病原生物学-教程-ppt课件第十四章--其他细菌

1、第十四章 其他细菌病原生物学学习目标掌握：幽门螺杆菌主要生物学特性和致病性。熟悉：空肠弯曲菌、铜绿假单胞菌的主要生物学特性和致病性。了解：流感杆菌、百日咳杆菌和肠球菌所致疾病。 第一节 流感嗜血杆菌嗜血杆菌属（Haemophilus）是一类革兰阴性小杆菌，常呈球杆状或多形态性，无鞭毛、无芽胞。许多菌株有荚膜。因人工培养时必须提供新鲜血液或血液成分，故名嗜血杆菌。本属菌共有21个种，多数为正常菌群成员，对人致病的主要是流感嗜血杆菌。 第一节 流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌（H. influenzae）简称流感杆菌，1892年被首先从流感患者鼻咽部分离出，当时被误认为是流感的病原菌，直至1933年流感病

2、毒分离成功，才明确流感嗜血杆菌只是在流感流行时，引起呼吸道继发感染的病原菌。流感嗜血杆菌是小儿急性脑膜炎的主要病原菌，也可引起鼻咽炎、中耳炎等化脓性炎症。 第一节 流感嗜血杆菌一、生物学性状（一）形态染色 革兰阴性短小球杆菌，大小为0.30.4m1.01.5m，在急性感染标本中多为短小杆菌，在恢复期病灶或长期人工传代培养后可呈球杆状、长杆状、丝状等多形态。多数菌株有菌毛，但无鞭毛、无芽胞。有毒株初培养时有明显荚膜，陈旧培养物中荚膜常消失。 第一节 流感嗜血杆菌 （二）培养 需氧或兼性厌氧，最适生长温度3537，生长要求特殊，需要X和V因子。因血液中的V因子需经加热才能从红细胞中释放，故流感嗜血

3、杆菌在巧克力色血平板上生长良好，培养1824小时出现无色露滴状小菌落，48h后形成灰白色、光滑、边缘整齐的较大菌落。有荚膜时菌落可轻度粘稠。 第一节 流感嗜血杆菌 （二）培养 若将流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在同一血琼脂平板上共同培养，由于金黄色葡萄球菌能合成V因子，可促进流感嗜血杆菌的生长，故在金黄色葡萄球菌菌落周围的流感嗜血杆菌菌落较大，反之越小，此种现象被称为卫星现象(satellite phenomenon)，周围的嗜血杆菌菌落称为卫星菌落(satellite colony)，有助于流感嗜血杆菌的鉴别。 第一节 流感嗜血杆菌（三）抗原构造与分型 流感嗜血杆菌有两种主要抗原。 1.荚膜多

4、糖抗原 具有型特异性。根据荚膜多糖抗原的不同，可将有荚膜的流感嗜血杆菌分为a、b、c、d、e和f 6个型，其中b型致病力最强。该抗原与肺炎链球菌的荚膜多糖有部分共同抗原，可有交叉的血清学反应。 第一节 流感嗜血杆菌（三）抗原构造与分型 流感嗜血杆菌有两种主要抗原。2.菌体抗原 包括脂多糖抗原和外膜蛋白抗原。其中多种外膜蛋白抗原可用于流感嗜血杆菌亚型的区分和进行流行病学调查。 第一节 流感嗜血杆菌二、致病性与免疫力（一）致病物质 主要有荚膜、菌毛、IgA蛋白酶和内毒素等。荚膜是本菌的主要毒力因子，具有抗吞噬作用；菌毛具有黏附和定植于细胞的作用；IgA蛋白酶能水解sIgA，可降低黏膜局部免疫力；内

5、毒素在本菌的致病作用尚不清楚。 第一节 流感嗜血杆菌二、致病性与免疫力（二）所致疾病 有荚膜的b型菌株可引起原发性急性化脓性感染，以小儿多见，常见的有脑膜炎、鼻咽炎、咽喉会厌炎、化脓性关节炎、心包炎等。无荚膜菌株常在流感、麻疹、百日咳、肺结核等感染后引起继发性感染，临床类型有慢性支气管炎、中耳炎、鼻窦炎等，多见于成人。 第一节 流感嗜血杆菌二、致病性与免疫力（三）免疫性 感染后，患者能产生特异性抗体。抗荚膜多糖抗体能增强吞噬细胞的吞噬作用和激活补体的溶菌作用。抗外膜蛋白抗原的抗体也有促进补体介导的调理作用。 第一节 流感嗜血杆菌三、微生物学检查（一）直接检测 根据感染部位，可取痰液、脑脊液、鼻

