自身抗体检测及临床应用价值（59页）

1、自身抗体检测及临床应用价值2021/4/261风湿性疾病风湿病：是一种全身性疾病，主要累及结缔组织，大多数病人有关节、肌肉的病变，与机体的免疫学异常有关类风湿关节炎骨关节炎晶体性关节病关节外风湿病脊柱骨关节病风湿病代谢性骨病结缔组织病血管炎感染性关节炎2021/4/262自身免疫性疾病（AID）临床经验积累和实验诊断技术进步,发病率疑难病？累及各系统、组织和器官临床渉及多专业学科临床表现复杂诊断水平的局限误诊误治发生率高2021/4/263自身免疫病、风湿病和风湿免疫病自身免疫病风湿免疫病风湿病2021/4/264三千万风湿病患者，需要更多的风湿科专科医师2021/4/265自身免疫性疾病(A

2、ID)诊断特征性临床表现相关实验室检查疾病分类标准诊断标准专家共识2021/4/266自身免疫性疾病(AID)诊断相关实验室检查体外诊断实验 -实验室检查临床检验常规检查临床免疫学常规检查特殊实验室检查影像学检查组织病理学检查2021/4/267AID临床实验室检查常规项目一般临床检验常规检查血常规尿常规脑脊液胸水腹水急性期反应物:ESRCRP生化 常规检查肝功肾功甲功蛋白电泳肌酶谱血尿酸免疫学常规检查免疫分子，蛋白：Ig补体CICASO冷球蛋白细胞免疫功能：免疫功能低下自身抗体微生物常规检查鉴别诊断合并感染 ：细菌 病毒 真菌2021/4/268AID临床实验室检查特殊项目口干燥征实验室检查

3、 唾液流率试验唇腺活检 腮腺照影 唾液腺放射性核素扫描干燥性角膜炎实验室检查 泪液分泌试验泪膜破碎时间检查 角膜染色检查 结膜活检滑液检查狼疮带试验遗传标志物检查HLA-B27HLA-B5 HLA-DR2、3、42021/4/269自身抗体（autoantibidies）自身抗体 :是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原成分的免疫球蛋白是自身免疫应答和AID最重要特征之一某些 AID 伴有特征性的自身抗体(谱)自身抗体检测对AID诊断和鉴别诊断至关重要自身抗体检测已成为诊断AID的重要手段2021/4/26109、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。2022/7/112022/7/11Mon

4、day, July 11, 202210、低头要有勇气，抬头要有低气。2022/7/112022/7/112022/7/117/11/2022 10:56:06 PM11、人总是珍惜为得到。2022/7/112022/7/112022/7/11Jul-2211-Jul-2212、人乱于心，不宽余请。2022/7/112022/7/112022/7/11Monday, July 11, 202213、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。2022/7/112022/7/112022/7/112022/7/117/11/202214、抱最大的希望，作最大的努力。11 七月 20222022/7/1120

5、22/7/112022/7/1115、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。七月 222022/7/112022/7/112022/7/117/11/202216、业余生活要有意义，不要越轨。2022/7/112022/7/1111 July 202217、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。2022/7/112022/7/112022/7/112022/7/11自身抗体临床检测及应用国外临床常规自身抗体检测项目已达百种以上主要包括：抗核抗体谱、抗中性粒细胞胞浆抗体谱、抗磷脂抗体谱、类风湿因子、类风湿关节炎早期诊断自身抗体谱自身免疫性肝病自身抗体谱、自身免疫性甲状腺疾病自身抗体谱、1型自身免疫

6、性糖尿病自身抗体谱、不孕/不育自身抗体谱、炎症性肠病自身抗体谱、自身免疫性胃炎/恶性贫血自身抗体谱、麦胶（麸质）敏感性肠病自身抗体谱、副肿瘤综合征自身抗体谱和重症肌无力自身抗体谱等国内:临床常规项目少，普及性低2021/4/2612自身抗体临床应用价值AID诊断与鉴别诊断:特征性自身抗体谱，标志性抗体或特异性抗体AID病情评估与治疗监测:判断疾病的活动性，观察治疗反应，指导临床治疗anti-dsDNA anti-PR3 anti-MPOAID病程转归与预后判断SSc: ACA anti-Scl-70AID预警:3P医学-预测、预防和个体化医疗PREDICTION、PREVENTION、PERS

