药物制剂分析

1、药物制剂分析概论药物制剂分析概论第十八章第十八章主要内容主要内容第一节第一节 药物制剂类型及其分析特点药物制剂类型及其分析特点第二节第二节 片剂分析片剂分析第三节第三节 注射剂分析注射剂分析第四节第四节 复方制剂分析复方制剂分析学习要求学习要求 掌握：片剂和注射剂的分析掌握：片剂和注射剂的分析 熟悉：复方制剂分析熟悉：复方制剂分析 了解：药物制剂类型及其分析特点了解：药物制剂类型及其分析特点药物制剂药物制剂（1）可以更好的发挥疗效）可以更好的发挥疗效（2）降低药物毒副作用）降低药物毒副作用（3）方便使用、贮存和运输）方便使用、贮存和运输药物以制剂形式供临床使用，药物以制剂形式供临床使用，为什么

2、？为什么？ 原料原料制剂：加入赋形剂、稀释剂、附加剂制剂：加入赋形剂、稀释剂、附加剂 （稳定剂、抗氧剂、防腐剂、着色剂等），并（稳定剂、抗氧剂、防腐剂、着色剂等），并 经过适当的工艺流程加工而成。经过适当的工艺流程加工而成。片剂、胶囊剂、注射剂、栓剂、酊剂、软膏剂（乳膏片剂、胶囊剂、注射剂、栓剂、酊剂、软膏剂（乳膏剂、糊剂）、眼用制剂、丸剂、植入剂、糖浆剂、气剂、糊剂）、眼用制剂、丸剂、植入剂、糖浆剂、气雾剂（粉雾剂、喷雾剂）、膜剂、颗粒剂、口服溶液雾剂（粉雾剂、喷雾剂）、膜剂、颗粒剂、口服溶液剂（口服混悬剂、口服乳剂）、散剂、耳用制剂、鼻剂（口服混悬剂、口服乳剂）、散剂、耳用制剂、鼻用制剂、

3、洗剂（冲洗剂、灌肠剂）、搽剂（涂剂、涂用制剂、洗剂（冲洗剂、灌肠剂）、搽剂（涂剂、涂膜剂）、凝胶剂、贴剂等膜剂）、凝胶剂、贴剂等21种种。 药典收载的制剂类型药典收载的制剂类型第一节第一节 药物制剂类型及分析特点药物制剂类型及分析特点p 复杂性复杂性l 原料药：成分单一，根据药物的理化性质原料药：成分单一，根据药物的理化性质l 制制 剂：活性成分和辅料、药物含量低、须进行剂剂：活性成分和辅料、药物含量低、须进行剂 型检查。型检查。u 不同的剂型：质量控制项目、指标、分析方法、样品前不同的剂型：质量控制项目、指标、分析方法、样品前 处理方法都不同。处理方法都不同。u 分析依据：分析依据： （1）

4、药物的理化性质）药物的理化性质 （2）附加成分有无干扰）附加成分有无干扰 （3）干扰程度如何）干扰程度如何 （4）如何消除或防止干扰）如何消除或防止干扰 （5）复方制剂各有效成分间的干扰）复方制剂各有效成分间的干扰 药物制剂分析的特点药物制剂分析的特点u 阿托品：原料阿托品：原料非水滴定法非水滴定法 片剂、注射剂片剂、注射剂酸性染料比色法酸性染料比色法u 阿司匹林：原料阿司匹林：原料直接滴定法直接滴定法 片剂片剂两步滴定法两步滴定法 肠溶剂肠溶剂两步滴定法两步滴定法 栓剂栓剂HPLC 法法u p467 1和和2l 示例示例在一定程度上多方面体现药品的质量，是制剂分在一定程度上多方面体现药品的质

5、量，是制剂分析不可缺少的组成部分。尤其是在药品的使用环节，析不可缺少的组成部分。尤其是在药品的使用环节，具有更重要的意义。具有更重要的意义。（一）药物制剂性状分析的特点（一）药物制剂性状分析的特点（二）药物制剂鉴别的特点（二）药物制剂鉴别的特点 用合格用合格的原料药制备，故原料药的检查项目在制剂的原料药制备，故原料药的检查项目在制剂分析中一般不再重复；主要检查制剂在制备或贮存过分析中一般不再重复；主要检查制剂在制备或贮存过程中可能产生的杂质。程中可能产生的杂质。 以相应原料药的鉴别为基础，要考虑辅料的影响。以相应原料药的鉴别为基础，要考虑辅料的影响。 p468：例：例3、42. 剂型检查与安全

6、性检查剂型检查与安全性检查p 制剂通则：各剂型的质量标准制剂通则：各剂型的质量标准p 片剂：重量差异；崩解时限；溶出度；释放度；含量均匀度片剂：重量差异；崩解时限；溶出度；释放度；含量均匀度 等等p 注射剂：装量差异；色泽、澄明度；注射剂：装量差异；色泽、澄明度；pH值、碘值；皂化值、碘值；皂化 值；无菌、热原；不溶性微粒等值；无菌、热原；不溶性微粒等（三）药物制剂检查的特点（三）药物制剂检查的特点1. 杂质检查杂质检查p 制剂制备和储藏过程中可能产生制剂制备和储藏过程中可能产生（原料药未控制的杂质）（原料药未控制的杂质） 的杂质；的杂质；p 制剂制备和贮存过程中可能增加的（原料药已控制的杂制

