诊断——临床常用免疫学检查PPT课件

1、p免疫功能检查 (immunological function) 血清免疫球蛋白检测 血清补体检测 细胞免疫检测(immunoglobulin, complements, cell immune)p自身免疫检测 (auto-antibodies) 类风湿因子测定 抗核抗体检测 组织和细胞抗体检测 (RF ANA other antibodies)p感染免疫检测 (infectious immunology) 细菌感染免疫检测 病毒感染免疫检测 其它(寄生虫感染、性病等）(bacterial , virus and so on )q肿瘤标志物检测 (tumor markers) 蛋白质类肿瘤标志

2、物 糖脂类肿瘤标志物 酶类肿瘤标志物(proteins, glycolipid, enzymes markers) q器官与骨髓移植的检测 (organ and bone marrow transplantation)p病毒肝炎血清标志物 (virus hepatitis markers)p其它 循环免疫复合物检测、冷球蛋白检测、丙种反应性蛋白检测第1页/共101页l 血清免疫球蛋白检测血清免疫球蛋白检测( (Immunoglobulin test) ) l 血清补体检测 (Complements)l 细胞免疫检测 (Cell immune)第2页/共101页n概念：具有抗体活性和抗体样结构的

3、球蛋白，由浆细胞产生，存在于体液，血液，外分泌液和一些细胞膜上。n分类: 用超速离心、免疫电泳方法可将免疫球蛋白分为五类： IgG、IgA、IgM、 IgD 、 IgE第3页/共101页第4页/共101页第5页/共101页第6页/共101页u IgG最多、占75%85%抗体活性u IgA血清型和分泌型两种u IgM是有效的凝聚和溶解细胞的因子。最早；最先u IgD功能尚不完全清楚u IgE与变态反应有关(0.002%)第7页/共101页第8页/共101页ADCC第9页/共101页第10页/共101页 多克隆(Polyclonal)增高: IgG IgA IgM均增高 单克隆(Monoclona

4、l)增高: 仅某一种Ig增高而其他种不增高 第11页/共101页增高：p多克隆性增高(polyclonal elevate) 慢性感染、慢性肝病、自身免疫性疾病(chronic infection, chronic hepatitis, AID)p 单克隆性增高(monoclonal elevate) 免疫增殖性疾病 ( proliferative disease) 第12页/共101页第13页/共101页概念：单克隆B淋巴细胞异常增殖产生免疫球蛋白，具有相同结构和电泳迁徙速度，但不具有抗体活性。第14页/共101页第15页/共101页第16页/共101页减低：p 先天性(congenital

5、) 体液免疫缺陷和联合免疫缺陷（先天性无（低）丙种球蛋白血症等）p获得性(acquired) 肾病综合征（大量流失蛋白）、淋巴网状系统肿瘤、病毒感染、免疫抑制剂应用第17页/共101页p血清免疫球蛋白检测(Immunoglobulin test) p血清补体检测(Complements)p细胞免疫检测细胞免疫检测 ( (Cell immune) )第18页/共101页第19页/共101页 p 组成：由传统途径的9种成分c1（c1q 、c1r 、c1s ）c9,旁路途径的3种成分及其衍生物B、D 、 P 、H 、I等因子组成。p 作用：参与灭活病原体的免疫反应，也可破坏自身组织或自身细胞造成免疫

6、损伤第20页/共101页 第21页/共101页total hemolytic complement activity CH50正常值：50100 ku/L临床意义 ： 减低 1.先天性 2.合成减少 hepatitis ,营养不良 3.消耗或者丢失过多 SLE 增高急性炎症、组织损伤、某些肿瘤等。第22页/共101页p 补体C3检测 C3在补体系统各成分中含量最多，是传统途径和旁路途径被激活的关键物质。 正常值：0.851.7g/L p 补体C4检测 C4代表补体传统活化途径，在补体活化、促进吞噬、防止免疫复合物沉着和中和病毒等方面发挥作用 。 正常值：0.220.34g/L第23页/共101

7、页p参见CH50减低和增高的临床意义p C3增高在急性炎性反应更敏感p C4对判断免疫复合物形成时补体消耗性减低更有意义第24页/共101页p血清免疫球蛋白检测(Immunoglobulin test) p血清补体检测(Complements)p细胞免疫检测细胞免疫检测 ( (Cell immune) )第25页/共101页 细胞免疫检测(Cell immune)(Cell immune)T细胞免疫检测B细胞免疫检测自然杀伤细胞检测(NK cell)细胞因子检测(cytokine)第26页/共101页 T T细胞分化抗原测定细胞分化抗原测定 ( (免疫荧光法免疫荧光法; ;流式细胞）流式细胞）