6、咽分泌物、血液及脓液等标本。直接涂片镜检，对脑膜炎、关节炎、下呼吸道感染有快速诊断价值。 （二）分离培养 将标本接种于巧克力色平板或血平板，根据菌落特征、卫星现象、生化反应等进行鉴定。 第一节 流感嗜血杆菌三、微生物学检查（三）抗原检测 可通过乳胶凝集反应鉴定b型抗原，免疫荧光或荚膜肿胀试验亦可获得较高的阳性结果。（四）分子生物学技术 PCR技术已用于鉴定临床标本中流感嗜血杆菌。 第一节 流感嗜血杆菌五、防治原则可用b型流感嗜血杆菌的荚膜多糖菌苗进行预防，一年内保护率在90%以上，但对1岁以下儿童预防效果欠佳。治疗可用氨苄西林、磺胺、氯霉素等。第二节 百日咳鲍特菌百日咳鲍特杆菌（Bordete

7、lla pertussis）简称百日咳杆菌，是一类革兰阴性小杆菌，是人类百日咳的病原菌。 一、生物学性状（一）形态与染色 革兰阴性卵圆形短小杆菌，大小为0.20.5m0.51.5m，无鞭毛和芽胞。毒力株有荚膜和菌毛。第二节 百日咳鲍特菌（二）培养特性 专性需氧，最适生长温度3537，最适pH 6.87.0。初次分离时营养要求高，需用含有甘油、马铃薯和血液的鲍-金(Bordet-Gengou medium)培养基，培养2 3天后，形成细小、光滑、不透明、银灰色的珍珠样菌落，周围有不明显的狭窄溶血环。生化反应较弱，不发酵糖类，不产生吲哚，不生成硫化氢，触酶阳性，氧化酶阳性。第二节 百日咳鲍特菌（三

8、）变异性 常发生菌落变异。新分离菌株为S型，称为相菌，有荚膜，毒力强。人工培养后，细菌失去荚膜，毒力消失，形成R型菌落，为相菌。第二节 百日咳鲍特菌（四）抵抗力 抵抗力较弱，日光照射1小时，56加热30分钟即死亡。对一般消毒剂和多种抗生素敏感。第二节 百日咳鲍特菌二、致病性和免疫性（一）致病物质 包括荚膜、菌毛、内毒素和毒性因子。1.百日咳外毒素：不耐热，性质不稳定，加热56 10 分钟即被破坏，经福尔马林处理可成为类毒素。该毒素是百日咳的主要毒力因子，能使呼吸系统血管淤血，并对脑神经细胞有损伤。第二节 百日咳鲍特菌2.腺苷酸环化酶毒素：迅速提高吞噬细胞内cAMP水平，抑制吞噬杀伤作用。3.气

9、管细胞毒素：结合于气管纤毛上皮细胞，并抑制细胞DNA合成，阻遏纤毛摆动甚至使细胞坏死脱落。4.皮肤坏死毒素：引起外周血管收缩，局部缺血，与局部组织坏死有关。5.丝状血凝素：与黏附纤毛上皮有关。第二节 百日咳鲍特菌6.溶血素：溶解破坏血细胞等。7.内毒素：百日咳鲍特菌产生的内毒素能使机体对组胺过敏，与感染时呼吸道分泌物增加有关。第二节 百日咳鲍特菌（二）所致疾病 百日咳是儿童常见的急性呼吸道传染病。由于病程较长，并以咳嗽为主要症状，故名百日咳。传染源是患者，尤其是症状轻微的非典型患者，通过飞沫传播。细菌进入易感儿童机体后，以菌毛黏附在呼吸道上皮细胞并在此生长繁殖，产生毒素，引起局部炎症和细胞坏死

