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文档简介

实验六 RPMI-1640的配制1不完全RPMI-1640培养液配方RPMI-1640干粉 1袋(1,000mL量)L-谷氨酰胺 0.29gNaHCO3溶液 2.2gHEPEs 2.39g去离子水 1,000mL 溶解,过滤除菌,分装,-20保存。2合成培养基的配制1、将RPMI-1640粉袋竖立轻弹,使袋中干粉下沉,剪开袋口,将干粉倒入3,000mL三角瓶中;2、加入1,000mL去离子水,快速旋转摇动三角瓶,或用磁力搅拌器搅拌一定时间使干粉培养基充分溶解;3、称取3.7g NaHCO3、2.39g HEPEs加入三角瓶,快速旋转摇动充分溶解;4、在超净台中安装好灭菌过滤器,对溶液进行滤过除菌,分装入250mL或500mL瓶中,瓶口用胶塞塞紧;3合成培养基的配制5、用塑料膜将瓶口封好,加皮筋扎紧,4冰箱或-20贮存备用,此为不完全RPMI-1640液。6、完全RPMI-1640培养液的配制:不完全RPMI-1640培养液占8090,小牛血清占1020。按1体积分别加入双抗贮存液(青霉素+链霉素),使青霉素和链霉素的终浓度分别为100UmL。4

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