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文档简介

1、实验四 薄层色谱TLC(薄层色谱是分离纯化和鉴定有机化合物的重要方法之一)一、实验目的和要求目的:了解薄层色谱的原理和方法。要求:初步掌握薄层板制版,点样,展开等操作。二、基本原理: 利用混合物各组分在某一物质中的吸附或溶解性能(分配)的不同;或其亲和性的差异,使混合物的溶液流经该种物质进行反复的吸附,或分配作用,从而使各组分分离。 本实验薄层色谱法中用的吸附剂为硅胶G,展开剂是91的无水苯和乙酸乙酯的混合溶剂。最开始苏丹和偶氮苯被吸附在硅胶上,当展开剂通过时,由于苏丹和偶氮苯本身极性和在展开剂中的溶解度不同,两者在硅胶上的移动速度也就不同(一般溶解度大和极性小的移动更快),从而将混合物分开,

2、并且可根据产生的不同比移值Rf来定性的鉴别化合物。 溶质的最高浓度中心至原点中心距离 展开剂前沿至原点中心距离Rf三、实验操作:1.薄层版的制备: 取两块20cm5cm左右的玻璃板,洗净,烘干。在80ml烧杯中,放入约10g硅胶G,加入约20ml蒸馏水,调成糊状,其稀稠为在震动下可流动,倒在玻璃板上。用食指和拇指拿住玻璃板,前后左右振摇、摆动,使流动的糊状物均匀的铺在玻片上(要求:制成的板厚薄均匀,无气泡。)将已涂好的硅胶G薄层板在室温下,水平放置半小时后(注意:室温放置必须使玻板干透,否则会出现断裂现象),移入烘箱,慢慢升温至110,恒温半小时。 2.点样: 样品为苏丹 ,偶氮苯及两者混合样

3、。每块板各点三个样品一个,两块板相同。 在薄层板一端约1cm处轻轻画一直线,取管口平整的毛细管,于画线处轻轻点样(毛细管刚接触薄板即可)。样点间距1cm1.5cm,斑点一般不超过2mm(注:因溶液太稀或样点太小,可重复点样。但应在前次点样的溶剂挥发后,方可重点,以防样点被溶解掉。样点过大,造成拖尾,扩散等现象,影响分离效果) 偶氮苯苏丹展开剂选用9:1的无水苯乙酸乙脂3.展开: 展开剂无水苯27ml,乙酸乙酯3ml 。将展开剂倒入层析缸,其高度不超过1cm(注:如超过点样线,则样点将被溶解掉)。 薄层色谱的展开,须在密闭容器中进行。为使展开剂蒸汽,在缸内迅速达到平衡,在缸内壁放置一高5cm,环

4、绕周长约4/5的滤纸,或放置两张11cm滤纸,下面浸入展开剂中。 将点样好的薄层板小心的放到层析缸中,点样的一端朝下,浸入展开剂中约0.5cm。 一般情况,先在薄片另一端1cm处画一条直线,展开剂达到此线时,立即取出。如未画线,观察展开剂前沿上升到一定高度时取出,并尽快在展开剂前沿画出标记。(注意:如不注意,展开剂挥发后,就无法确定展开剂上升的高度。)将薄层板晾干。观察混合试样斑点出现的位置及与其相应样品斑点是否相符。 记录溶质的最高浓度中心至原点中心距离和展开剂前沿至原点中心距离,计算Rf sOh!lS9oPrTgGWO#5BDAFyc7McrKrN*etY8Rj-K#Dg8elpaPUX7

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