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文档简介
1、一一.实验原理:实验原理:.还原性糖的鉴定:还原性糖的鉴定:还原性糖还原性糖+.脂肪的鉴定:脂肪的鉴定: 脂肪脂肪+ 脂肪脂肪+ .蛋白质的鉴定:蛋白质的鉴定:蛋白质蛋白质+ +斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀苏丹苏丹橘黄色橘黄色苏丹苏丹红色红色双缩脲试剂双缩脲试剂紫色紫色选材:含糖量较高的选材:含糖量较高的白色或近于白色的植物组织白色或近于白色的植物组织(排除色素对排除色素对显色的干扰显色的干扰),苹果、梨最好,苹果、梨最好 。 l实验流程实验流程(步骤步骤)1.可溶性还原糖可溶性还原糖 制备组织样液:制备组织样液:制浆:去皮、切块、研磨,制浆:去皮、切块、研磨,过滤:(用单层纱布)过滤
2、:(用单层纱布)取液:取液:(mL)显色反应显色反应 现象:现象: (用前混匀用前混匀)5065.C水浴水浴加热加热2min取一个洗净的苹果切下一取一个洗净的苹果切下一块,去皮,然后切成小块,块,去皮,然后切成小块,取一部分切成小块的苹果取一部分切成小块的苹果放在研钵中,加入少许二放在研钵中,加入少许二氧化硅(石英砂),然后氧化硅(石英砂),然后研磨,将研钵中加入少量研磨,将研钵中加入少量水继续研磨。水继续研磨。将玻璃漏斗插入试管中,将玻璃漏斗插入试管中,在漏斗上垫一层纱布,在漏斗上垫一层纱布,将组织研磨液进行过滤,将组织研磨液进行过滤,得到苹果的组织样液。得到苹果的组织样液。用量筒取两毫升组
3、织用量筒取两毫升组织样液,再用量筒取两样液,再用量筒取两毫升毫升新配制好的新配制好的斐林斐林试剂。试剂。4还原糖的检测和观察:还原糖的检测和观察: 蓝蓝 色色 棕色棕色砖红色砖红色还原糖的检测结果还原糖的检测结果芝麻,脂肪含量丰富,芝麻,脂肪含量丰富,但种子颗粒太小,不利但种子颗粒太小,不利于切片制作。于切片制作。玉米,脂肪含量较少,玉米,脂肪含量较少,种子颗粒也较小,因此种子颗粒也较小,因此也不适合做实验材料。也不适合做实验材料。花生是比较花生是比较理想的实验理想的实验材料材料我们选用花我们选用花生生Y脂肪的检测和观察脂肪的检测和观察Y实验材料:花生种子,花生种子匀浆实验材料:花生种子,花生
4、种子匀浆Y实验试剂:苏丹实验试剂:苏丹/染液染液Y实验步骤实验步骤Y方法一:向待测组织样液中滴加方法一:向待测组织样液中滴加3 3滴苏丹滴苏丹染液,染液,观察样液被染色的情况观察样液被染色的情况Y实验结果:样液被染成实验结果:样液被染成橘黄色橘黄色Y方法二:制作子叶临时切片,用显微镜观察子叶方法二:制作子叶临时切片,用显微镜观察子叶细胞的着色情况细胞的着色情况Y试验流程:试验流程:Y实验步骤实验步骤Y取材:取一粒取材:取一粒的花生种子,的花生种子,Y切片:用刀片在花生子叶的切片:用刀片在花生子叶的上上切下若切下若干薄片,放入盛有清水的培养皿中待用干薄片,放入盛有清水的培养皿中待用Y制片:从培养
5、皿中选取最薄的切片,用制片:从培养皿中选取最薄的切片,用蘸取蘸取放在载玻片中央;在花生子叶薄片上滴放在载玻片中央;在花生子叶薄片上滴2-32-3滴苏丹滴苏丹染液,染色染液,染色3min3min(如果用苏丹(如果用苏丹染液,染色染液,染色1min1min););,;用吸水纸吸去花生子叶周围;用吸水纸吸去花生子叶周围的酒精,滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装的酒精,滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片片苏丹的染色时间长于苏丹!注意:这是第一个用到的实验!Y实验步骤实验步骤Y观察:在低倍显微镜下找到花生子叶的最观察:在低倍显微镜下找到花生子叶的最薄处,移到视野中央,将物像调节清楚;换薄处,移到视
6、野中央,将物像调节清楚;换高倍显微镜观察,高倍显微镜观察,Y注意:注意:脂肪的检测结果脂肪的检测结果3.蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定 选材与制备选材与制备组织样液:组织样液:黄豆组织样液(或鸡蛋蛋清稀释液)黄豆组织样液(或鸡蛋蛋清稀释液)黄豆浸泡黄豆浸泡 去皮去皮切片切片研磨研磨过滤过滤滤液滤液 显色反应显色反应现象:现象:无色无色 紫色紫色(创设碱性条件创设碱性条件)(提供提供Cu2+)蛋白质的检测结果蛋白质的检测结果蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定-双缩脲试剂双缩脲试剂鸡蛋清溶液鸡蛋清溶液 NaOH 溶液溶液滴加滴加CuSO2 溶液溶液, 每次滴加均需摇匀每次滴加均需摇匀结果显示结果显示: 紫色紫色4
7、.淀粉的鉴定淀粉的鉴定取材:马铃薯匀浆取材:马铃薯匀浆检测:检测:碘液碘液2滴滴现象:现象: 摇匀后变成蓝色摇匀后变成蓝色问题探讨问题探讨:1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时,为什么要留出、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时,为什么要留出一部分样液?一部分样液?作对照作对照2、使用双缩脲试剂时为什么、使用双缩脲试剂时为什么B液不能过量?液不能过量? 过量的双缩脲试剂过量的双缩脲试剂B B会与试剂会与试剂A A反应,使溶液呈蓝色,反应,使溶液呈蓝色,而掩盖生成的紫色。而掩盖生成的紫色。3、为什么斐林试剂要现配现用,不能放置太久?为什么斐林试剂要现配现用,不能放置太久? 时间太长,时间太长,Cu(OH