10、，并抑制上皮细胞纤毛的正常运动，使粘稠分泌物不易被排出，刺激支气管黏膜感觉神经末梢，反射性地引起剧烈的连续性咳嗽。第二节 百日咳鲍特菌（二）所致疾病 百日咳潜伏期约714天，病程分为三期：卡他期：从发病到出现痉挛性咳嗽，约持续12周，此期症状类似感冒，传染性最大；痉咳期：一般持续16周，出现阵发性、痉挛性咳嗽，呈现特殊的高音调鸡鸣样吼声，呼吸道中大量粘稠分泌物不易排出；恢复期：约23周，此期阵发性、痉挛性咳嗽减轻，鸡鸣样吼声消失。在整个病程中，百日咳鲍特菌始终存在于呼吸道上皮细胞表面，不进入血流。但可继发其他细菌引起的支气管炎。第二节 百日咳鲍特菌（三）免疫性 百日咳病后可获得持久免疫力，很少

11、再次感染，即使再感染，症状也较轻。第二节 百日咳鲍特菌三、微生物学检查检查百日咳鲍特菌以分离培养为主，选可疑菌落做镜检、生化反应、特异性抗血清鉴定试验等。也可直接将鼻咽拭检材涂片作荧光抗体染色，镜检，可对百日咳做快速诊断，但特异性较差。第二节 百日咳鲍特菌四、防治原则对患者应早发现、早隔离，隔离期为自发病起7周。对易感人群采用带有荚膜的死菌苗或用白百破(白喉类毒素、百日咳菌苗、破伤风类毒素，DPT)三联疫苗等进行人工主动免疫。治疗首选红霉素、氨苄西林等。第三节 铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）俗称绿脓杆菌，是假单胞菌属的代表菌种。分布广，除存在于水、土壤

12、、污水、植物表面以及空气中外，正常人皮肤、肠道和呼吸道都有存在。当机体免疫力低下时可引起多种感染。第三节 铜绿假单胞菌 一、生物学性状（一）形态与染色 革兰阴性杆菌，大小为0.5 1.0m1.53.0m，菌体稍有弯曲，单个、成对或短链排列。菌体一端有13根鞭毛，运动活泼，无芽胞。临床分离的菌株常有菌毛。第三节 铜绿假单胞菌 一、生物学性状（二）培养 专性需氧。最适生长温度为35。营养要求不高，在普通肉汤中均匀混浊生长，并有菌膜。在普通琼脂平板上菌落大小不一，边缘不齐、扁平湿润。有些菌株能产生多种水溶性色素，主要为绿脓素( pyocyanin)和青脓素(pyoverdin)或称荧光素( fluo

13、rescin)，这些色素扩散入培养基而使培养基呈蓝绿色或黄绿色。第三节 铜绿假单胞菌 一、生物学性状（三）生化反应 发酵糖类能力低，但能分解葡萄糖，产酸不产气。多数不液化明胶，不形成吲哚，分解尿素，氧化酶阳性，能利用枸橼酸盐。第三节 铜绿假单胞菌 一、生物学性状（四）抵抗力 有较强的抵抗力，在潮湿的地方能长期生存。但对湿热敏感，561小时可被杀灭。1%石炭酸、5%甲酚皂液5分钟可被杀灭。对多种抗生素有耐药性。第三节 铜绿假单胞菌 二、致病性与免疫性 （一）致病物质第三节 铜绿假单胞菌（二）所致疾病 铜绿假单胞菌是正常菌群成员，一般不致病，其感染主要是接触传播，多见于局部或全身免疫防御功能低下者

14、，如感染多发生在皮肤黏膜受损的部位（烧伤、刨伤等），也常见于长期化疗或使用免疫抑制剂的患者。也是医院内感染的重要病原菌，占医源性感染的10%。临床表现可为局部化脓性炎症或全身感染。该菌几乎可侵犯人体的任何组织和器官，常见的有皮肤炎、中耳炎、尿道炎、角膜炎等，也可引起心内膜炎、胃肠炎、脓胸，甚至进入血流导致败血症。第三节 铜绿假单胞菌（三）免疫性 正常人体对铜绿假单胞菌有天然抵抗力。中性粒细胞的吞噬作用在抗该菌感染中起着重要作用，感染后产生的特异性抗体，也有一定的抗感染作用。第三节 铜绿假单胞菌三、微生物学检查（一）标本 可取脓液、创面渗出液、痰、尿、血液等。（二）培养 将标本接种于血琼脂平板，

