维生素类药物的分析最新

1、 第六章 维生素类药物的分析第一节 概 述第二节 维生素A的分析 第三节 维生素C的分析 第四节 维生素E的分析维生素类药物的分析最新维生素是维持人体正常生理机能所必需的生物活性物质；主要用于机体的能量转移和代谢调节；大多数维生素人体不能合成。化学结构： 醇、酯、酸、胺、醛、酚如果人体缺少某种维生素，就会引起维生素缺乏症，而影响人体的正常生理机能。 例如: VA 缺乏夜盲症 VB1缺乏脚气病第一节 概 述 这类药物的分析方法很多，有生物法、微生物法、化学法和物理化学法，但目前常用的分析方法是化学法或物理化学法。维生素类药物的分析最新公元前3500年:古埃及人发现能防治夜盲症的物质，也就是后来

2、的维A;1600年:医生鼓励以多吃动物肝脏来治夜盲症;1747年:苏格兰医生林德发现柠檬能治坏血病，也就是后来的维C。1831年:胡萝卜素被发现;1905年:甲状腺肿大被碘治愈;1912年:波兰化学家冯克为维生素命名（Vitamin);1915年:科学家认为糙皮病是由于缺乏某种维生素而造成的;1916年:维生素B被分离出来;1917年:英国医生发现鱼肝油可治愈佝偻病，随后断定这种病是 缺乏维D引起的。 维生素发展史维生素类药物的分析最新1920年-发现人体可将胡萝卜转化为维生素A;1922年-维E被发现;1928年-科学家发现维B至少有两种类型;1933年-维E首次用于治疗;1948年-大剂量

3、维C用于治疗炎症;1949年-维B3与维C用于治疗精神分裂症;1954年-自由基与人体老化的关系被揭开;1957年-Q10多酶被发现;1969年-体内超级抗氧化酶被发现;1970年-维C被用于治疗感冒;1993年-哈佛大学发表维生素E与心脏病关系的研究结果。 现被列为维生素的有60余种，对维持人体健康和促进发育至关 重要的有20余种,其中的14种及其制剂可作为药物使用！维生素类药物的分析最新 VitA、D2、D3、 E、K1 等 脂溶性:水溶性: VitB族(B1、B2、B6、B12) VitC、叶酸、烟酸、泛酸等。分类按溶解度分:维生素类药物的分析最新第二节 维生素A的分析一结构与性质 1.

4、化学结构R=H VA醇 VA1R= COCH3 VA醋酸酯R= COC15H31 VA棕榈酸酯结构特点： （1）环己烯+共轭多烯侧链； （2）天然VA侧链为全反式； （3）天然来源主要是鱼肝油，为醋酸酯，棕榈酸酯等,目前多由人工合成。维生素类药物的分析最新 维生素A具有多种生理功能，对视力、生长、上皮组织及骨骼的 发育、生育都是必需的。 效用 ： 防止夜盲症和视力减退，有助于对多种眼疾的治疗（维生素A可促进眼内 感光色素的形成）； 有抗呼吸系统感染作用； 有助于免疫系统功能正常； 生病时能早日康复； 能保持组织或器官表层 的健康； 有助于祛除老年斑； 促进发育，强壮骨骼，维护皮肤、头发、牙齿、

5、牙床的健康； 外用有助于对粉刺、脓包、疖疮，皮肤表面溃疡等症的治疗； 有助于对肺气肿、甲状腺机能亢进症的治疗。 维生素类药物的分析最新 2 .性质 a.紫外吸收 具有共轭多烯侧链紫外吸收； 最大吸收波长在325-328nm，随VA存在状态以及所用的溶剂，最大吸收波长的位置有所不同。 b.溶解性： 不溶于水 溶于乙醚，氯仿，异丙醇，环己烷，脂肪和油。c.不稳定性（易发生脱氢、脱水、聚合反应）共轭多烯侧链性质非常活泼.鲸 醇 维生素类药物的分析最新维生素A的氧化产物：.环氧化物.维生素A醛.维生素A酸or维生素类药物的分析最新O2H+重排OOVA酸VA醛呋喃型氧化物（无生物活性）维生素类药物的分析

6、最新+H+-H+去水VA（VA3）烯丙型醇遇酸易发生脱水反应维生素类药物的分析最新d.与SbCl3作用卡尔-普赖斯（Carr-Price）反应 应用： 鉴别 含量测定 CHCl3条件:无水无醇水可使SbCl3水解成SbOCl乙醇可与正碳离子作用，使正电荷消失维生素类药物的分析最新二.鉴别试验 1.三氯化锑反应 蓝色 紫红 VA与三氯化锑(SbCl3)中存在的亲电试剂氯化高锑（SbCl5）作用形成不稳定的蓝色正碳离子。维生素类药物的分析最新 2.紫外吸收光谱 VA的无水乙醇溶液在326nm有最大吸收。max为326nm 一个吸收峰max为350390nm 三个吸收峰（VitA3）维生素类药物的分