7、剂制备和贮存过程中可能增加的（原料药已控制的杂 质）质）| 示例：示例：p468 例例5 制制 剂：考虑方法的专属性和灵敏度剂：考虑方法的专属性和灵敏度p 干扰：辅料、共存成分干扰：辅料、共存成分p 样品前处理：样品前处理：l 过滤、提取、色谱分离；或改用选择性更强的方法过滤、提取、色谱分离；或改用选择性更强的方法l 小剂量还需浓缩或改用灵敏度较高的方法小剂量还需浓缩或改用灵敏度较高的方法l 缓释制剂用超声等方法使药物完全释放缓释制剂用超声等方法使药物完全释放p 辅料或共存成分无干扰：直接测定（药物的性质）辅料或共存成分无干扰：直接测定（药物的性质）（四）药物制剂含量测定的特点（四）药物制剂含

8、量测定的特点 原料药：侧重方法的准确度和专属性。原料药：侧重方法的准确度和专属性。 定量分析首选容量分析法。定量分析首选容量分析法。p 片片 剂：剂：10/20片，研细，称取部分细粉测定片，研细，称取部分细粉测定p 注射剂：注射剂：10/20支，混合后取部分测定支，混合后取部分测定 取样要求有代表性取样要求有代表性 示例：示例：p469p 硫酸沙丁胺醇及其制剂含量测定硫酸沙丁胺醇及其制剂含量测定p 硫酸阿托品及其制剂含量测定硫酸阿托品及其制剂含量测定第二节第二节 片剂分析片剂分析 定义：药物与适宜的辅料混匀压制而成的圆片状或异定义：药物与适宜的辅料混匀压制而成的圆片状或异 形片状的固体制剂。形

9、片状的固体制剂。 常见的剂型常见的剂型p 口服普通片口服普通片p 含片、咀嚼片、阴道泡腾片、缓释片、控释片与肠溶片含片、咀嚼片、阴道泡腾片、缓释片、控释片与肠溶片 项目：附录项目：附录“制剂通则制剂通则”片剂项下的规定片剂项下的规定p 性状、鉴别、检查、含量测定性状、鉴别、检查、含量测定二、鉴别试验二、鉴别试验p 采用过滤、离心、提取等操作排除辅料干扰采用过滤、离心、提取等操作排除辅料干扰p 依据药物的性质，参考原料药的鉴别方法，从化学法、光谱依据药物的性质，参考原料药的鉴别方法，从化学法、光谱 法、色谱法及其他方法中选用法、色谱法及其他方法中选用24种不同原理的分析方法，组种不同原理的分析方

10、法，组 成一组鉴别试验。成一组鉴别试验。一、性状一、性状p 外观完整光洁，色泽均匀。外观完整光洁，色泽均匀。p 符合正文各品种项下的性状描述符合正文各品种项下的性状描述三、剂型检查三、剂型检查 常规检查项目：重量差异和崩解时限常规检查项目：重量差异和崩解时限 主药与辅料难以混合均匀：主药与辅料难以混合均匀：含量均匀度含量均匀度和崩解时限和崩解时限 主药水溶性差：重量差异和主药水溶性差：重量差异和溶出度溶出度 计量单位均匀度：重量差异与含量均匀度的统称，指多个计计量单位均匀度：重量差异与含量均匀度的统称，指多个计 量单位中所含药物的均匀程度量单位中所含药物的均匀程度检查原因：片剂生产过程中，由于

11、颗粒的均匀度、流动性以检查原因：片剂生产过程中，由于颗粒的均匀度、流动性以及生产设备等原因，都会引起片剂重量的差异，从而引起各及生产设备等原因，都会引起片剂重量的差异，从而引起各片间药物含量的差异；当主药与片剂辅料难以混合均匀时，片间药物含量的差异；当主药与片剂辅料难以混合均匀时，片重差异不能准确反映片剂中主药含量的均匀程度，应以含片重差异不能准确反映片剂中主药含量的均匀程度，应以含量均匀度来检查。量均匀度来检查。（一）重量差异与含量均匀度（一）重量差异与含量均匀度 重量差异：按规定称量方法测得片剂每片的重量与平均片重重量差异：按规定称量方法测得片剂每片的重量与平均片重之间的差异程度。之间的差

12、异程度。 含量均匀度：指小剂量或单剂量的固体制剂、半固体制剂含量均匀度：指小剂量或单剂量的固体制剂、半固体制剂和非均相液体制剂等每片（个）含量符合标示量的程度。和非均相液体制剂等每片（个）含量符合标示量的程度。 （1）取供试品）取供试品20片，精密称定总重量，求得平均片重；片，精密称定总重量，求得平均片重； （2）分别准确称定每片的重量；）分别准确称定每片的重量； （3）计算每片片重与平均片重差异的百分率。）计算每片片重与平均片重差异的百分率。p 2010ChP重量差异检查方法重量差异检查方法l 重量差异限度重量差异限度 平均重量平均重量 差异限度差异限度 0.30.3g g以下以下 7.5%

