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实验十五:需氧革兰阳性杆菌1实验目的掌握炭疽芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌的形态、菌落特点和常用鉴定试验。掌握白喉棒状杆菌的培养特点及形态特征,熟悉常用染色方法(ALBERT染色法)。2实验内容炭疽杆菌:1、GS:+大杆菌,呈矩形,短链状或竹节状,陈旧培养物上可见芽孢.2、菌落形态:粗糙,灰白色,边缘不整齐,低倍镜下直接观察卷发状菌落,或看卷发状菌落示教片。3、串珠试验:将新鲜炭疽杆菌肉汤培养物用棉签均匀涂布于血平板上,干后贴5-6张青霉素药敏纸片,35C孵育2小时左右,用接种环在纸片周边盲目刮取培养物(注意不可刮到琼脂)进行涂片,注意涂片范围小些,尽量涂厚些,涂片固定后进行GS,可见炭疽杆菌因细胞壁受损,菌体膨大形成串珠样。34蜡样芽孢杆菌1、GS:+大杆菌,两端钝圆.6小时后可见小于菌体的圆形芽孢.2、菌落形态:直接观察在卵黄琼脂平板上的菌落,圆形突起,表面粗糙有蜡光,不透明。3、乳光反应:蜡样芽孢杆菌能产生卵磷脂酶,在有钙离子存在时,能迅速分解培养基中的卵磷脂,生成甘油酯和水溶性磷脂酰胆碱,在菌落周围出现乳白色混浊环,称乳光反应或卵黄反应。一般3小时即可观察结果。5白喉棒状杆菌1、观察白喉棒状杆菌在鸡蛋斜面上的菌落表现。2、GS3、Albert染色:最为常用的异染颗粒染色法。涂片干燥固定后,滴加甲液染10分钟,水洗,滴加乙液染5分钟,水洗,吸干水分后油镜下观察
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