7、析最新3.TLC 确认醇或酯，是醋酸酯或其他酸酯. 例：VA和其标准品用环己烷溶解 展开剂：环己烷乙醚（80：20） 板：硅胶G 显色：SbCl3T.S.（蓝色斑点） Rf： VA 醇 0.08 VA 醋酸酯 0.41 VA 棕榈酸酯 0.75维生素类药物的分析最新 三.含量测定1.概述 共轭多烯的结构具有特征的紫外吸收。 相关物质结构相似,维生素A最大吸收,波长附近 也有吸收，对测定有影响。 Morton和Stubbs等人提出了三点校正法。紫外分光光度法三点校正法2.原理（根据、假定）. 物质对光的吸收具有加和性，即维生素A中的不相关吸收在310340nm范围内近似一条直线。维生素类药物的分

8、析最新效价为维生素A1的40%，max345350nm3.相关物质的吸收a.维生素A的衍生物.维生素A2（去氢维生素A）维生素A3（去水维生素A）效价低于维生素A1，max385390nmb.维生素A的氧化产物(已介绍)c.合成时的中间体d.鲸醇 维生素A醇的二聚体，没有生物活性.维生素类药物的分析最新 侧连有4个双键应有 种异构体。目前，包括维生素A在内，共发现有6种异构体。它们是：e.维生素A异构体新维生素Aa新维生素Ab新维生素Ac异维生素Aa异维生素Ab维生素A维生素类药物的分析最新名 称顺反异构 max(nm)相对效价新维生素Aa2-顺式32875%新维生素Ab4-顺31924%新维

9、生素Ac2,4-二顺31115%异维生素Aa6-顺32321%异维生素Ab2,6-二顺32424%维生素A全反式325328100%维生素类药物的分析最新 4.三个波长的选择方法 1：维生素A的max; 2、3：分别在1两侧 .等波长差法：这两个波长分别在1两侧12nm处，即1=328nm; 2 =314nm; 3=340nm.等吸光度法：VA在这两个波长下的吸光度应该等于1下的吸光度的6/7 ，即: 1=325nm; 2 =310nm; 3=334nm维生素类药物的分析最新5.方法Ch.P收载有2种方法。第一法（适用于酯式维生素A的测定）a.操作方法b.计算方法 .最大吸收波长确认 max在

10、326-329nm，第一法测定; max不在326-329nm，第二法测定。计算吸收度比（如300，316，328，340，360nm处)及比值差首先要计算吸收度比值 ;然后计算吸收度的比值差 max在326-329nm间； 差值不超过正负0.02时；则直接带入式子计算！维生素类药物的分析最新最大吸收波长是否在326-329之间是否计算吸收度比值之差是否超过0.02第二法（皂化）是否计算A328（校正）A328维生素类药物的分析最新 计算校正吸收度（最大吸收峰在326-329nm间，差值有些超过正负0.02时）吸收度校正公式：.换算因数 定义：每一个 数值所相当的效价（维生素A含量）。(1IU

11、=0.344g全反式维生素A醋酸酯)维生素A醋酸酯换算因数：标示量为作品标签上注明的每胶丸含有的VA醋酸酯的国际单位数。判断选用吸光度：维生素类药物的分析最新 例：维生素AD胶丸中维生素A的含量测定。已知：平均胶丸重为0.0815g；维生素A的标示量为10000IU/丸；取样： ；测定数据如下表：波长吸收度比值规定值比值差3000.3740.5740.5550.0193160.5840.8960.907-0.013280.6521103400.5340.8190.8110.0083600.2110.3390.2990.04求：维生素A的标示百分含量。维生素类药物的分析最新首先要求样品的 ： 根

12、据比尔定律：A为测得吸收度or校正吸收度。所以： 这样所以，维生素A的标示含量维生素类药物的分析最新第二法（皂化法）： 消除植物油干扰：适合VA醇。维生素类药物的分析最新 练习：已知某药物结构式为：1.简述该药物结构和性质之间的关系。2.根据其结构特点，设计合理的鉴别方法。3.试设计一条从简单化合物合成该药物的路线，并分析可能 引入的杂质及其定量分析方法。维生素类药物的分析最新第三节 维生素C的分析一.化学结构结构特点： 维生素C分子中具有2个手性C原子，具有4种光学异构体。其中生理活性最强的是L（+）-抗坏血酸.L(+)-抗坏血酸D(-)-抗坏血酸D(-)-异抗坏血酸L(+)-异抗坏血酸 具

