安捷伦HPLC1100培训资源5_HPLCTM

1、Author：Tianyou Yue1Agilent 1100LC一般性维护保养 本节内容 Agilent1100LC的各部件简要原理介绍； 1100LC各模块使用注意事项； 1100LC各个模块易耗品的更换；Author：Tianyou Yue2关于溶剂所用溶剂应为HPLC级，水应为二次超纯水；所用溶剂应经过过滤。过滤水应使用水相滤膜，过滤有机相应使用有机相滤膜，不能混用，也不要用错。每一张滤膜只能用一次，不能重复使用。如果没有在线脱气机，所用溶剂应经过超声脱气。水易滋生藻类，避免直接照射，过滤后的水最好使用不要超过两天。如果条件允许可向溶剂中加入0.001-0.0001M的叠氮化钠。注意溶

2、剂的相容性，避免使用不相容的溶剂。避免使用强酸、强碱或有机氯等腐蚀性溶剂。在溶剂瓶中的溶剂过滤头可能会堵塞，必要时小心拿下用强酸（35%硝酸）浸泡1小时，用水冲洗，但不要使用超声处理。Author：Tianyou Yue3溶剂准备：过滤防止固体颗粒损伤仪器或柱头使用小于 0.5 m过滤膜.有机物 - Teflon 水 - Nylon 66使用HPLC纯溶剂过滤装置真空Author：Tianyou Yue4溶剂准备：脱气溶剂准备：脱气目的脱气方法He脱气排除溶解在流动相中的氧气和氮气 回流加热脱气真空脱气超声脱气Author：Tianyou Yue5在线真空脱气机在线真空脱气机的管路容量为12m

3、l，压力范围为110Torr-190Torr。为保证脱气机的良好使用性能，在下述情况下需要用注射器抽洗脱气机管路，每个通道使用不低于30ml的异丙醇。1，新的脱气机或新的管路；2，更换了溶剂，尤其是缓冲盐与有机相之间、两个不相容流动相之间的互换时；3，输液泵关闭了一段时间，或使用挥发性溶剂混合物。4，完成上述操作后，打开清洗阀，用大流量冲洗，5ml/min。12 mlSolenoid valveAuthor：Tianyou Yue6关于泵（四元泵）阻尼器/压力传感器泵驱动溶剂瓶梯度比例阀主动输入阀AV出口球阀BOV清洗阀Purge Valve柱塞杆PistonAuthor：Tianyou Yu

4、e7二元泵工作原理二元泵工作原理DamperPurge valveMixerABInlet valveOutlet valveWasteInlet valveOutlet valveAuthor：Tianyou Yue81，在线冲洗组件Seal Wash，可选件。2，密封垫；3，Washer密封膜；关于泵（泵头组件）123密封垫Seal出口球阀BOV清洗阀Purge Valve柱塞杆Piston主动输入阀AVAuthor：Tianyou Yue9更换过滤白头在清洗阀中的过滤白头需要更换，在清洗状态下，设置流量为5ml/min，此时系统压力如果超过10bar，则需更换过滤白头。更换步骤：1，关闭

5、泵电源；2，用扳手去掉通往进样器上的毛细管，拔掉废液管；3，用专用扳手小心把清洗阀卸下来；4，轻轻去掉聚四氟乙烯密封垫和金密封垫，将过滤白头拿出；5，更换新的过滤白头，装上聚四氟乙烯密封垫和金密封垫；6，装上清洗阀；7，连接管路。过滤白头聚四氟乙烯密封垫金密封垫清洗阀PurgeValveAuthor：Tianyou Yue10更换过滤白头1，去掉毛细管，废液管2，卸掉清洗阀3，更换过滤白头4，更换白头，装好清洗阀Author：Tianyou Yue11泵的注意事项1，溶剂的过滤、脱气；2，避免使用腐蚀性溶剂；3，在满足分析的前提下，尽可能使用较低的流速较低的系统压力。4，更换过滤白头；5，考虑