7、ONAILIZATION2021/4/2613根据自身抗体临床意义分类疾病标记（志）性自身抗体 ：非常少见SLE : anti - Sm 、anti-rRNP、anti-PCNA疾病特异性自身抗体SLE ： anti -dsDNA疾病相关性自身抗体pSS ：anti-SSA、anti-SSB疾病非特异性自身抗体生理性自身抗体：低滴度、非特异性2021/4/2614风湿免疫病常见自身抗体谱抗核抗体谱抗磷脂抗体谱抗中性粒细胞胞浆抗体谱类风湿关节炎自身抗体谱自身免疫性肝病自身抗体谱2021/4/2615抗核抗体谱（ANAs）分类根据细胞内靶抗原分子理化特性和分布部位将ANAs分类：抗DNA抗体（an

8、ti-dsDNA，anti-ssDNA ）抗组蛋白抗体（histons: H1 , H2A , H2B , H3 , H4 , H2A-H2B复合物）抗ENA抗体（抗体: Sm , nRNP , SSA/Ro , SSB/La,rRNP , Scl-70 , Jo-1 , PCNA , RA33 ,ANAs抗非组蛋白抗体Ku,RANA,Mi-1,Mi-2,PL-7,PL-12.）抗着丝点抗体（ anti-CENP -A , B , C ，D，F，G）抗核仁抗体（抗体: RNA-polymerase-1 , PM-Scl/PM-1，Th/To,U3nRNP/Fibrillaria，4-6-S-R

9、NA）抗其他细胞成分抗体（高尔基体，中心体，纺锤体，线粒体，溶酶体，肌动蛋白，Vimentin，细胞角蛋白，Lamin)2021/4/2616抗核抗体谱ANA 筛选试验抗 dsDNA 抗体抗 ENA 抗体抗 Sm 抗体： SLE标记性抗体（20%-30%）抗 nRNP 抗体：MCTD 95 -100%（高滴度）抗SSA抗体：PSS 60 -75%，其它CTD抗SSB抗体： PSS 10 -40%，其它CTD抗Scl-70抗体：SSc 25 -75%, 标记性抗体抗Jo-1抗体：PM/DM 25%，标记性抗体抗rRNP抗体： SLE特异性抗体（10%-30%）抗DNP 抗核小体 抗组蛋白抗体20

10、21/4/2617抗磷脂抗体谱抗磷脂综合征（APS）1/3 SLE（凝血危险）RA 炎性疾病狼疮抗凝物（LA）抗心磷脂抗体（aCL）抗2糖蛋白-1（2GP-1）抗体抗磷脂酰丝氨酸抗体抗磷脂酸抗体2021/4/2618抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）谱pANCA ,cANCA ,xANCA抗蛋白酶3（PR3），抗髓过氧化物酶（MPO）其他：抗杀菌/通透性增高蛋白（BPI）抗人白细胞弹性蛋白酶（HLE）抗组织蛋白酶G（CG）抗溶菌酶（LYS）抗乳铁蛋白（LF）系统性血管炎 炎症性肠病 自身免疫性肝病结缔组织病 药物性疾病 感染性疾病2021/4/2619类风湿关节炎相关自身抗体谱类风湿因子（RF）

11、抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）抗角质蛋白抗体（AKA）抗核周因子（APF）profilaggrin/filaggrin抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（AFA）抗MCV（Sa）抗RA33抗体葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）抗原2021/4/2620自身免疫性肝病相关自身抗体谱疾病类型相关自身抗体自身免疫性肝炎（ AIH ）型AIHANA/ASMA，anti-SLA型AIHanti-LKM-1 anti-LC-1原发性胆汁性肝硬化（ PBC）AMA (M2/M4/M8/M9 )ACA anti-gp210 sp100原发性硬化性胆管炎（PSC）pANCA2021/4/2621器官特异性自身免疫病自身抗体

