第7章芳香胺类药物的分析

1、Amine Drugs Analysis 第七章 芳香胺类药物的分析徐州医学院药物分析教研室主讲人：邱净英Email: 一、化学结构与性质（化学性质与分析方法间的关系）二、鉴别试验三、特殊杂质检查四、含量测定 学习内容1. 掌握芳胺类、苯乙胺类药物的化学结构与分析方法间的关系；芳胺类药物的鉴别反应；亚硝酸钠滴定法的原理、测定的主要条件、终点指示方法及注意事项；2. 熟悉两类药物中特殊杂质的来源及检查方法；溴量法、比色法测定苯乙胺类药物含量的原理及方法；3. 了解两类药物的其它分析内容及国内外药典同类药物分析方法的差异。目的要求（一）对氨基苯甲酸酯类药物第一节 芳胺类药物的分析一、结构与性质（一

2、）对氨基苯甲酸酯类药物第一节 芳胺类药物的分析一、结构与性质主要性质: 1. 芳伯氨基特性 重氮化偶合反应；与芳醛缩合成Schiff碱的反应；易氧化变色等；盐酸丁卡因无此特性； 2. 水解特性 酯键或酰胺键，光学、热或碱性条件可促进其水解； 3. 弱碱性 具有脂烃胺侧链，碱性弱，非水滴定法测定含量； 4. 紫外及红外吸收； 5. 溶解性（二）酰胺类药物第一节 芳胺类药物的分析一、结构与性质第一节 芳胺类药物的分析一、结构与性质主要化学性质: 1. 水解后显芳伯氨基特性； 2. 酚羟基的特性 三氯化铁颜色反应; 3. 弱碱性 具有脂烃胺侧链，碱性弱，能与生物碱沉淀剂反应; 4. 与重金属离子发生

3、沉淀反应 盐酸利多卡因酰胺上的氮可在水溶液中与铜离子或钴离子络合，生成有色沉淀（芳酰胺）； 5. 紫外及红外吸收（二）酰胺类药物二、鉴别实验1. 重氮化偶合反应 （芳伯氨基或潜在芳伯氨基） 方法：取供试品约50mg，加稀盐酸1ml，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。 Ch.P.(2010) 盐酸普鲁卡因采用此方法鉴别（芳伯氨基或潜在芳伯氨基） Ch.P.(2010)对乙酰氨基酚水解后用采用此方法鉴别，方法：取本品约0.1g，加稀盐酸5ml，置水浴中加热40min，放冷;取0.5ml，滴加亚硝酸钠试液5滴

4、，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性-萘酚试液2ml，振摇，即显红色。 1. 重氮化偶合反应 二、鉴别实验（芳伯氨基或潜在芳伯氨基） 盐酸丁卡因：不具有芳伯氨基，但其分子结构中的芳香仲胺在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，生成N-亚硝基化合物的乳白色沉淀，可与具有芳伯氨基的同类药物区别。1. 重氮化偶合反应 二、鉴别实验2. 与三氯化铁反应 对乙酰氨基酚分子结构中有酚羟基，可直接三氯化铁试液反应显蓝紫色。3. 与重金属离子反应 盐酸利多卡因结构中的芳酰胺，在碳酸钠试液中与硫酸铜反应生成蓝紫色配位化合物，此有色物转溶于三氯甲烷中显黄色；在酸性溶液中与氯化钴反应生成亮绿色细小钴盐沉淀。本类其他药物在同样条件下

5、不发生此类反应。 Ch.P.(2010)盐酸利多卡因的鉴别：取本品0.2g，加水20ml溶解后，取溶液2ml，加硫酸铜试液0.2ml与碳酸钠试液1ml，即显蓝紫色；加三氯甲烷2ml，振摇后放置，三氯甲烷层显黄色。1. 与铜和钴离子反应二、鉴别实验3. 与重金属离子反应 2. 羟肟酸铁盐反应 Ch.P.(2010)盐酸普鲁卡因胺的鉴别：取本品0.1g，加水5ml，加三氯化铁试液和浓过氧化氢溶液各1滴，缓缓加热至沸，溶液显紫红色，随即变为暗棕色至棕黑色。二、鉴别实验4. 水解产物反应 1. 盐酸普鲁卡因的鉴别 Ch.P.(2010)盐酸普鲁卡因的鉴别：取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10%氢