13、7.5% 0.3 0.3g g或或0.30.3g g以上以上 5%5%| 超出重量差异限度的药片不得多于超出重量差异限度的药片不得多于2 2片，并不得有一片超出片，并不得有一片超出 限度限度1 1倍。倍。l 糖衣片和肠溶衣片的检查：需在包衣前检查片芯的重量差异，糖衣片和肠溶衣片的检查：需在包衣前检查片芯的重量差异，符合规定后方可包衣，包衣后不再检查重量差异。符合规定后方可包衣，包衣后不再检查重量差异。l 检查对象：片剂、胶囊剂、注射用无菌粉末（标示量不大于检查对象：片剂、胶囊剂、注射用无菌粉末（标示量不大于25mg或主药含量小于或主药含量小于25%）；）；l 凡检查含量均匀度的制剂不再检查重量

14、差异凡检查含量均匀度的制剂不再检查重量差异p 2010ChP含量均匀度检查方法含量均匀度检查方法l 检查方法：检查方法： 取供试品取供试品10片片, 分别测定每片以标示量为分别测定每片以标示量为100的相对含量的相对含量X 求其均值求其均值X 标准差标准差S A = 100- X l 结果判断结果判断A+S15.0不符合规定不符合规定符合规定符合规定A+1.80S15.0复复试试A+1.45S15.0不符合规定不符合规定A+1.45S15.0符合规定符合规定 A+1.80S15.0且且A+S 15.0另取另取20片复试片复试SAl 检查方法：取供试品检查方法：取供试品10片，分别测定每片含量，

15、与平均含量片，分别测定每片含量，与平均含量 相比，不得超过一定限度。相比，不得超过一定限度。p USP、Ph. Eur含量均匀度的检查方法含量均匀度的检查方法l EP、USP和和JP的规定：的规定：p470含量均匀度应符合各品种项下规定含量均匀度应符合各品种项下规定限度值：限度值：15%、 20%判断式中的系数：不变判断式中的系数：不变l 结果判断结果判断 崩解时限：口服固体制剂在规定的时间内，于规定条件下全部崩解时限：口服固体制剂在规定的时间内，于规定条件下全部崩解溶散或成碎粒，除不溶性包衣材料或破碎的胶囊壳外，全部崩解溶散或成碎粒，除不溶性包衣材料或破碎的胶囊壳外，全部通过筛网。如有少量不

16、能通过筛网，应已软化或轻质上漂且无硬通过筛网。如有少量不能通过筛网，应已软化或轻质上漂且无硬心。心。 溶出度：在规定条件下药物从片剂等固体制剂在规定溶剂中溶溶出度：在规定条件下药物从片剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速率和程度。出的速率和程度。 检查原因：片剂在口服后在胃肠道中首先要经过崩解，药物才检查原因：片剂在口服后在胃肠道中首先要经过崩解，药物才能被释放、吸收；能被释放、吸收；难溶性的药物难溶性的药物，崩解后药物的溶出直接影响其，崩解后药物的溶出直接影响其吸收吸收 ，其溶出度与药物的吸收呈正相关，所以用溶出度代替，其溶出度与药物的吸收呈正相关，所以用溶出度代替 。 凡检查溶出度的制剂，不再

17、检查崩解时限凡检查溶出度的制剂，不再检查崩解时限 （二）崩解时限与溶出度（二）崩解时限与溶出度l 检查用仪器：升降式崩解仪检查用仪器：升降式崩解仪加热控温装置加热控温装置烧杯烧杯金属支架金属支架吊篮吊篮p ChP2010片剂崩解时限检查法片剂崩解时限检查法l 测定条件测定条件371oC的水的水移动距离移动距离552mm往返频率往返频率3032/min水面下水面下15mm距烧杯底部距烧杯底部25mm方法：方法：取供试品取供试品6片，分别置于升降式崩解仪吊篮中的玻璃管中，片，分别置于升降式崩解仪吊篮中的玻璃管中， 启动崩解仪按规定方法进行检查，各片应在规定时间内全部启动崩解仪按规定方法进行检查，各

18、片应在规定时间内全部 崩解。如有崩解。如有1片不能崩解，应另取片不能崩解，应另取6片进行片进行复试复试，均应符合规，均应符合规 定。定。l 测定方法与要求测定方法与要求片剂崩解时限检查的具体的规定：片剂崩解时限检查的具体的规定：p472表表18-4l 检查对象：难溶性药物（普通片剂、胶囊剂等）检查对象：难溶性药物（普通片剂、胶囊剂等）l 测定方法测定方法：（：（1）篮法）篮法 （2）浆法）浆法 （3）小杯法）小杯法pChP2010溶出度测定法溶出度测定法l 溶出度仪溶出度仪l 篮法篮法测定方法测定方法：p472（1）6片中，每片的溶出量按标示量计算，均不低于规定限度片中，每片的溶出量按标示量计