12、谱2021/4/2622自身抗体常用检测方法2021/4/26232021/4/2624自身抗体检测标准化高通量自动化AutomationEUROLINEScan2021/4/2625自身抗体检测与临床应用进展检测项目：靶抗原特异化总抗体 特异性抗体纯化、合成肽、重组抗原检测方法：标准化、多元化、自动化检测质量：准确、稳定，质量保证应用临床 ：迅速，临床应用周期变短2021/4/2626总抗体检测特异性抗体检测提高临床应用价值ANCAsanti-PR3anti-MPOASMAsanti- FactinAMAAMA-M2anti- Sp100anti- gp210anti- p62anti-LB

13、R2021/4/2627Sm自身抗体临床应用概况过去自建检测方法：问题：稳定性 可比性 敏感性RNP+现在检测方法：标准化 规范化 多元化问题：总抗体特异性抗体 检测程序 报告解释将来检测方法：自动化 高通量快速问题：检测程序 报告解释 性价2021/4/2628自身抗体临床应用存在问题临床需求：准确快速经济解决问题临床推广普及检测质量检测项目合理选择检测结果正确解读2021/4/2629自身抗体检测质量方法学局限性：假阳性假阴性检测质量差异：可比性差2021/4/2630各种自身抗体检测方法的优缺点方法学局限性Diagn Pathol, 2009. 42021/4/2631抗CCP抗体定量结

14、果试剂12345678标本921923921923921923921923921923921923921923921923n22151523232233116688mean53.781.665.3141.522.652.375.4190.771.6178.8SD103.6103.132.741.412.122.430.755.934.3102.2CV(%)193.0126.350.129.253.442.940.729.348.057.2MIN64116.71015.315.871.410.525.8122735.5125.925.930.7MAX138324.7419418.5193.324

15、5.963.975.435.769.8103266138327322011年7月4日2021/4/2632 90%自身抗体比对最低准确率anti - CCP 97.1 , AMA96.7, anti-M296.0, RF94.7,anti - SSB 93.1 , anti-SSA91.5 90%ANA 89.4 , anti-Jo-187.1, anti-MPO86.9,anti - rRNP 82.6, ANCA82.4, anti-PR382.4 80%anti - Scl - 70 80.0, anti-Sm74.1, anti-nRNP72.070%ASMA65.160%anti-2

16、-GP160.0, aCL59.5, APF57.7antidsDNA52.9, AKA51.9参加277家，其中210家回报,总体回报率75.81%2021/4/2633自身抗体检测质量管理策略2021/4/2634自身抗体检测项目合理选择自身抗体临床应用：自身抗体(谱) ，分型大撒网式筛查不是好医生临床需求，基本项目检测项目、检测程序合理选择疾病诊疗临床路径2021/4/2635系统性红斑狼疮（SLE）Antinuclear antibody(ANA)Anti-dsDNA antibodyAnti-Sm antibodyAnti-cardiolipin antibodyLupus anti

17、coagulant（LA)Anti-Nucleosomes antibodiesAnti-ribosomal RNP antibodiesAnti-2GPantibodySLE中存在的自身抗体达百种以上Yaniv S et al1.Semin ArthritiRheum,2004,34:501-537 .2021/4/2636检测项目的选择SLE初筛（普通）SLE初筛（全套）血常规血沉尿常规、沉渣、24小时尿蛋白血常规血沉尿常规、沉渣、24小时尿蛋白肝肾功能肝肾功能补体、免疫球蛋白ANA 、抗dsDNA 、抗ENA 、 ACL补体、免疫球蛋白ANA谱 、ACL 、抗B2GPI、狼疮抗凝物SLE