8、 CDCD3 3总T T细胞 正常值： 69.4%4.86% 4.86% CDCD4 4T T辅助细胞（T TH H） 正常值： 41.17%5.28% 5.28% CDCD8 8T T抑制细胞（T TS S） 正常值： 24.58%4.02% 4.02% CD CD4 4 /CD /CD8 8 2.20.7/1 0.7/1 第27页/共101页第28页/共101页临床意义：CDCD4 4降低病毒感染（CMV,HIV,HBV) CDCD4 4/ CD/ CD8 8增高恶性肿瘤、自身免疫性疾病、变态反应、排异反应 CDCD4 4/ CD/ CD8 8减低见于艾滋病(HIV)(HIV)、恶性肿瘤、

9、传单及乙肝急性期。 CDCD3 3 CD CD4 4 CD CD8 8均增高T T细胞型淋巴细胞恶性疾病 (T lymphocytes malignant disease)(T lymphocytes malignant disease)第29页/共101页 B B细胞分化抗原测定： 应用CDCD1919、CDCD2020、 CDCD21 21 、 CDCD2222 和CDCD4040等单克隆抗体标记单个核细胞B B细胞，通过免疫荧光或流式细胞术进行检测。 CDCD1919 为全部B B细胞共有的表面标志，B B细胞活化后不消失，是最重要的B B细胞标记分子。 CDCD22 22 为成熟B B

10、细胞的表面标志。 参考值：CDCD19 19 11.743.73 % 3.73 % 第30页/共101页临床意义 升高B B细胞型急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞白血病、BurkittBurkitt淋巴瘤等 减低无丙种球蛋白血症、长期免疫抑制剂应用后第31页/共101页 自然杀伤细胞免疫检测I.I.自然杀伤细胞（NKNK）介导天然免疫应答，它不依赖抗体和补体即能杀伤靶细胞II.II. 自然杀伤细胞（NKNK）活性可作为判断机体抗肿瘤和抗病毒感染的指标之一第32页/共101页 细胞因子（cytokinecytokine）是由活化的免疫细胞和某些基质细胞分泌的，介导和调节免疫、炎症反应的小分子多

11、肽。 IL-2IL-2、IL-6IL-6、IL-8IL-8、IL-10IL-10和TNFTNF、IFNIFN第33页/共101页p免疫功能检查 p自身免疫检测p肿瘤标志物检测p感染免疫检测 (infectious immune)p器官与骨髓移植的检测 p病毒肝炎血清标志物p其它 第34页/共101页p类风湿因子测定p抗核抗体检测p组织和细胞抗体检测 第35页/共101页第36页/共101页 概念： RF是变性IgGIgG刺激机体产生的一种自身抗体，主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液内。 分型：可分为IgMIgM型、IgGIgG型、IgAIgA型等，用胶乳凝集法测出的主要是IgMIgM型

12、，速率散射比浊检测准确定量分析，用ELISAELISA法可检出其它型。第37页/共101页第38页/共101页A. 参考值： 阴性 30 U/L1：100为阳性 第54页/共101页临床意义： 1、ANAANA阳性最多见于未治疗的SLESLE，阳性率达80%80%100%100%（活动期几乎100%100%阳性） 2 2、ANAANA阳性是结缔组织病的标志，是SLESLE最佳筛选试验。 3 3、其它疾病, ,如原发性胆汁性肝硬化( (Primary biliary cirrhosis) )、慢性肝病、慢性感染、肿瘤等也可出现阳性第55页/共101页第56页/共101页 2.2.抗脱氧核糖核酸抗

13、体 （anti-DNA antibodyanti-DNA antibody） 其中抗双链DNADNA（double stranded-DNA,ds-double stranded-DNA,ds-DNADNA）抗体的靶抗原是细胞核中的DNADNA双螺旋结构，识别双碱基对的DNADNA。 正常结果：阴性 临床意义：1.1. 为SLESLE特异性抗体( (Specific antibody for Specific antibody for SLE)SLE)，特异性率95%100%95%100%；敏感性30-50%30-50%。2.2.与活动程度相关3.3.特别在并发狼疮性肾炎时起重要作用。4.4.

14、其它风湿病中抗ds-DNAds-DNA抗体也可阳性。第57页/共101页 3.3.可提取性核抗原多肽抗体谱 ENAENA（extractable antinuclear antigenextractable antinuclear antigen）由多种相对分子质量不同的多肽构成，利用免疫印迹试验可对这些抗原的自身抗体进行检测，目前已经发现2020余种。 第58页/共101页 抗体抗体靶抗原靶抗原意义意义方法方法SmRNA和核蛋白和核蛋白SLE标记抗体，阳性标记抗体，阳性3 040%双向免疫扩散双向免疫扩散U1RNP小核糖核蛋白小核糖核蛋白MCTD阳性阳性90%;SLESS SSc PM/DM