15、培养后根据菌落特征、色素及生化反应等予以鉴定。第三节 铜绿假单胞菌四、防治原则应注意诊疗器械和医院环境的消毒管理，规范医护人员的无菌操作，防止医源性感染。已经研制出多种铜绿假单胞菌疫苗，其中以原内毒素蛋白(OEP)具有不受菌型限制，保护范围广、毒性低等优点。铜绿假单胞菌对多种常用抗生素有天然抗药性。最好根据药敏试验结果选择用药。治疗时可选用多粘菌素B、庆大霉素等。对烧伤患者也可采用多价绿脓杆菌抗血清治疗。第四节 幽门螺杆菌 幽门螺杆菌（Helicobacter，pylori,HP）是Warren等于1982年从慢性胃炎、消化性溃疡患者的胃活检组织中分离出来的呈弯曲状的细菌。大量研究表明它与慢性

16、胃炎、十二指肠溃疡有密切关系。第四节 幽门螺杆菌一、生物学性状（一）形态与染色革兰阴性，末端钝圆，呈螺旋形弯曲的杆菌，有时呈U形、S形或海鸥状，常聚集成堆，大小为0.51.0m2.54.0m。菌体一端或两端有26根带鞘的鞭毛，运动活泼。 第四节 幽门螺杆菌一、生物学性状（二）培养特性微需氧，营养要求较高，需在含血或血清等培养基上生长。最适生长温度为37，25不生长，42少数生长。pH6.08.0时繁殖最为活跃，培养34天后可见圆形、光滑、无色透明、针尖大小的菌落，在血平板上有轻度溶血。第四节 幽门螺杆菌一、生物学性状（三）生化反应不活泼，不分解糖类，但具有大量高活力的胞外尿素酶。故测定尿毒酶活

17、性可作为本菌感染的快速诊断方法之一。该菌还产生碱性磷酸酶、DNA酶、亮氨酰肽酶，借此与其他弯曲菌相区别。 第四节 幽门螺杆菌二、致病性与免疫性（一）致病物质该菌的致病机制尚不清楚，可能与下列因素有关：细菌的黏附作用，取决于细菌鞭毛，其运动活泼，穿透黏液层，黏附于完整的微绒毛上；除此而外，还产生尿素酶、蛋白酶、磷脂酶A和C，内毒素和外毒素样物质如细胞毒素相关蛋白A( CagA)和空胞毒素A( VacA)参与致病。此外，机体因素如胃酸分泌功能低下等也使该菌易感。第四节 幽门螺杆菌（二）所致疾病幽门螺杆菌与慢性胃炎、胃和十二指肠溃疡密切相关，也与胃癌的发生关系密切。幽门螺杆菌阳性的宿主常出现胃上皮增

18、生；感染该菌时，胃内亚硝胺、亚硝基化合物增多，有可能导致DNA突变致癌。第四节 幽门螺杆菌（三）免疫性人体感染该菌后可产生IgG、IgM和IgA型抗体，并能维持数年。但抗体的含量与胃炎的严重程度无明显关系。第四节 幽门螺杆菌三、微生物学检查通过纤维胃镜采取胃、十二指肠黏膜组织，直接涂片，革兰染色镜检，找到典型的弯曲呈螺旋形的细菌即可诊断。将活组织接种于选择培养基，经27天可获得阳性结果。尿素酶试验应为该菌感染的快速诊断。还可用组织切片Ciemsa或镀银染色镜检，免疫组化，间接免疫荧光法等诊断方法。PCR可用于快速诊断。第四节 幽门螺杆菌四、防治原则目前正在试用重组脲酶幽门螺杆菌疫苗，初步结果提