6、溶剂的相容性；6，尽可能使用新鲜的水；7，使用0.01M以上浓度的缓冲溶液要选配柱塞清洗组件，清洗液不能干涸。8，使用正相溶剂比如环己烷时，建议使用聚乙烯密封垫，部件号为0905-1420，在0200Bar下使用聚乙烯密封垫比标准密封垫更耐磨损。四元泵： 四元泵多通道比例阀MCGV使用时注意，缓冲溶液要放在A、D通道，以避免盐颗粒析出。建议A通道：水；B、C通道：有机溶剂；D通道：缓冲溶液。二元泵： 设置压缩因子补偿，以达到最佳比例效果。Author：Tianyou Yue12样品准备样品完全溶解在流动相中样品没有完全溶解过滤样品，确保样品中不含固体颗粒用流动相或比流动相弱的溶剂溶解样品进样量

7、尽量小关于进样器Author：Tianyou Yue13六通阀手动进样阀 - 六通阀ToWasteSample Loop(Fixed Volume)FromToColumnSampleSyringeLoadInjectToColumnPumpFrom PumpTo Waste手动进样器Author：Tianyou Yue14样品要干净、经过过滤。合适的进样体积，比如定量环为20ul，进样体积应为010ul，或者20ul，进样20ul时注射样品量应至少60ul以上。定期清洗进样阀，清洗过程如下： 1，将进样阀旋至Inject位置； 2，用带有专用头的注射器用纯水约2030ml冲洗进样阀； 3，将

8、进样阀旋至Load位置。 参考左图。手动进样器Author：Tianyou Yue15自动进样器Metering device6-port valveSampling unitFrom pumpTo columnTo waste准备位置准备位置调用样品瓶调用样品瓶吸样品吸样品进样和运行位置进样和运行位置标准进样过程标准进样过程 .Author：Tianyou Yue16自动进样器样品要干净、经过过滤。l洗针：把样品残留洗针：把样品残留降低到最小限度，降低到最小限度，可降低进样的记忆可降低进样的记忆效应，洗针瓶最好效应，洗针瓶最好不要加瓶垫。不要加瓶垫。l多次吸液多次吸液用于进样量大于用于进样量

9、大于100100ululAuthor：Tianyou Yue17关于恒温柱箱控制范围：最高80C，低温低于室温10C。预热块体积左面为3ul，右面为6ul，除非有特殊要求，左右温度应保持一致。一定要关闭前面板。Author：Tianyou Yue18预柱和保护柱从泵来的 流动相预柱进样口保护柱分析柱至检测器预柱是针对流动相来保护色谱柱 保护柱是针对样品来保护色谱柱色谱柱保护色谱柱保护Author：Tianyou Yue19色谱柱保护色谱柱保护 过滤所有的溶剂和样品过滤所有的溶剂和样品 使用保护柱使用保护柱 仪器在使用完毕，要冲洗整个系统，移走系统中的缓冲液。仪器在使用完毕，要冲洗整个系统，移走

10、系统中的缓冲液。 柱子在不使用时，两端密封保存柱子在不使用时，两端密封保存 在适当的溶剂中保存柱子在适当的溶剂中保存柱子 注意色谱柱的注意色谱柱的pHpH值使用范围值使用范围 不要高压冲洗柱子不要高压冲洗柱子 不要高温下过长时间使用硅胶键合相不要高温下过长时间使用硅胶键合相Author：Tianyou Yue20检测器DADDAD的光源氘灯有一定的半衰期，一般为1000小时左右，所以在没有样品分析任务时要关闭氘灯，以延长氘灯的使用寿命。流动池污染后，会造成灵敏度下降、噪声加大，应避免脏的样品进入流动池。定期使用异丙醇冲洗系统对保持流动池性能有一定好处。更换氘灯。Author：Tianyou Y

11、ue21检测器VWDVWD的光源氘灯有一定的半衰期，一般为1000小时左右，所以在没有样品分析任务时要关闭氘灯，以延长氘灯的使用寿命。流动池污染后，会造成灵敏度下降、噪声加大，应避免脏的样品进入流动池。定期使用异丙醇冲洗系统对保持流动池性能有一定好处。更换氘灯。Author：Tianyou Yue22计算机操作系统的维护计算机操作系统的维护经常性删除临时文件子目录中及垃圾斗中的文件。使用ScanDisk或Checkdisk检查盘上的错误。消除硬盘上的碎片（Windows 2K）。使用杀病毒软件。创建Emergency Repair disk (Windows 2K)。运行rdisk。如果计算机被非法关机，临时文件子目录中会留下许多临时文件，如果不及时清除，这些文件会影响系统的性能。所以，这些文件应定期删除。定期拷贝有用的文件。定期拷贝有用的文件。在工作站中有用