19、算，均不低于规定限度（Q）（2）6片中，片中，12片低于片低于Q，但不低于，但不低于Q-10%，且平均溶出度不低，且平均溶出度不低于于Q（3）6片中，片中，12片低于片低于Q，其中仅一片低于，其中仅一片低于Q-10%，但不低于，但不低于Q-20%，且平均溶出度不低于，且平均溶出度不低于Q，应另取，应另取6片复试。片复试。12片中仅片中仅有有13片低于片低于Q，其中仅有，其中仅有1片低于片低于Q-10%，但不低于，但不低于Q-20%，且平均溶出度不低于且平均溶出度不低于Q。 判定方法判定方法结果判定结果判定：符合上述条件之一者，可判为合格：符合上述条件之一者，可判为合格| 注意：注意：10%、2

20、0%是指相对于标示量的百分含量是指相对于标示量的百分含量l 浆法浆法l 小杯法小杯法适用于含量较低的片剂溶出度适用于含量较低的片剂溶出度l 定义：药物从缓释制剂、控释制剂以及透皮贴剂等在规定溶定义：药物从缓释制剂、控释制剂以及透皮贴剂等在规定溶剂中释放的速率和程度。剂中释放的速率和程度。 l 凡检查释放度的制剂不再检查崩解时限凡检查释放度的制剂不再检查崩解时限l 测定仪器方法同溶出度测定法测定仪器方法同溶出度测定法l 取样时间点：至少取样时间点：至少3个个（1）考察药物是否有突释）考察药物是否有突释（2）确定释药特性）确定释药特性（3）考察释药是否完全（）考察释药是否完全（75%）l 取样后及

21、时补充所耗溶剂取样后及时补充所耗溶剂p ChP2010释放度测定法释放度测定法第一法第一法：缓释制剂、控释制剂，：缓释制剂、控释制剂，p473第二法第二法：肠溶制剂：肠溶制剂第三法第三法：透皮贴剂：透皮贴剂l 测定方法测定方法第三节第三节 注射剂分析注射剂分析注射剂：药物与适宜的溶剂（或分散介质）注射剂：药物与适宜的溶剂（或分散介质）及附加剂制成的供注入体内的溶液、乳状及附加剂制成的供注入体内的溶液、乳状液或混悬液及供临用前配制或稀释成溶液液或混悬液及供临用前配制或稀释成溶液混混悬液的粉末或浓溶液的无菌制剂。混混悬液的粉末或浓溶液的无菌制剂。剂型：注射液（剂型：注射液（溶液型溶液型、乳状液型或

22、混悬、乳状液型或混悬液型）、注射用无菌粉末、注射用浓溶液液型）、注射用无菌粉末、注射用浓溶液ChP2010“制剂通则制剂通则”注射液项下规定：溶液型注注射液项下规定：溶液型注射液应澄明。此外，还应符合正文各品种项下的性射液应澄明。此外，还应符合正文各品种项下的性状描述。状描述。一、性状一、性状 鉴别溶液型注射液时，辅料一般不干扰药物鉴别，鉴别溶液型注射液时，辅料一般不干扰药物鉴别，依据药物的性质，参考原料药的鉴别方法，用化学法、依据药物的性质，参考原料药的鉴别方法，用化学法、光谱法、色谱法等不同原理的分析方法，组成一组鉴光谱法、色谱法等不同原理的分析方法，组成一组鉴别试验（别试验（p476）。

23、）。二、鉴别试验二、鉴别试验三、剂型检查及安全性检查三、剂型检查及安全性检查注射剂常规检查项目：注射剂常规检查项目：1 1、装量、装量2 2、渗透压摩尔浓度、渗透压摩尔浓度3 3、可见异物、可见异物4 4、不溶性微粒、不溶性微粒5 5、无菌、无菌6 6、细菌内毒素与热源、细菌内毒素与热源（一）装量（一）装量p 取样量：取样量：2ml，5支支 p 2ml，3支支p 测定方法：体积测量测定方法：体积测量p 判定标准：每支装量均不得少于标示量判定标准：每支装量均不得少于标示量p 装量注意事项：装量注意事项： （1）开启时避免损失，室温下检视）开启时避免损失，室温下检视 （2）量具的大小应使待测体积至

24、少占其额定体积的）量具的大小应使待测体积至少占其额定体积的40 （3）油溶液或混悬液，加温摇匀，室温检视）油溶液或混悬液，加温摇匀，室温检视（二）渗透压摩尔浓度（二）渗透压摩尔浓度p 什么是渗透，渗透压（什么是渗透，渗透压（p476）？）？p 检查对象：凡处方中添加了渗透压调节剂的制剂检查对象：凡处方中添加了渗透压调节剂的制剂p 方法：测量溶液的冰点下降来间接测定方法：测量溶液的冰点下降来间接测定p 定义：存在于注射液、滴眼液中，在规定条件下目定义：存在于注射液、滴眼液中，在规定条件下目视可以观察到的不溶性物质，粒度或长度通常大于视可以观察到的不溶性物质，粒度或长度通常大于50um。p 检查意