6、氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，生成的蒸气能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，析出白色沉淀。二、鉴别实验4. 水解产物反应 2. 苯佐卡因的鉴别 Ch.P.(2010) 苯佐卡因的鉴别：取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5ml，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。二、鉴别实验5. 制备衍生物测定熔点 制成三硝基苯酚衍生物或硫氰酸盐衍生物6. 紫外特征吸收7. 红外吸收光谱（BP/USP)二、鉴别实验三、特殊杂质检查1. 对乙酰氨基酚的特殊杂质检查：1）乙醇溶液的澄清度与颜色 铁粉（附录IX B）、中间

7、体对氨基酚的有色氧化产物（附录IX A第一法）2）对氨基酚及有关物质 Ch.P.(2010)采用HPLC法检查对氨基酚及有关物质以控制杂质的量。 3）对氯苯乙酰胺 Ch.P.(2010)采用HPLC法检查对氯苯乙酰胺的量。三、特殊杂质检查四、含量测定1）原理：芳伯氨基在酸性溶液中与亚硝酸钠定量反应，生成重氮盐。（重氮化滴定法）1. 亚硝酸钠滴定法（sodium nitrite titration）四、含量测定2）反应机理：1. 亚硝酸钠滴定法（sodium nitrite titration） Ch.P.(2010) 盐酸普鲁卡因的含量测定：取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法（附录），加

8、水40ml和盐酸溶液（1 2）15ml，置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂-铂电极后，将滴定管尖端插入液面下约2/3处，在15-25，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/l)迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时将滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/l)相当于27.87mg的C13H20N2O2.HCl。四、含量测定3）影响因素：1. 亚硝酸钠滴定法（sodium nitrite titration）影响因素BECDA药物化学结构酸的种类酸的浓度滴定方式温度 盐酸利多卡因

9、与盐酸布比卡因均有潜在的芳伯氨基，可否利用本法进行含量测定？为什么？四、含量测定4）测定条件：1. 亚硝酸钠滴定法（sodium nitrite titration）在不同酸中重氮化反应的速度为：HBrHCl H2SO4 HNO3测定条件A过量盐酸 过量酸的作用：重氮化反应速度加快；重氮盐在酸性液中稳定；防止偶氮氨基化合物的生成。四、含量测定4）测定条件：1. 亚硝酸钠滴定法（sodium nitrite titration）K1 300 K2，NO+ 浓度增大，反应向正反应方向进行。测定条件A过量盐酸适量KBrB四、含量测定4）测定条件：1. 亚硝酸钠滴定法（sodium nitrite t

10、itration）影响因素BECDA药物化学结构酸的种类酸的浓度滴定方式温度 Ar-NN+Cl- + H2O Ar-OH + N2+ HCl测定条件CA过量盐酸10-30适量KBrB四、含量测定4）测定条件：1. 亚硝酸钠滴定法（sodium nitrite titration）影响因素BECDA药物化学结构酸的种类酸的浓度滴定方式温度四、含量测定4）测定条件：1. 亚硝酸钠滴定法（sodium nitrite titration）测定条件DCA过量盐酸10-30适量KBr液面下2/3；先快后慢B4）测定的主要条件 a. 加入KBr K1 300 K2，NO+ 浓度增大，反应向正反应方向进行。

11、 b. 加过量盐酸 在不同酸中重氮化反应的速度为：HBrHCl H2SO4 HNO3 重氮化反应速度加快； 重氮盐在酸性液中稳定； 防止偶氮氨基化合物的生成。1. 亚硝酸钠滴定法四、含量测定4）测定的主要条件 c. 滴定温度 室温1030。若温度过高，使HNO2逸失，并且重氮盐分解。 Ar-NN+Cl- + H2O Ar-OH + N2+ HCl d. 滴定速度 先快后慢，重氮化反应为分子反应，应缓缓加入NaNO2，不断搅拌。 e. 滴定管尖端插入液面下2/3处 防止HNO2挥发分解。1. 亚硝酸钠滴定法四、含量测定四、含量测定5）终点指示方法：1. 亚硝酸钠滴定法（sodium nitrit

12、e titration） a. 永停滴定法 Ch.P.(2010)阳极 NO + H2O HNO2 + H+ + e 阴极 HNO2 + H+ + e NO + H2O b. 电位滴定法 USP(32)四、含量测定 c. 外指示剂法 碘化钾-淀粉1. 亚硝酸钠滴定法（sodium nitrite titration）5）终点指示方法：2NaNO2 + 2KI + 4HCl 2NO + I2 + 2KCl + 2NaCl + 2H2Od. 内指示剂法 中性红（褪色反应不可逆）四、含量测定小 结：亚硝酸钠滴定法原理测定条件影响因素终点指示方法反应机理影响因素测定条件 酸的种类 过量盐酸（2.5 6