18、随访血常规血沉尿常规、沉渣、24小时尿蛋白肝肾功能补体、免疫球蛋白ANA 、抗dsDNACoombs试验2021/4/2637干燥综合征（SS）血常规血沉尿常规、沉渣肝肾功能补体、免疫球蛋白抗ENA 、自身免疫性肝病抗体、抗dsDNAANAAnti-SS-A antibodyAnti-SS-B antibodyAnti-Fodrin antibodyAnti-M3R antibody2021/4/2638自身抗体检测结果的解释疾病标记（志）性自身抗体疾病特异性自身抗体疾病相关性自身抗体疾病非特异性自身抗体生理性自身抗体疾病前期存在检测方法及检测程序局限性检测质量:假阴性假阳性解读困难2021/

19、4/2639自身抗体检测结果正确解读检测方法局限性：假阳性，假阴性临床意义局限性：非特异性，生理性，疾病前期临床表现阳性，实验室检查阴性实验室检查阳性，临床表现阴性2021/4/2640自身免疫病自身抗体非常复杂SLE患者中存在100多种自身抗体Semin Arthritis Rheum. 2004 Oct;34(2):501-37.2021/4/2641自身免疫病自身抗体非常复杂APS患者中存在30种自身抗体J Autoimmun, 2008. 30(1-2): p. 74-83.2021/4/2642N Engl J Med 2003;349:1526-33.疾病预警自身抗体在SLE发病前

20、9.4年出现2021/4/2643疾病预警AMA在PBC发病前10年出现2021/4/2644临床复杂性急性肝衰患者出现2和PBC特异性抗体2021/4/2645临床复杂性抗CCP抗体在丙肝中8.52021/4/2646自身抗体检测程序问题自身抗体的检测一般分为筛选实验和确认实验筛选实验：某种属性自身抗体总抗体的筛选确认实验：某种特定抗体标志物的检测2021/4/2647自身抗体检测初筛与确认实验没有任何一种确认实验能同时检测所有特异性抗体确认实验直接代替筛查实验存在问题2021/4/2648ANAs代替ANA筛查存在问题2026份临床连续送检血清标本IIF-ANA和LIA-ANAs的相互关系

21、2021/4/2649IIF-ANA筛查会漏检哪些ANAs2021/4/2650筛查实验与确认实验存在差异?筛查实验抗原含量丰富、抗原存在分布不均、含量过低不同处理方法对特定抗原的破坏可能导致部分特异性抗体的漏检确认实验特异性抗体数量极其有限自身免疫性疾病患者体内存在的自身抗体多确认实验不能代替针对总抗体筛查实验检测方法敏感性、特异性差异2021/4/2651ANA和特异性抗体检测指南Diagn Pathol, 2009. 42021/4/2652检测程序的标准化NCCLS I/LA2-AHyoun-Ah Kim, et al. Korean JIntern Med 2009;24:76-79

22、周仁芳 等。中华检验医学杂志2009，32：？2021/4/2653自身抗体检测结果正确解读途径实验室内：总抗体与特异性抗体实验室间：可比性临床与实验室：沟通联系2021/4/2654自身抗体临床开展基本思路早期快速筛查分级检测（定性到定量）基本筛选实验（总筛查到特异性抗体）简单到复杂低水平到高水平临床需求2021/4/2655自身抗体基本检测项目风湿免疫病 ANAs（IIF-ANA、anti-DNA、anti-ENA） ANCAs（ IIF-ANCA、anti-PR3、anti-MPO） anti-Acl 、 anti-2GP-1 RF、anti-CCP器官特异性自身免疫病 肝：ANA/ASMA/AMA(M2) 血液：anti-PLT、 Coombs T 甲状腺：anti-TG/anti-TPO 胰：ICA/anti-GAD2021/4/2656抗CCP抗体医院开展方案推荐【 起步阶段 】 采用抗CCP快速筛查法，四滴血清，五分钟检测抗CCP。简便快捷，与RF，CRP，ESR联合检测，同步报告。【 成熟阶段 】 抗CCP抗体ELISA法，定量监测，跟踪病情【 专院专科 】 抗CCP抗体ELISA法自动化操作，全自动酶联免疫工作站2021