25、义：不溶性微粒可引起静脉炎、过敏反应，检查意义：不溶性微粒可引起静脉炎、过敏反应，堵塞毛细血管堵塞毛细血管p 检查方法：灯检法、光散射法、检查方法：灯检法、光散射法、（三）可见异物（三）可见异物（1）灯检法（灯检法（p477）（2）光散射法（光散射法（p477488） 为什么？可见异物检查，只能检出为什么？可见异物检查，只能检出50um以上微粒以上微粒 在可见异物检查符合规定后，检查溶液型静脉用注射液中不在可见异物检查符合规定后，检查溶液型静脉用注射液中不 溶性微粒的大小及数量。溶性微粒的大小及数量。 静脉用注射剂静脉用注射剂-严格控制更小的微粒严格控制更小的微粒 检查方法：光阻法、显微计数法

26、检查方法：光阻法、显微计数法（四）不溶性微粒（四）不溶性微粒 光阻法光阻法l 方法方法 （1）狭小检测区域）狭小检测区域 （2）微粒阻挡入射光）微粒阻挡入射光 （3）信号强度变化）信号强度变化 （4）信号频度变化）信号频度变化 显微计数法显微计数法l 判定依据判定依据 （1）标示量）标示量100ml以上：每以上：每1ml中中10um以上微粒不超过以上微粒不超过12 个，个，25um以上微粒不超过以上微粒不超过2个；个； （2）标示量）标示量100ml以下：每个供试容器中以下：每个供试容器中10um以上微粒不以上微粒不 超过超过3000个，个，25um以上微粒不超过以上微粒不超过300个。个。l

27、 方法方法（1）抽滤、洗涤）抽滤、洗涤（2）干燥）干燥（3）显微测量（）显微测量（100）p 无菌检查的实验条件：环境洁净度无菌检查的实验条件：环境洁净度10000(B)级下级下的局部洁净度的局部洁净度100(A)级的单向流空气区域内进行，全级的单向流空气区域内进行，全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染。检查过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染。检查中应取相应溶剂和稀释剂同法操作，作为阴性对照。中应取相应溶剂和稀释剂同法操作，作为阴性对照。（五）无菌（五）无菌p 检查供试品中是否含有活菌检查供试品中是否含有活菌p 检查方法：薄膜过滤法和直接接种法，都由阳性检查方法：薄膜过滤法和直接接种法

28、，都由阳性对照、阴性对照和供试品三部分组成。对照、阴性对照和供试品三部分组成。p 无菌实验室无菌实验室 （1）直接接种法直接接种法l 好氧菌、厌氧菌：硫乙醇酸盐液体培养基好氧菌、厌氧菌：硫乙醇酸盐液体培养基l 真菌：改良马丁培养基真菌：改良马丁培养基l 接种后培养接种后培养14天天l 阳性对照阳性对照l 阴性对照阴性对照l方法验证：检验量的供试品在检验条件下无抑菌作用方法验证：检验量的供试品在检验条件下无抑菌作用（2）薄膜过滤法薄膜过滤法（六）（六）细菌内毒素和细菌内毒素和热原热原p 细菌内毒素：革兰氏阴性菌细菌细胞壁的脂多糖，有致热作细菌内毒素：革兰氏阴性菌细菌细胞壁的脂多糖，有致热作用。用

29、内毒素单位（用。用内毒素单位（EU）表示。）表示。p 热原：药品中含有的能引起体温升高的杂质热原：药品中含有的能引起体温升高的杂质p 热原检查和细菌内毒素检查择一即可。热原检查和细菌内毒素检查择一即可。p ChP规定：除另有规定外，静脉注射剂按各品种项下的规定，规定：除另有规定外，静脉注射剂按各品种项下的规定，照细菌内毒素或热原检查法检查，应符合规定照细菌内毒素或热原检查法检查，应符合规定p 检查原理：鲎试剂与细菌内毒素的凝集反应。检查原理：鲎试剂与细菌内毒素的凝集反应。 细菌内毒素细菌内毒素p 来源：当细菌死亡或自溶后便会释放出内毒素。因此，细菌内来源：当细菌死亡或自溶后便会释放出内毒素。因

30、此，细菌内毒素广泛存在于自然界中。如自来水中内毒素的含量为毒素广泛存在于自然界中。如自来水中内毒素的含量为1100 EU/ml。p 鲎试剂：从鲎的蓝色血液中提取变形细胞溶解物，鲎试剂：从鲎的蓝色血液中提取变形细胞溶解物，经低温冷冻干燥而成的生物试剂。目前国际上销售经低温冷冻干燥而成的生物试剂。目前国际上销售的鲎试剂有两种，一种称美洲鲎试剂；另一种称东的鲎试剂有两种，一种称美洲鲎试剂；另一种称东方鲎鲎试剂，两者有相同的功效。方鲎鲎试剂，两者有相同的功效。 （1）凝胶法凝胶法 样品管样品管 阳性对照管阳性对照管 阴性对照管阴性对照管 样品阳性对照管样品阳性对照管p 检查方法检查方法浊度法浊度法：终

