项目一五常用生物化学实验技术及原理

1、会计学1项目一五常用生物化学实验技术及原理项目一五常用生物化学实验技术及原理气 固 色 谱气 相 色 谱气 液 色 谱液 固 色 谱液 相 色 谱液 液 色 谱超 临 界 流 体 色 谱毛 细 管 电 泳流动相与固定相流动相与固定相聚集态聚集态（1）按两相所处的物态分类AB 这种方法能使样品的各组分获得良好的分离，色谱峰清晰。此外，除去冲洗剂后，可获得纯度较高的物质。目前，这种方法是色谱法中最常用的一种方法。AB 此法适于制备纯物质或浓缩分离某一组分；其缺点是经一次使用后，柱子就被样品或顶替剂饱和，必须更换柱子或除去被柱子吸附的物质后，才能再使用。 该法在分离多组分混合物时，除第一组分外，该法

2、在分离多组分混合物时，除第一组分外，其余均非纯态，因此仅适用于从含有微量杂质的混其余均非纯态，因此仅适用于从含有微量杂质的混合物中切割出一个高纯组分（组分合物中切割出一个高纯组分（组分A A），），而不适用而不适用于对混合物进行分离。于对混合物进行分离。按流动相分按流动相分气相色谱（GC）液相色谱（LC）超临界流体色谱（SFC）按机理分按机理分吸附色谱分配色谱离子交换色谱排阻色谱按固定相在支持按固定相在支持 体中的形状分体中的形状分柱色谱平板色谱纸色谱薄层色谱按分离效率分按分离效率分经典液相色谱高效液相色谱（二）分光光度技术0IIt0IIt0IItKMnO4吸收光谱曲线标样原样标样标原样样纯被

3、测组分AAcAAcccBBAAbcbcA111BBAAbcbcA222电泳（electrophoresis）是指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫做电泳技术（electrophoresis technique）。可以实现电泳分离技术的仪器称之为电泳仪（electrophoresister）。 电泳现象和电渗流现象V = EQ/6r 将滤纸条水平地架设在两个装有缓冲溶液的容器之间，样品点于滤纸中央。当滤纸条被缓冲液润湿后，再盖上绝缘密封罩，即可由电泳电源输入直流电压（100V1000V）进行电泳。 平卧式电泳槽装置示意图

4、 血清蛋白的电泳图谱 凝胶电泳图 净电荷与PH的关系曲线 等速电泳示意图 等电聚焦仪 双向凝胶电泳示意图第一向IEF第二向SDS-PAGE18cm玻璃板MarkerIPG胶条等电聚焦电泳槽六、双向凝胶电泳（二维电泳）六、双向凝胶电泳仪器结构 制胶板、电泳槽、电源、计算机、扫描仪等 垂直电泳仪器装置示意图实验室常用电泳槽和电泳 第三节 常用电泳仪的基本结构及技术指标水平电泳槽、电泳仪 稳压稳流电泳仪 全自动电泳仪 高效毛细管电泳仪 毛细管电泳仪装置示意图 TriSepTM-2010GV pCEC System 毛细血管区带电泳原理图 毛细管胶束电动色谱原理图 CEC-加压毛细管电色谱仪 毛细管电

5、泳仪 TriSep 毛细管电泳仪 BECKMAN COULTER毛细管电泳仪故障信息故障信息引起故障可能原因引起故障可能原因解决方法解决方法转盘识别错误转盘识别错误细微灰尘吸附在灯上细微灰尘吸附在灯上 仪器关机，用洁净棉签轻轻拭去灯上面的仪器关机，用洁净棉签轻轻拭去灯上面的灰尘。仪器开机后再进行测定。灰尘。仪器开机后再进行测定。 样品识别错误样品识别错误血清分离不好或者有灰尘吸附血清分离不好或者有灰尘吸附 关机状态，拆开仪器内透明有机玻璃，关机状态，拆开仪器内透明有机玻璃，用无水乙醇擦拭加样针外壁，然后安用无水乙醇擦拭加样针外壁，然后安装好，再用仪器内程序进行加样针清装好，再用仪器内程序进行加

6、样针清洗，洗完洗，洗完 12 次后，进行加样针加样次后，进行加样针加样感应定位。感应定位。 仪器报警出现缺少稀仪器报警出现缺少稀释杯或稀释杯感应释杯或稀释杯感应错误错误仪器稀释杯位置错误仪器稀释杯位置错误 观察稀释杯位置，如果没有处于正常位置，观察稀释杯位置，如果没有处于正常位置，可手动将其移动到其原来位置，可手动将其移动到其原来位置， 然后然后进行稀释杯感应定标。进行稀释杯感应定标。曲线不理想，显示不稳曲线不理想，显示不稳定定毛细管的长期使用出现不清洁毛细管的长期使用出现不清洁 毛细管清洗程序进行清洗，然后按激活程毛细管清洗程序进行清洗，然后按激活程序进行激活既可序进行激活既可电泳时出现峰丢

7、失电泳时出现峰丢失未接入检测器，或检测器不起作用未接入检测器，或检测器不起作用，进样温度太低进样温度太低，柱箱温度太低，无柱箱温度太低，无载气流载气流 检查设定值。检查设定值。 检 查 温 度 ， 并 根 据 需 要 调 整 。检 查 温 度 ， 并 根 据 需 要 调 整 。检 查 温 度 ， 并 根 据 需 要 调 整 。检 查 温 度 ， 并 根 据 需 要 调 整 。检查压力调节器，并检查泄漏，验证检查压力调节器，并检查泄漏，验证柱进品流速。柱进品流速。运行过程中突然断电运行过程中突然断电电流量不稳定或仪器内有短路现象电流量不稳定或仪器内有短路现象采用稳压措施，咨询工程师更换保险采用稳压措施，咨询工程师更换保险毛细管电泳仪常见故障及故障排除方法 血清蛋白电泳图谱 尿蛋白电泳图谱 血红蛋白电泳图谱 免疫固定电泳图谱 同工酶电泳图谱 脂蛋白电泳图谱谢 谢 电泳现象和