实验三 家兔Hb、RBC脆性测定及影响PPT

1、 实验三1、血红蛋白的测定(比色法)2、红细胞脆性的测定3、影响血液凝固的因素1血红蛋白的测定（P80）1 目的 掌握比色法测定动物血红蛋白含量的方法。2 实验原理 血红蛋白的量与血液颜色呈正相关23 主要材料 家兔、沙里氏血红蛋白计、0.1N盐酸4 方法与步骤 4.1 清洗：血红蛋白吸管、比色管；4.2 将0.1N盐酸加入比色管中至刻度“2”处；4.3 加样：用血红蛋白吸管取血20L，加入盐酸中，并利用上层盐酸将吸管内壁洗涤2-3次（避免起泡）；4.4 酸化10min以上；4.5 比色；4.6 读数： 绝对数：每100mL血液中血红蛋白的克数； 相对数：35 注意事项5.1 血红蛋白吸管和比

2、色管要清洁；5.2 取血要准确；5.3 避免比色管内起泡；5.4 蒸馏水要逐滴加入，防止过量；5.5 酸化时间不能少于10min；5.6 在自然光下比色，比色无刻度一方朝外。4红细胞脆性的测定（P82）1 目的 学习测定红细胞渗透脆性的方法，理解溶液渗透压在维持细胞正常形态中的作用。2 原理 红细胞膜对低渗溶液的抵抗力，称为RBC渗透脆性。 用低渗NaCL溶液的浓度表示：最小抵抗、最大抵抗 53 实验动物：家兔4 方法与步骤4.1 溶液配置表2 不同浓度NaCl溶液配制管 号123456789101%NaCl（mL）9.06.56.05.55.04.54.03.53.02.5蒸馏水(mL)1.

3、03.54.04.55.05.56.06.57.07.5NaCl浓度（%）0.900.650.600.550.500.450.400.350.300.2564.2 制备抗凝血：柠檬酸钠抗凝血。4.3 加抗凝血：每只试管加1滴，轻轻混匀。4.4 静置1h4.5 观察结果4.5.1 未溶血试管： 出现分层现象，下层红色浑浊，上层为无色透明。4.5.2 不完全溶血试管： 出现分层现象，下层红色浑浊，上层为淡红色透明。4.5.3 完全溶血试管： 无分层现象，完全淡红色透明。76 注意事项6.1 试管要洁净、干燥；6.2 配液要准确；6.3 加血量要一致，1D；6.4 轻轻倾倒试管2-3次混匀，避免机械

4、溶血；6.5 静置时间保证1h，防止中途人为振动；6.6 在光线明亮处观察结果。8影响血液凝固的因素（P88） 1 目的 以凝血时间为指标，了解影响凝血的因素。2 原理 血凝是一个酶促过程，有多种凝血因子参与，分为内源性和外源性凝血两个途径。 93 动物：家兔4 方法与步骤4.1 家兔的麻醉、保定与手术 33%乙醇溶液，6mL/kg，耳缘静脉注射。4.2 试管准备4.3 颈动脉采血4.4 记录凝血时间105 实验结果表1 血液凝固及其影响因素116 注意事项6.1 采血过程要尽量快，以减少计时误差；6.2 每支试管口径大小及采血量要相对一致；6.3 液体石蜡管内多余石蜡应尽量弃除；6.4 判断

5、凝血的标准要一致，一般以倾斜试管 达30-45时试管内血液不见流动为准。12表1 不同浓度NaCl溶液配制管 号123456789101%NaCl（mL）9.06.56.05.55.04.54.03.53.02.5蒸馏水(mL)1.03.54.04.55.05.56.06.57.07.5NaCl浓度（%）0.900.650.600.550.500.450.400.350.300.25表2: 血液凝固及其影响因素13实验报告撰写格式有要求14家兔Hb、RBC脆性测定及影响血凝因素的观察 1 实验相关信息及目的 2 材料 2.1 动物 2.2 主要药品： 2.3 主要仪器： 3 实验方法：简述或按生理实验指导书ab页介绍方法进行1 4 结果 4.1 家兔Hb、RBC脆性测定：见表1。分组实验组对照组Hb（g/L）RBC脆性（NaCL%）最小抵抗最大抵抗80-1500.6 0.550.4 0.35表1:家兔Hb、RBC脆性测定4.2 家兔血凝时间的测定：见表2。 表2：不同因素对家兔血凝时间的影响5 讨论5.1 家兔Hb测定结果与对照比较，其值?，原因：5.2 家兔RBC脆性测定结果与对照比较，其值?，原因：5.3 家兔血凝时间测定结果表明，时间长短，原因：参考文献1. 陈杰,家畜生理学M,第四版