31、点浊度法、动态浊度法：终点浊度法、动态浊度法显色基质法显色基质法：凝固酶催化底物：凝固酶催化底物（2）光度测定法光度测定法|可使用其中任何一种方法进行试验，当测定结果有争议时，除另可使用其中任何一种方法进行试验，当测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶法结果为准。有规定外，以凝胶法结果为准。 p定义：药品中含有的能引起体温升高的杂质定义：药品中含有的能引起体温升高的杂质p分类：细菌性热原、内源性高分子热原、内源性低分子热分类：细菌性热原、内源性高分子热原、内源性低分子热原及化学热原等。原及化学热原等。p主要：细菌性热原，是某些细菌的代谢产物、细菌尸体及主要：细菌性热原，是某些细菌的代谢产物、细

32、菌尸体及内毒素。内毒素。p热原反应：注入人体的注射剂中含有热原量达热原反应：注入人体的注射剂中含有热原量达1ug/kg就可引就可引起不良反应，发热反应通常在注入起不良反应，发热反应通常在注入1小时后出现，可使人体小时后出现，可使人体产生发冷、寒颤、发热、出汗、恶心、呕吐等症状，有时体产生发冷、寒颤、发热、出汗、恶心、呕吐等症状，有时体温可升至温可升至40以上，严重者甚至昏迷、虚脱，如不及时抢救，以上，严重者甚至昏迷、虚脱，如不及时抢救，可危及生命。可危及生命。 热原热原l家兔法家兔法 （1）3只家兔只家兔 （2）测定正常体温）测定正常体温 （3）耳静脉注射）耳静脉注射 （4）每隔）每隔30mi

33、n测定体温，测定体温，6次次 （5）最高体温）最高体温-正常体温正常体温 p热原检查方法热原检查方法（1）体温升高均低于体温升高均低于0.6oC，且体温升高总和低于，且体温升高总和低于 1.4oC（2）复试（另取复试（另取5只），其中体温升高超过只），其中体温升高超过0.6oC的的 不超过一只，不超过一只，8只家兔体温升高总和不超过只家兔体温升高总和不超过3.5oC p热原判定方法热原判定方法 片剂片剂四、片剂和注射剂的含量测定四、片剂和注射剂的含量测定p 片剂中常见附加剂片剂中常见附加剂l 糖类糖类l 硬脂酸镁硬脂酸镁l 滑石粉滑石粉l 碳酸钙碳酸钙l 羧甲基纤维素等羧甲基纤维素等（一）糖类

34、的干扰及排除（一）糖类的干扰及排除p糖类（淀粉、糊精、蔗糖、乳糖等）糖类（淀粉、糊精、蔗糖、乳糖等）p还原性：乳糖还原性：乳糖 葡萄糖葡萄糖淀粉、糊精、蔗糖淀粉、糊精、蔗糖p干扰氧化还原滴定干扰氧化还原滴定 p不能用高锰酸钾、溴酸钾等强氧化性滴定剂不能用高锰酸钾、溴酸钾等强氧化性滴定剂p同时，用空白辅料进行阴性对照试验，若阴性对照同时，用空白辅料进行阴性对照试验，若阴性对照消耗滴定剂，须改用其它方法测定，或使用氧化性消耗滴定剂，须改用其它方法测定，或使用氧化性较弱的滴定剂较弱的滴定剂 p示例示例p474（二）硬脂酸镁的干扰及排除（二）硬脂酸镁的干扰及排除p 干扰：在络合滴定中干扰：在络合滴定中

35、Mg2+也能与也能与 EDTA-2Na 发生络合反应，发生络合反应，使含量偏高。使含量偏高。p排除方法排除方法(lgKMY=8.64, pH=10)滴定滴定Al3+,Ca2+因因lgKMY(Al3+,Ca2+ )远大于远大于lgKMY(Mg2+) ，故不考虑。故不考虑。 2) 改在改在pH6-7条件下，并加掩蔽剂酒石酸，草酸，硼酸。条件下，并加掩蔽剂酒石酸，草酸，硼酸。1. Mg2+对络合滴定的干扰对络合滴定的干扰2. 硬脂酸根离子对非水滴定法的干扰硬脂酸根离子对非水滴定法的干扰p 干扰：硬脂酸根离子在冰醋酸中具碱性，消耗干扰：硬脂酸根离子在冰醋酸中具碱性，消耗HClO4，使，使含量偏高。含量

36、偏高。p 排除：排除： 1）主药含量高，硬脂酸镁含量低，可忽略不计主药含量高，硬脂酸镁含量低，可忽略不计 2）脂溶性药物，用适当有机溶剂脂溶性药物，用适当有机溶剂(氯仿，丙酮，乙醚氯仿，丙酮，乙醚)提取药提取药 物，排除干扰后，再用非水溶液滴定法（物，排除干扰后，再用非水溶液滴定法（p475例例11） 3）改用其它方法改用其它方法 注射剂注射剂p 注射剂中常见溶剂和附加剂注射剂中常见溶剂和附加剂l 溶剂溶剂：注射用水、油、其它非水溶剂：注射用水、油、其它非水溶剂l渗透压调节剂（渗透压调节剂（NaCl)l pH调节剂调节剂l 增溶剂增溶剂(吐温吐温80）l 乳化剂乳化剂l 抗氧剂抗氧剂（亚硫酸钠