15、DID;EIASSA(Ro)小细胞质核糖核蛋白小细胞质核糖核蛋白PSS 40 95%;SCLE 70 90%DID;EIASSB(La)小细胞核核糖核蛋白小细胞核核糖核蛋白SS高度特异性高度特异性DID;EIArRNP60S核糖体大亚基核糖体大亚基SLE高度特异性抗体，阳性高度特异性抗体，阳性1040%。与脑病有关。与脑病有关。EIAScl-70拓扑异构酶拓扑异构酶1SSc特异性抗体特异性抗体,预后不良。预后不良。EIAJo-1tRNA合成酶合成酶PM/DM标记抗体标记抗体20 30%DID,IB第59页/共101页第60页/共101页第61页/共101页第62页/共101页Scl-70第63

16、页/共101页第64页/共101页第65页/共101页第66页/共101页第67页/共101页第68页/共101页第69页/共101页第70页/共101页第71页/共101页Jo-1第72页/共101页掌指关节和近端指间关节伸侧出现萎缩性掌指关节和近端指间关节伸侧出现萎缩性丘疹和斑疹，伴少量鳞屑，称丘疹和斑疹，伴少量鳞屑，称GottronGottron征征第73页/共101页第74页/共101页第75页/共101页第76页/共101页第77页/共101页第78页/共101页*Rheumatoid factor*Anti-Nuclear Antibody*tissue and cell anti

17、body第79页/共101页 组织和细胞抗体检测 抗线粒体抗体（anti-mitochondria antibody,AMA） 抗甲状腺球蛋白抗体（anti-thyroglobulin antibody,TG） 抗甲状腺微粒体抗体（anti-thyroid mivrosome ntibody,TM） 抗平滑肌抗体（antismooth muscle antibidy,ASMA）等 如AMA、ASMA在原发性胆汁性肝硬化、慢性肝病、自身免疫性肝炎中常为阳性第80页/共101页第81页/共101页p免疫功能检查p自身免疫检测(auto-immune)p感染免疫检测 p肿瘤标志物检测p器官与骨髓移植

18、的检测 p病毒肝炎血清标志物p其它 第82页/共101页（一）血清抗链球菌溶血素“O O” （anti-streptolysinanti-streptolysin“O O”，ASOASO） A组溶血性链球菌的荚膜抗原代谢产物链球菌溶血素“O”具有溶血活性，能溶解人类和一些动物的红细胞。 将受检病人血清倍比稀释后，加入一定量的链球菌溶血素“O”，如病人血清中含有抗体（ASO），即能使链球菌溶血素“O”失去溶血能力，不溶血的管数越多表示ASO的效价越高。 参考值：胶乳凝集法为阴性 100IU/L第83页/共101页 临床意义： 当机体受A组溶血性链球菌感染后23周，血清中即出现抗链球菌溶血素“O”

19、的抗体，这种抗体滴度直至病愈后数月到半年才下降至正常水平 ASO升高常见于活动性风湿热、风湿性关节炎、急性肾小球肾炎等 假阳性见于高胆固醇血症、黄疸、溶血等第84页/共101页第85页/共101页第86页/共101页第87页/共101页（二）伤寒和副伤寒Typhoid and paratyphoid 沙门菌免疫测定-肥达反应（Widal reactin WR） 人体被伤寒沙门菌感染后，菌体“O”抗原和鞭毛“H”抗原能刺激人体产生相应抗体。 副伤寒杆菌分甲、乙、丙三型参考值：伤寒WR“H” 1：160；“O” 1：80； 副伤寒WR甲、乙、丙均 1：80第88页/共101页第89页/共101页临

20、床意义： 当感染伤寒沙门菌后一周可出现阳性，第二周阳性率上升为 60% 70%，第四周可达90%以上，动态观察WR持续超过参考值，或较原效价升高4倍以上更有价值 假阳性结核病、风湿病 假阴性早期使用抗生素及免疫抑制剂治疗 第90页/共101页p免疫功能检查p自身免疫检测p感染免疫检测p肿瘤标志物检测(tumor marker)p器官与骨髓移植的检测 p病毒肝炎血清标志物p其它 第91页/共101页n肿瘤细胞分泌的标志物：蛋白质类、糖脂类、酶类 、激素类等n宿主产生的标志物：TNF、SFn不进入循环体液的标志物：第92页/共101页第93页/共101页胎儿早期肝脏和卵黄囊合成的血清糖蛋白，当肝细胞或生殖腺胚胎细胞恶变，基因激活，细胞合成AFP增加。参考值：20ng/ml意义： 1：原发性肝癌的诊断与鉴别诊断，10%阴性。 2：生殖腺胚胎癌、胃癌、胰腺癌可升高。 3：动态检测原发性肝癌治疗前后病情变化 4：孕妇可升高第94页/共101页胎儿早期消化管和一些组织合成，孕6月后减少，出生后极低。生理上孕妇可升高。参考值：15ng/ml意义： 1：90%胰腺癌、74%结肠癌、60%乳腺癌、肺癌等常明显升高。 2