13、）酸的浓度 适量KBr温度 10 30 滴定方式液面下2/3，先快后慢1）原理 侧链烃胺具有弱碱性，在水溶液中用标准酸直接滴定没有明显的突跃，终点难易观测，而在非水酸性介质中，碱强度显著增强，因而使弱碱性药物的滴定能顺利进行。2. 非水溶液滴定法四、含量测定质子传递反应为基础的在水以外的溶剂中滴定的方法称为非水溶液滴定法。2）测定条件 冰醋酸为溶剂，加入醋酸汞试液以消除氢卤酸的干扰，并用结晶紫指示液指示终点。第二节 苯乙胺类药物的分析一、结构与性质主要化学性质: 1. 弱碱性 具有烃氨基侧链，仲胺氮显弱碱性； 2. 酚羟基特性 邻苯二酚结构，可与三氯化铁反应呈色；在空气中或遇光、热易氧化，色泽

14、变深；在碱性溶液中更易变色。 3. 光学活性 具有手性碳原子，利用此特性进行药物分析。1. 与三氯化铁反应 分子结构中具有酚羟基，与Fe络合显色。2. 与甲醛-硫酸反应（酚羟基取代）二、鉴别实验3. 氧化反应 酚羟基易被碘、过氧化氢、铁氰化钾等氧化剂氧化而呈现不同的颜色。二、鉴别实验4. 与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应） 重酒石酸间羟胺，加水溶解后，加亚硝基铁氰化钠试液、丙酮数滴与碳酸氢钠少量，加热后即显红紫色。（脂肪族伯胺的专属反应）5. 双缩脲反应 芳环侧链具有氨基醇结构，Ch.P.(2010)盐酸麻黄碱的鉴别：取本品1%水溶液1ml，加硫酸铜试液2滴及20%氢氧化钠1ml，即显蓝

15、紫色，加乙醚1ml振摇、放置，乙醚层显紫红色，水层变为蓝色。二、鉴别实验6. UV和IR 7. TLC和HPLC 三、特殊杂质检查杂质来源 原料残存 Ch.P.(2010) 采用紫外分光光度法检查酮体 检查原理 利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在310nm波长处的吸收度限制酮体的量。 1. 酮体的检查2. 光学纯度的检查3. 有关物质的检查 原理：药物分子结构中的苯酚结构，在酸性溶液中酚羟基的邻、对位活泼氢能与定量过量的溴发生溴代反应，再以碘量法测定剩余的溴，根据消耗的硫代硫酸钠滴定液的量，即可计算供试品的含量。2. 溴量法四、含量测定3

16、. 比色法1. 非水溶液滴定法1.中国药典中含芳伯氨基的药品大多采用下列哪种方法进行含量测定？ （ ）A. 氧化还原电位滴定法 B. 非水溶液中和法C. 用永停法指示等当点的重氮化滴定法 D. 用电位法指示等当点的银量法E. 用硫化银薄膜电极指示等当点的银量法2. 非那西丁含量测定：精密称取本品0.3630g，加稀盐酸回流1小时后，放冷，用亚硝酸钠滴定液（0.1010mol/L）滴定，消耗20.00ml。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于17.92mg的C10H13NO2，计算非那西丁的含量 （ ）A. 95.6% B. 96.6% C. 97.6% D. 98.6% E. 99

17、.7%练 习3. 在亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是在被测溶液中 （ ）添加Br- B. 生成NO+Br- C. 生成HBr D. 生成Br2 E. 抑制反应进行4. 下列哪个药物不能用亚硝酸钠法进行测定？ （ ）A. 盐酸利多卡因 B. 盐酸普鲁卡因 C. 苯佐卡因 D. 盐酸普鲁卡因胺 E. 对乙酰氨基酚5. 在重氮化反应中，溴化钾的作用是 （ ）A. 抗氧剂 B. 稳定剂 C. 离子强度剂 D. 加速重氮化反应 E. 终点辅助剂练 习6、盐酸丁卡因在酸性溶液中与亚硝酸钠作用生成 （ ）A、重氮盐 B、N-亚硝基化合物 C、亚硝基苯化合物 D、偶氮氨基化合物 E、香草醛7、盐酸去氧肾上腺素（C9H12NO2HCl=203.67）含量测定：精密称取本品0.1112g，置碘量