37、，（亚硫酸钠， Vc等）等）l 抑菌剂（三氯叔丁醇，苯酚等）抑菌剂（三氯叔丁醇，苯酚等）l 麻醉剂等麻醉剂等（一）溶剂水的干扰与排除（一）溶剂水的干扰与排除p 干扰：非水溶液滴定法干扰：非水溶液滴定法p 排除排除l 碱性药物：碱化、有机溶剂提取，挥干有机溶碱性药物：碱化、有机溶剂提取，挥干有机溶 剂，测定剂，测定（二）溶剂油的干扰及排除（二）溶剂油的干扰及排除p 植物油：脂溶性药物注射液的溶剂植物油：脂溶性药物注射液的溶剂p 干扰：水为溶剂的分析方法（容量法、干扰：水为溶剂的分析方法（容量法、RP-HPLC）和其它分析）和其它分析 方法方法p 排除排除1）有机溶剂稀释法：主药含量高（有机溶剂稀

38、释法：主药含量高（p485例例14）2）萃取法：用适当的溶剂提取药物，再测定（萃取法：用适当的溶剂提取药物，再测定（p485例例15）3）柱色谱法：选用适宜的固定相和流动相，通过柱色谱分柱色谱法：选用适宜的固定相和流动相，通过柱色谱分 离，再测定（离，再测定（p486例例16）（三）抗氧剂的干扰及排除（三）抗氧剂的干扰及排除p 还原性药物的注射剂，加入抗氧剂增加稳定性。还原性药物的注射剂，加入抗氧剂增加稳定性。p 常用的抗氧剂：常用的抗氧剂：l 亚硫酸钠亚硫酸钠l 亚硫酸氢钠亚硫酸氢钠l 焦亚硫酸钠焦亚硫酸钠l 硫代硫酸钠硫代硫酸钠l 维生素维生素C等等p 干扰：抗氧剂还原性强，干扰氧化还原滴

39、定法干扰：抗氧剂还原性强，干扰氧化还原滴定法p 排除方法排除方法（1）加入掩蔽剂）加入掩蔽剂（p487例例17）：）：l 抗氧剂：亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠等抗氧剂：亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠等l 掩蔽剂：甲醛或丙酮掩蔽剂：甲醛或丙酮（2）加酸分解）加酸分解l 抗氧剂：亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠等抗氧剂：亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠等l 示例：示例：p487例例18（3）加弱氧化剂氧化）加弱氧化剂氧化OHSONaOHSONa2422232NoImageOHNaHSOOHNaHSO24223l 抗氧剂：亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠抗氧剂：亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠

40、l 排除：利用主药与抗氧剂还原性的差异，加入弱氧排除：利用主药与抗氧剂还原性的差异，加入弱氧 化剂，选择性的氧化抗氧化剂（不氧化被测药物、化剂，选择性的氧化抗氧化剂（不氧化被测药物、 不消耗滴定液）不消耗滴定液）l 弱氧化剂：双氧水、硝酸弱氧化剂：双氧水、硝酸224233222NOOHSONaHNOSONa242242334242NOSOHOHSONaHNONaHSO( (一一) ) 片剂含量计算公式片剂含量计算公式 含量测定应用示例含量测定应用示例标示量标示量% =测得每片量测得每片量(g/片）片） 标示量标示量(g/片）片）100%1 容量分析法结果计算容量分析法结果计算标示量标示量% =

41、VTF D 平均片重平均片重 W 标示标示 量量100%F=实际摩尔浓度实际摩尔浓度规定摩尔浓度规定摩尔浓度 含量测定应用示例含量测定应用示例例例1 烟酸片含量测定（中国药典烟酸片含量测定（中国药典2010年版）年版） 取本品取本品10片片,精密称定为精密称定为3.5840g,研细研细,精密称取精密称取0.3729g,置置100 mL锥形瓶中锥形瓶中,置水浴加热溶解后置水浴加热溶解后,放冷放冷.加酚酞指示剂加酚酞指示剂3滴滴,用氢氧化钠滴定液（用氢氧化钠滴定液（0.1005mol/L),滴定至粉红色滴定至粉红色,消耗消耗25.02 mL.每每1mL氢氧化钠滴定液氢氧化钠滴定液(0.1mol/L

42、)相当相当12.31mg的的烟酸烟酸. 求供试品中烟酸的标示百分含量（求供试品中烟酸的标示百分含量（标示量标示量0.3g/片片） 含量测定应用示例含量测定应用示例标示量标示量%=V T F 平均片重平均片重W 标示量标示量100 %=25.02 12.31/1000 0.1005/0.10.35840.3729 0.3= 99.17%100 % 含量测定应用示例含量测定应用示例（1）取样）取样 20片片 总重总重2.4220g,研细研细 称取称取0.2560g（2）溶液制备）溶液制备 100 mL水定容水定容, 滤过取续滤液滤过取续滤液25mL ,加水加水50mL,盐酸盐酸20mL与甲基橙与甲