13、有内酯结构。 碱性下可水解。具有烯二醇基。还原性，能够被氧化成去氢抗 坏血酸。酸性,能与碱成盐。维生素类药物的分析最新二.性质与鉴别试验 1.酸性 烯二醇结构酸性。 C3-OH， pKa=4.17(共轭效应) C2-OH，pKa=11.57(邻位羰基) 一元酸:能与NaHCO3作用生成钠盐。 2.还原性 烯二醇基还原性。如：（无色）维生素类药物的分析最新3.水解反应 L-二酮古罗糖酸 ( 无生物活性)4.荧光反应5.糖的性质 VC的结构很象糖结构，具有糖的性质。50维生素类药物的分析最新这个反应的摩尔比是12。三.含量测定 1.碘量法 a.原理b.操作 终点颜色：无色蓝色 1ml 0.1mol

14、/L碘液1ml8.806mg C6H8O6.维生素类药物的分析最新c.讨论 .反应条件 酸性:使VC在空气中氧化速度减慢。 .溶剂 新沸放冷的水。减少水中溶解氧的影响。 还原性物质的影响及排除 VC注射液中常加有亚硫酸盐如NaHSO3作为抗氧剂. 排除：加入丙酮或甲醛。+维生素类药物的分析最新 2.2,6-二氯吲哚酚滴定法 原理： 在酸性下,氧化型是红色的;还原型是无色的;酸性下直接用2,6-二氯吲哚酚滴定，用滴定剂自身的颜色变化指示终点，不需要另外的指示剂。氧化型（红色）还原型(无色)+所以，终点的颜色是溶液由无色变为红色。维生素类药物的分析最新3.快速酶电极法原理： VC溶液与酶作用时用氧

15、电极测定氧的消耗量，就可求出溶液中VC的含量。特点： 准确度高、所需时间短、操作简便、试剂消耗低，并具有良好的线性关系，是工业测试的一种新手段。维生素类药物的分析最新4. 快速比色法原理： 维生素C与Fe(III)一邻菲罗啉复合物反应生成Fe()一邻菲罗啉复合物，后者在510nm波长处有最大吸收。用比色法直接测定维生索C注射液的含量。特点： 与碘量法比较，本法操作简便、快速、灵敏，可作为医院、药厂对维生素C注射液及其中间品质量监测的参考。维生素类药物的分析最新第四节 维生素E的分析一化学结构与性质名称：消旋-生育酚醋酸酯母核：苯骈二氢吡喃衍生物 苯环上有一乙酰化的酚羟基侧链：脂肪烷烃维生素类药

16、物的分析最新 1、硝酸反应： 本品，无水乙醇溶解，加硝酸，75加热约15分钟，显橙红色。 2、水解后氧化反应： 本品，在碱性条件下水解，得-生育酚，在联吡啶和三氯化铁试液的作用下，反应产生血红色配离子。3、UV吸收： VE的0.01%无水乙醇液：max=284nm,min=254nm.二. 鉴别试验 维生素类药物的分析最新 三、杂质检查 检查游离生育酚: Ch.P 取0.1g样品，按铈量法用Ce(SO4)2 (0.01mol /L)滴定，以二苯胺为指示剂，消耗Ce(SO4)2液不得超过1.0ml。维生素类药物的分析最新 （一）铈量法 1、原理： VE用硫酸加热回流，水解成生育酚，用硫酸铈定量地

17、 氧化为对一生育醌，过量的硫酸铈氧化二苯胺指示剂而指示滴定终点。 终点：亮黄灰紫;空白试验. 2、反应条件 （1）VE在H2SO4酸性条件下水解为宜。 碱性溶液中游离生育酚易被氧化。Ce(SO4)2液滴定在酸性溶液中进行,如在碱性中会生成碱式盐而影响测定。（2）Ce(SO4)2溶于酸水溶液，不溶于醇,-生育酚溶于酸而不溶于水, 滴定过程中应有一定浓度的乙醇。（3）本法适用于纯度高的VE供试品。四. 含量测定 维生素类药物的分析最新（二）气相色谱法 1、色谱条件及系统适应性试验 色谱柱：2m4mmI.D.硼硅玻璃柱， 内装硅藻土（80-100目） 固定相：硅酮（OV-17） 涂布浓度 2% 载气：N2， 流速:含2%固定相：以18-20分钟为宜；含5%固定相：以30- 32分钟为宜柱温：265内标：正三十二烷检测器：FID（氢火焰离子化检测器）性能要求：理论塔板数按VE峰计算应不低于500，VE峰与内标物质峰的分离度应大于2。维生素类药物的分析最新2、溶液配制： 内标溶液：正三十