8、)Cu(OH)2 2悬浊液就沉淀在试管底部而悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。无法参与反应。l深化深化比较项比较项目目试剂及成试剂及成分分原理原理溶液浓度溶液浓度方法方法加热加热与否与否结结果果可溶还可溶还原糖的原糖的鉴定鉴定斐林试剂斐林试剂NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4砖砖红红色色沉沉淀淀蛋白质蛋白质的鉴定的鉴定双缩脲试双缩脲试剂剂NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4溶溶液液呈呈紫紫色色4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同?、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同?新配制新配制的的Cu(OH)2溶液溶液在碱性在碱性环境下环境下的的Cu2+NaOH浓度为浓度为0.1g/mLCu
9、S04浓度为浓度为0.05g/mLNaOH浓度为浓度为0.1g/mLCuS04浓度为浓度为0.01g/mL先把先把NaOH溶液和溶液和CuSO4溶液溶液混合混合,而后而后立即使用立即使用。先先加入加入Na0H1mL,然,然后后再加再加CuS044滴,摇匀。滴,摇匀。(不能过量不能过量)水浴水浴加热加热不不需需要要5、实验的材料的选择和处理有什么要求?、实验的材料的选择和处理有什么要求?材料的选择材料的选择材料的处理材料的处理还原性糖的鉴定还原性糖的鉴定脂肪的鉴定脂肪的鉴定含糖高,颜色为含糖高,颜色为白色的植物组织,白色的植物组织,如苹果和梨如苹果和梨富含脂肪的种子富含脂肪的种子,如花生,如花生
10、浸泡浸泡34小时小时/蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定富含蛋白质的富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清黄豆或鸡蛋清黄豆需浸泡黄豆需浸泡1-2天,天,鸡蛋清要先稀释鸡蛋清要先稀释淀粉的鉴定淀粉的鉴定马铃薯马铃薯/ 各种可供实验的材料各种可供实验的材料梨梨 黄桃黄桃 胡萝卜胡萝卜 黄豆黄豆 花生种子花生种子 小麦种子小麦种子 其中适合于鉴定其中适合于鉴定可溶性还原糖可溶性还原糖的是的是 ,理由是,理由是梨的组织细胞梨的组织细胞 ,你打算用什么试剂鉴定你打算用什么试剂鉴定? 。 小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪,这是小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪,这是因为因为 ,你打,你打算用什么试剂鉴定算用什么试剂鉴定
11、? . 例例 做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时,需要根据实验需要选择不同的白质的鉴定实验时,需要根据实验需要选择不同的实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题:实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题:梨梨 颜色为白色,并且糖含量较高颜色为白色,并且糖含量较高 斐林试剂斐林试剂脂肪含量不如花生高,也不容易做切片脂肪含量不如花生高,也不容易做切片 用苏丹用苏丹或苏丹或苏丹试剂试剂小麦种子中糖类化合物小麦种子中糖类化合物 含量很高,却不适合用含量很高,却不适合用来鉴定来鉴定 _,这是因为,这是因为 _。 适合于鉴定蛋白质的是适合于鉴定蛋白质的是
12、,理由是,理由是 ,鉴定所用的试剂是,鉴定所用的试剂是 。 蛋白质含量高蛋白质含量高 黄豆黄豆 双缩脲试剂双缩脲试剂淀粉淀粉 可溶性还原糖可溶性还原糖 淀粉是非还原糖且不溶于水淀粉是非还原糖且不溶于水 1、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国,引起世、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国,引起世人注目。鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品,人注目。鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品,肯定不需要用到的化学试剂是肯定不需要用到的化学试剂是( ) A.斐林试剂斐林试剂 B. 红墨水红墨水C.双缩脲试剂双缩脲试剂 D.苏丹苏丹染液染液 Bl例题例题2(2005.广东广东)生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中,以下操作错
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