43、基橙1滴滴（3）测定）测定 溴酸钾滴定液（溴酸钾滴定液（0.01635mol/L)滴定至粉红色滴定至粉红色消失体积为消失体积为16.10mL,每每mL溴酸钾滴定液溴酸钾滴定液(0.01667mol/L)相当于相当于3.429mg异烟肼异烟肼. （0.1g/片）片） 含量测定应用示例含量测定应用示例例例2 异烟肼片含量测定异烟肼片含量测定标示量标示量%=V T F 平均片重平均片重W 标示量标示量100%=16.10 0.003429 0.01635/0.01667 4 0.12110.2560 0.1 = 102.5%100% 含量测定应用示例含量测定应用示例2 分光光度法分光光度法1)百分吸

44、光系数法百分吸光系数法E1%1cmA= CL标示量标示量% = D 平均片重平均片重W 标示量标示量100%E1%1cmA1100L 含量测定应用示例含量测定应用示例例例1 VB2片含量测定片含量测定（中国药典（中国药典2010年版）年版）取取20片称重片称重0.2408g（标示量（标示量10mg/片片），研细，精），研细，精密称取密称取0.0110g，置，置1000mL量瓶，加冰醋酸量瓶，加冰醋酸5mL与与水水100mL，加热溶解后加，加热溶解后加 4%NaOH 30mL，用水，用水定容到刻度，照分光光度法，在定容到刻度，照分光光度法，在444nm测吸光度为测吸光度为0.312。 =323，

45、计算标示量，计算标示量%.E1%1cm 含量测定应用示例含量测定应用示例标示量标示量% = 10000.01200.0110 0.01100%3230.3121100= 105.37标示量标示量% = D 平均片重平均片重W 标示量标示量100%E1%1cmA1100L 含量测定应用示例含量测定应用示例例例2 盐酸布桂秦片含量测定盐酸布桂秦片含量测定 取取20片称重片称重0.3002g （标示量（标示量30mg/片片），研细），研细,精精密称取密称取0.0153g，置，置100mL量瓶，加量瓶，加0.1mol/L盐酸溶解盐酸溶解并稀释到刻度，精密量取滤液并稀释到刻度，精密量取滤液2.0mL，置

46、，置100mL量瓶，量瓶， 0.1mol/L盐酸稀释到刻度盐酸稀释到刻度, 照分光光度法，在照分光光度法，在252nm测测吸光度为吸光度为0.412 =671。 计算标示量计算标示量%。E1%1cm 含量测定应用示例含量测定应用示例标示量标示量% = 50000.01500.0153 0.03100%6710.4121100= 100.31100标示量标示量% = D 平均片重平均片重W 标示量标示量100%E1%1cmAL 含量测定应用示例含量测定应用示例2)对照品比较法对照品比较法 是在同样条件下分别配置对照品溶液与样品溶液在选定是在同样条件下分别配置对照品溶液与样品溶液在选定波长处分别测

47、定吸收度波长处分别测定吸收度.E1%1cmA 对对= C对对L根据根据A= CLE1%1cmE1%1cmA样样 = C样样LC对对 C样样 A样样 A 对对=因此因此 C对对 A样样A 对对=则则C样样 含量测定应用示例含量测定应用示例A样样 C对对 D 平均片重平均片重标示量标示量% =A 对对 W 标示量标示量100% 含量测定应用示例含量测定应用示例 3 高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC) 是在同样条件下分别配置对照品溶液与样品溶液在选定是在同样条件下分别配置对照品溶液与样品溶液在选定波长处分别测定峰面积波长处分别测定峰面积.C对对 C样样 A样样A 对对=根据根据 D 平均片重平

48、均片重标示量标示量% =A 对对 W 标示量标示量100%A样样C对对 C对对 A样样A 对对=则则C样样 含量测定应用示例含量测定应用示例(一一) 注射剂含量计算公式注射剂含量计算公式标示量标示量% =测得量测得量(g/mL） 标示量标示量(g/mL）100% 含量测定应用示例含量测定应用示例1 容量分析法结果计算容量分析法结果计算标示量标示量% = V T F D 标示量标示量(g/mL)100%VS 含量测定应用示例含量测定应用示例2 分光光度法分光光度法1) 百分吸光系数法百分吸光系数法E1%1cm标示量标示量% = A D E1% 100 VS 标示量标示量100%1cm 含量测定应

49、用示例含量测定应用示例2) 对照品比较法对照品比较法A样样 C对对 D标示量标示量% =A 对对 Vs 标示量标示量100% 含量测定应用示例含量测定应用示例例：某注射液含量测定方法例：某注射液含量测定方法已知：被测物的已知：被测物的 =481 注射液标示量：注射液标示量：0.5g/20ml D=200250/5=10000求：标示量求：标示量%E1%1cm 含量测定应用示例含量测定应用示例标示量标示量% = 100004811003 0.5/20100%0.376=104.2标示量标示量% = A D E1% 100 VS 标示量标示量100%1cm 含量测定应用示例含量测定应用示例 复方制剂分析的特点复方制剂分析的特点第四节第四节 复方制剂分析复方制剂分析p 复方制剂是含有两种及两种以上的有效成分的药物制剂；复方制剂是含有两种及两种以上的有效成分的药物制剂；p 分析方法比原料药、单方制剂更为复杂，不仅附加成分或