生化基本操作技术

1、生化基本操作技术生化基本操作技术生化基本操作技术生化基本操作技术学习目标学习目标v学会规范使用分光光度计、吸量学会规范使用分光光度计、吸量管、微量移液器。管、微量移液器。v熟悉熟悉生化实验生化实验室规则和生化实训室规则和生化实训课的要求课的要求。v培养同学实事求是、团结协作、培养同学实事求是、团结协作、具有自我防护的意识、爱护公用具有自我防护的意识、爱护公用物品的工作作风物品的工作作风实验内容吸量管吸量管微量移液器微量移液器分光光度计分光光度计吸量管移取溶液的方法是： (1)洗涤。使用前移液管和吸量洗涤。使用前移液管和吸量管都要洗涤，直至内壁不挂水珠管都要洗涤，直至内壁不挂水珠为止。为止。方法

2、方法:先用洗液洗，再用自来水冲洗，先用洗液洗，再用自来水冲洗，最后用蒸馏水洗涤干净。最后用蒸馏水洗涤干净。(2)润洗。为保证移取溶液时溶液润洗。为保证移取溶液时溶液浓度保持不变，应使用滤纸将管浓度保持不变，应使用滤纸将管口内外水珠吸去，再用被移溶液口内外水珠吸去，再用被移溶液润洗三次，置换移液管或吸量管润洗三次，置换移液管或吸量管内壁的水分。润洗后的溶液应该内壁的水分。润洗后的溶液应该弃去。弃去。(3)吸取溶液。吸取溶液时，用右手大拇指和中吸取溶液。吸取溶液时，用右手大拇指和中指拿在管子的刻度上方，插入溶液中，左手用吸指拿在管子的刻度上方，插入溶液中，左手用吸耳球将溶液吸入管中（预先捏扁，排除

3、空气）。耳球将溶液吸入管中（预先捏扁，排除空气）。吸管下端至少伸入液面吸管下端至少伸入液面1cm，不要伸入太多，不要伸入太多，以免管口外壁沾附溶液过多，也不要伸入太少，以免管口外壁沾附溶液过多，也不要伸入太少，以免液面下降后吸空。用洗耳球慢慢吸取溶液，以免液面下降后吸空。用洗耳球慢慢吸取溶液，眼睛注意正在上升的液面位置，移液管应随容器眼睛注意正在上升的液面位置，移液管应随容器中液面下降而降低。当液面上升至标线以上，立中液面下降而降低。当液面上升至标线以上，立即用右手食指按住管口。（一般不用大拇指操作，即用右手食指按住管口。（一般不用大拇指操作，大拇指操作不灵活。）随后右手食指稍稍抬起，大拇指操

4、作不灵活。）随后右手食指稍稍抬起，让液面缓慢下降到凹液面与刻度正好相切即可。让液面缓慢下降到凹液面与刻度正好相切即可。 (4)放出整管溶液。将移液管放入锥形瓶或容量放出整管溶液。将移液管放入锥形瓶或容量瓶中，将锥形瓶或容量瓶略倾斜，管尖靠瓶内壁，瓶中，将锥形瓶或容量瓶略倾斜，管尖靠瓶内壁，移液管垂直。管尖放到瓶底是错误的。松开食指，移液管垂直。管尖放到瓶底是错误的。松开食指，液体自然沿瓶壁流下，液体全部留出后停留液体自然沿瓶壁流下，液体全部留出后停留15秒（移液管上标有秒（移液管上标有“快快”，应该不停留），取出，应该不停留），取出移液管。留在管口的液体不要吹出，因为校正时移液管。留在管口的液体不要吹出，因为校正时未将这部分体积计算在内（移液管上标有未将这部分体积计算在内（移液管上标有“吹吹”，应该将留在管口的液体吹出）。使用吸量管放出应该将留在管口的液体吹出）。使用吸量管放出一定量溶液时，通常是液面由某一刻度下降到另一定量溶液时，通常是液面由某一刻度下降到另一刻度，两刻度之差就是放出的溶液的体积，注一刻度，两刻度之差就是放出的溶