程度。正确度往往通过相对偏差来衡量。在本次实验中，同时重复三次测定MAlb专用质控品，以三次测定结果的平均值作为最终测定值，计算其与靶值之间的偏差来

13、衡量正确度。2.3 精密度参照在CLSI EP-5A23文件中对准确度的定义，精密度表示在测量结果中随机误差大小的程度，指在一定条件下进行多次测定时，所测得结果之间的符合程度。精密度无法直接衡量，往往以不精密度表达，常用标准差（S）或变异系数（CV%）表示，较小的S或CV%表示具有较高的精密度。在本次实验中，分别抽取高值和低值的临床混合尿液标本，同时用两种试剂重复测定20次，计算批内精密度。2.4 最低检测限最低检测(jin c)限是指检测系统(xtng)可检出的最低分析物浓度，包括检测低限(LLD)、生物(shngw)检测限(BLD)和功能灵敏度(FS)。本实验最低检测限即检测低限。在同一条

14、件下，两种试剂同时重复测定零浓度标本20次，在99.7%可能性时，LLD=空白+3S空白。2.5 线性评价实验参照在CLSI EP6-A4文件中对线性评价实验的要求，取高低值混合尿液标本各一份，按照0：10、1：9、2：8、3：7、4：6、5：5、6：4、7：3、8：2、9：1、10：0的比例混合，分别编号，随机排列重复测定3次，计算平均值作为最终的测定值，与设定值做线性对比。2.6 方法比对实验参照在CLSI EP9-A5文件中方法比对实验试验的要求，选取新鲜的尿液标本共40例，用两种试剂同时进行测定，将数据进行统计学分析，计算其相关系数和回归方程。3.实验数据统计学处理用Excel统计软件

15、进行数据统计。结果1.正确度两种试剂同时分别测定两个水平的MAlb专用质控，通过结果的分析，两种试剂相对偏差均满足临床要求（相对偏差10%）。2.精密度新成试剂和朗道试剂分别同时测定高、低值混合临床尿液标本，测定高值标本时，批内变异系数分别是：1.36%、1.88%；测定低值标本时，批内变异系数分别是：2.95%、3.69%。均满足临床要求。3.最低检测限在同一条件下，两种试剂同时重复测定零浓度标本20次，99.7%可能性时，新成生物公司MAlb测定试剂盒的检测低限为：1.03mg/L；朗道MAlb测定试剂盒的检测低限为：0.27mg/L。4.检测范围高值标本(biobn)和低值标本按比例稀释

16、后重复测定三次，取其平均值为最终的计算值，做线性回归分析(fnx)。新成试剂相关(xinggun)方程及相关系数分别为Y0.9827X+0.5455，R20.9987（浓度范围0-400mg/L）；朗道试剂相关方程及相关系数分别为Y1.0356X-0.9091，R20.9996（浓度范围0.0-202.8mg/L）。5.方法学比对实验用两种试剂同时测定新鲜临床尿液标本40例，做线性回归分析, 计算出相关方程和相关系数为Y0.7946X+1.4677，R20.9976。讨论尿微量白蛋白的分子量为69KD，是肾小球滤过膜所能通过的最小蛋白质分子之一，占滤过蛋白总量的40%。经肾小球滤过的蛋白质几乎

17、全部被近曲小管以主动方式回吸收，因此正常情况下尿中只有极微量白蛋白。但在病理状况下6，如各种炎症、代谢异常和免疫损伤，使肾小球血流动力学异常，肾小球滤过膜损害是造成尿微量白蛋白排出量增加的重要原因。由于长期高血糖使非酶糖酞化速率增加，导致缺氧，血液勃度增高，同时内皮细胞释放内皮素和一氧化氮等血管活性物质使肾小球毛细血管张力改变，进而引起肾血流动力学变化，使肾小球处于高滤过状态并导致肾损害。尿微量白蛋白的检测就能较早且较敏感的指示肾脏功能的早期损害，对阻止和延缓糖尿病肾病的发展具有十分重要的临床意义。同时，大量的临床研究与观察还表明7，尿微量白蛋白的发生与高血压、糖尿病、心血管疾病都有一定的联系

18、。目前国际上十分重视MAlb的检测，认为这项指标对早期治疗原发性疾病、分析病程进展、评价相关危险因素具有重要的意义。但是8，目前尿微量白蛋白检测还缺乏“金标准”，各家收集尿液的方法互不统一。有24 h尿、夜尿、随机尿等。测定结果的单位也不统一，有g/min、mg/d、mg/L等。今后在朝着统一方法、统一标准的目标努力过程中，还需要做很多的工作。实验数据表明，新成生物公司尿微量白蛋白测定试剂盒和朗道公司尿微量白蛋白测定试剂盒在测定正确度上均满足临床上相对偏差10%的要求，在测定高值质控（靶浓度为127mg/L）时，两者的相对偏差分别是：4.72%、-8.82%；测定低值质控（靶浓度为33mg/L

19、）时，两者相对偏差分别是：6.06%、-0.09%。在精密度指标上，测定高值样品时，两者的批内变异系数分别为：1.36%、1.88%；测定低值样品时，两者的批内变异系数分别是：2.95%、3.69%，均满足临床使用要求。新成试剂的检测低限为0.87mg/L，朗道试剂的检测低限为0.27mg/L。测定范围，新成试剂相关方程及相关系数分别为Y0.9827X+0.5455，R20.9987（浓度范围0-400mg/L）；朗道试剂相关方程及相关系数分别为Y1.0356X-0.9091，R20.9996（浓度范围0.0-202.8mg/L），两者在测定范围上均满足临床使用要求，新成试剂测定范围更广。方法学比对实验结果，相关方程和相关系数为Y1.2555X-1.6888，R20.9976，表明两者测定相关性良好，无明显差异。两种检测系统测定尿微量白蛋白能得到一致的结果，分析性能能满足临床分析的要求。参考文献1卜竞舟，聂满成尿微量白蛋白测定方法的探讨(tnto)J医学(yxu)创新研究，2008，5 (15)：1482潘静，魏明竞尿微量白蛋白的研究(ynji)近况J临床检验杂志，2003，21(5)：316-3173 NCCLS.Evaluation of Precision Performance of Clinical Chem