19、示其兼有预防和治疗的双重作用。此外及时诊断及治疗胃、十二指肠炎症，可减少胃癌发生率。治疗多采用枸橼酸铋钾或抑酸剂为基础，另加两种敏感抗生素如氟哌酸、甲硝唑的三联疗法。 第五节 空肠弯曲菌弯曲菌属（Campylobacter）细菌是一类呈逗点状或S形的革兰阴性杆菌，对人致病的有空肠弯曲菌、胎儿弯曲菌和和结肠弯曲菌等，其中空肠弯曲菌感染较常见，呈世界性分布，主要导致胃肠炎，也可引起肠道外感染。 第五节 空肠弯曲菌一、生物学性状（一）形态与染色形态细长，呈弧形、螺旋形或海鸥状，革兰阴性，菌体一端或两端有单鞭毛，运动活泼，无芽胞，无荚膜。 （二）培养特性微需氧，营养要求较高，生长在42中比37好。（三

20、）生化反应不活泼，不发酵糖类，氧化酶阳性 第五节 空肠弯曲菌二、致病性与免疫性致病物质检测到的有黏附素、细胞毒性酶类和肠毒素，但其特异性作用尚不清楚。 第五节 空肠弯曲菌二、致病性与免疫性空肠弯曲菌是散发性细菌性结肠炎最常见的菌种之一。该菌通过污染饮食、牛奶、水源等被食入。临床表现为痉挛性腹痛、腹泻、血便或果酱样便，量多，头痛，不适，发热。该病通常可自限，病程58天。感染空肠弯曲菌后24周可产生特异性IgM和IgG抗体，通过免疫调理和活化补体等作用增强吞噬细胞的吞噬杀菌及补体的溶菌作用。 第五节 空肠弯曲菌三、微生物学检查粪便标本涂片，镜检，查找革兰阴性弧形或海鸥状弯曲菌，或用悬滴法观察鱼群样

21、运动或螺旋式运动。分离培养可直接用选择性培养基，于42和37微需氧环境下培养4872小时。PCR法可直接检出粪便中的弯曲菌。 第五节 空肠弯曲菌四、防治原则目前尚无特异性疫苗，预防主要是注意饮水和食品卫生，加强人、畜、禽类的粪便管理。治疗可用红霉素、氨基糖苷类抗生素、氯霉素等。第六节 肠球菌肠球菌（E.enterococcus）为人类和动物肠道正常菌群的一部分。是医院感染的重要病原菌。一、生物学性状为典型的革兰阳性球菌，呈双或短链状排列，故与肺炎链球菌很难区别。无芽胞，无鞭毛，为需氧或兼性厌氧菌。本菌对营养要求较高，在含有血清的培养基上生长良好。在血平板上经37培养18小时后，可形成灰白色、不

22、透明、表面光滑、直径0.51mm大小的圆形菌落，不同的菌株表现为不同的溶血现象。第六节 肠球菌一、生物学性状与链球菌的不同在于本菌在生化反应上能耐受高盐和胆汁培养基，并对许多抗菌药物表现为固有耐药。 肠球菌属由粪肠球菌(E.faecalis) 、屎肠球菌(E.faecium) 、坚韧肠球菌(E.durans)等29个种组成。其中对人类致病者主要为粪肠球菌和尿肠球菌。在临床分离菌中粪肠球菌占85%95%、屎肠球菌占5%10%，其余少数为坚韧肠球菌和其他肠球菌。第六节 肠球菌二、致病性肠球菌有多种致病物质。其中脂磷壁酸与黏附素可使细菌黏附定植于肠道、泌尿道上皮细胞及心内膜细胞。集聚因子、细胞溶素、

23、信息素和明胶酶等都具有各自的功能。肠球菌由于其细胞壁坚厚，对许多抗生素表现为固有耐药，屎肠球菌比粪肠球菌更易耐药。肠球菌是医院感染的重要病原菌，容易在年老体弱，表皮黏膜破损以及抗生素使用不当等条件下产生感染。常见的感染有：尿路感染、腹腔盆腔感染、败血症和心内膜炎等。第六节 肠球菌三、微生物学检查根据感染部位不同采集脓液、尿液、血液等标本。将标本接种于血平板或选择性培养基，通过生化反应和血清学方法做出鉴定。第六节 肠球菌四、防治原则由于肠球菌对抗生素耐药性的增加，给临床治疗造成很大困难，已引起广泛重视。肠球菌感染的治疗应重视药物敏感试验。大部分肠球菌对呋喃妥因敏感，已成功用于尿路感染。肠球菌性心内膜炎、脑膜炎等