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文档简介
1、培育基制备、保管、质量控制结核病国家参比室姜广路.内容培育基制备需求的仪器培育基制备需求的试剂培育基制备步骤和方法培育基制备本卷须知.培育基制备需求的仪器、耗材l 天平(灵敏度为0.01g)、称量匙或勺、称量纸l 高压灭菌器或电炉l 蒸汽凝固器l PH计l 简易分装安装l 培育管螺旋盖l 打蛋器l 广口瓶、锥形瓶l 镊子l 消毒纱布、漏斗过滤混匀的鸡蛋l 水浴. 酸性罗氏Lowenstein-Jensen培育基 天门冬素 3.6g 或谷氨酸钠纯度99%以上7.2gKH2PO4 14.0gMgSO4.7H2O 0.24g枸橼酸镁 0.6g丙三醇 12ml蒸馏水 600ml新颖鸡卵液 1000ml
2、2%孔雀绿 20ml培 养 基 组 份.培育基制备需求的试剂2% 孔雀绿溶液,单独配制 n孔雀绿染料2 g灭菌去离子水100 ml 运用无菌技术溶解染料于灭菌去离子水中放置于37C温箱中小时或者在水浴中加热。配制好的溶液储存于深色瓶中。此溶液长时间放置并不稳定,假设发生沉淀,应丢弃并重新配制。 .培育基制备需求的试剂l 鸡蛋应该新颖不超越天,母鸡喂养时饲料不应运用抗生素。选择中等大小的鸡蛋,蛋白、蛋黄平衡的,即平均每升鸡蛋大约个。. 培育基运用的本卷须知: 保管:4、密闭、直立。 1个月内运用。 运用前恢复至室温,并检查污染情况。 在斜面的反面标注痰标本号、病人姓名、接种日期。 每份痰标本接种
3、2支培育基。 .培育基制备步骤和方法清洁、消毒桌面。用肥皂水清洁鸡蛋,并用70%乙醇擦洗,晾干。鸡蛋打入灭菌的容器内,控制新颖度。将整个鸡蛋转入容器内进展匀化经过无菌的棉纱布过滤。参与盐溶液。参与孔雀绿。缓慢混合一切的成分,防止气泡、混匀。在培育管中分装6-8 ml液体。.培育基制备步骤和方法将试管放在架子上,并坚持足够的倾斜度,放在蒸汽凝固器中85C 50分钟。将管子从蒸汽凝固器,并作标志。管子到达室温时旋紧螺旋盖否那么冷凝将会产生更多的水。将培育管直立放置于冰箱中,最好放在塑料袋或者容器内。记录批号的信息看下边信息。 .培育基制备本卷须知培育基制备最好在公用“培育基制备间内进展,制备培育基
4、时应有相应制造过程的记录。 培育基制备前“培育基制备间的空气、台面等应进展消毒。 制备培育基的一切物品器具应高压灭菌。.培育基制备本卷须知无菌实验后,虽然没有发现有可见菌落出现,但培育基曾经变蓝色或变黄色,与蓝绿色或黄绿色有明显区别时,应视为污染弃去。每批培育基应作无菌实验。 .质量控制内容颜色质地 湿度 匀质性无菌性敏感性.颜色同一批制造的培育基假设呈现不同的颜色能够是由于混匀得不好或者培育管中出现金属沉渣。假设颜色为非常深的绿色能够是由于孔雀绿过多或者PH值太低呈酸性。黄色的培育基阐明孔雀绿质量不好或者PH值太高呈碱性。凝固的培育基颜色变浅还能够是由于过高的温度所致。 .质地假设培育基液化
5、或者很容易碎裂,能够是凝固温度太低了。可以随机抽取一批培育基中的1-2支培育管向手上敲打检测。质地较差的培育基不适宜于培育接种。 .湿度培育管的底部应该有一些凝固水。然而,过多的水阐明在凝固后过早的将螺旋盖旋紧或者培育基的成分不规范。当培育管挪动时培育基应该不可以转动。 .匀质性假设凝固过程中培育基中有小泡,能够是由于培育基凝固温度过高,质量遭到了影响。培育基中出现了块状阐明匀质性较差。 .无菌性每批新制造的培育基要进展无菌实验。36C孵育2天后应该没有细菌生长。 .培育基保管为了防止剩余过多过期的培育基,培育基应该储存在非常干净的、有一定湿度的地方,最好是在4C冰箱内,保管期限不超越2个月。标志应该显示:l 培育基的称号l 制造者的称号实验室标示l
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