蛋白质工程的崛起郑

1、何谓蛋白质工程？何谓蛋白质工程？ 1983年美国科学家年美国科学家Ulmer首先首先提出蛋白质工程，它是指按照特提出蛋白质工程，它是指按照特定的需要，对蛋白质进行分子设定的需要，对蛋白质进行分子设计和改造的工程。自此以后，蛋计和改造的工程。自此以后，蛋白质工程迅速发展，已成为生物白质工程迅速发展，已成为生物工程的重要组成部分工程的重要组成部分。一、蛋白质工程崛起的缘由一、蛋白质工程崛起的缘由阅读阅读P26. 思考思考:1、基因工程的实质？、基因工程的实质？2、基因工程的不足？、基因工程的不足？一、蛋白质工程崛起的缘由一、蛋白质工程崛起的缘由1、基因工程的应用、基因工程的应用（1）基因工程的实质

2、：）基因工程的实质：将一种生物的基因转移到另一种生物将一种生物的基因转移到另一种生物体内，使后者产生本不能产生的蛋白体内，使后者产生本不能产生的蛋白质，进而表现出新的性状。质，进而表现出新的性状。在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。（2）基因工程的不足：）基因工程的不足： 天然蛋白质是生物在长期进化过程天然蛋白质是生物在长期进化过程中形成的，它们的结构和功能符合特定中形成的，它们的结构和功能符合特定物种生存的需要，却不一定完全符合人物种生存的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。类生产和生活的需要。2、天然蛋白质的不足、天然蛋白质的不足例如例如:

3、在已研究过的几千种酶中，只有极少在已研究过的几千种酶中，只有极少数可以应用于工业生产，绝大多数酶都不能应用数可以应用于工业生产，绝大多数酶都不能应用于工业生产，这些酶虽然在自然状态下有活性，于工业生产，这些酶虽然在自然状态下有活性，但在工业生产中没有活性或活性很低。这是因为但在工业生产中没有活性或活性很低。这是因为工业生产中每一步的反应体系中常常会有酸、碱工业生产中每一步的反应体系中常常会有酸、碱或有机溶剂存在，反应温度较高，在这种条件下，或有机溶剂存在，反应温度较高，在这种条件下，大多数酶会很快变性失活。提高蛋白质的稳定性大多数酶会很快变性失活。提高蛋白质的稳定性是工业生产中一个非常重要的课

4、题。是工业生产中一个非常重要的课题。满足人类生满足人类生产和生活的产和生活的需要需要例如：例如：改造改造干扰素（半胱氨酸）干扰素（半胱氨酸）体外很难保存体外很难保存干扰素（丝氨酸）干扰素（丝氨酸）体外可以保存半年体外可以保存半年玉米中赖氨酸含量比较低玉米中赖氨酸含量比较低天冬氨酸激酶天冬氨酸激酶（352352位的苏氨酸）位的苏氨酸）二氢吡啶二羧酸合成酶二氢吡啶二羧酸合成酶（104104位的天冬酰胺）位的天冬酰胺）天冬氨酸激酶天冬氨酸激酶（异亮氨酸）（异亮氨酸）二氢吡啶二羧酸合成酶二氢吡啶二羧酸合成酶（异亮氨酸）（异亮氨酸）玉米中赖氨酸含量可提高数倍玉米中赖氨酸含量可提高数倍改造改造改造改造 对

5、现有蛋白质进行改造对现有蛋白质进行改造,或或制造一种新的蛋白质制造一种新的蛋白质,以满足以满足人类生产和生活的需要。人类生产和生活的需要。3、蛋白质工程的目的、蛋白质工程的目的通过蛋白质工程来改造蛋白质通过蛋白质工程来改造蛋白质思考：思考：对天然蛋白质进行改造，你认为应该直接对蛋对天然蛋白质进行改造，你认为应该直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现？白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现？ 应该应该从对基因的操作来实现从对基因的操作来实现对天然蛋白质改对天然蛋白质改造，主要原因如下：造，主要原因如下：（1 1）任何一种天然蛋白质都是由基因编码的，）任何一种天然蛋白质都是由基

6、因编码的，改造了基因即对蛋白质进行了改造，而且改造了基因即对蛋白质进行了改造，而且改造过改造过的蛋白质可以遗传下去的蛋白质可以遗传下去。如果对蛋白质直接改造，。如果对蛋白质直接改造，即使改造成功，被改造过的蛋白质分子还是无法即使改造成功，被改造过的蛋白质分子还是无法遗传的。遗传的。（2 2）对基因进行改造比对蛋白质直接改造要）对基因进行改造比对蛋白质直接改造要容容易操作，难度要小得多易操作，难度要小得多。 二、蛋白质工程的基本原理二、蛋白质工程的基本原理 根据人们对蛋白质功能的特定需求，对根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白蛋白质的结构进行分子设计质的结构进行分子设计。 1、目标：、目标：2

7、、原理：、原理：二、蛋白质工程的基本原理二、蛋白质工程的基本原理 根据人们对蛋白质功能的特定需求，根据人们对蛋白质功能的特定需求，对对蛋白质的结构进行分子设计蛋白质的结构进行分子设计。 1、目标：、目标：2、原理：、原理：改造基因改造基因（基因修饰或基因合成）（基因修饰或基因合成）逆转录逆转录转录转录DNADNARNARNA翻译翻译蛋白质蛋白质复制复制复制复制天然蛋白质的合成天然蛋白质的合成遵循中心法则遵循中心法则转录转录DNADNARNARNA翻译翻译肽链肽链折叠折叠等等具有空间结具有空间结构的蛋白质构的蛋白质表达生物特有表达生物特有的功能或性状的功能或性状天然蛋白质的合成过程天然蛋白质的合

8、成过程遵循中心法则，并需经过高级空间结构的转变遵循中心法则，并需经过高级空间结构的转变预期预期功能功能DNA合成合成分子设计分子设计蛋白质蛋白质三维结构三维结构氨基酸序列氨基酸序列多肽链多肽链基因基因DNADNAmRNAmRNA生物生物功能功能转转录录翻翻译译折折叠叠蛋白质工程流程图蛋白质工程流程图中心法则中心法则蛋白质合成的过程是按照中心法则进行的。蛋白质合成的过程是按照中心法则进行的。而蛋白质工程的过程却与之相反。而蛋白质工程的过程却与之相反。. 途径途径:预期的蛋白质功能预期的蛋白质功能设计预期的蛋白质结构设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸

9、序列找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）（基因）讨论：讨论：1、怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸、怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列？序列？ 请把相应的碱基序列写出来。请把相应的碱基序列写出来。 讨论：讨论：某多肽链的一段氨基酸序列是：某多肽链的一段氨基酸序列是：-丙氨酸丙氨酸-色氨酸色氨酸-赖氨酸赖氨酸-甲硫氨酸甲硫氨酸-苯丙氨酸苯丙氨酸-2.2.确定目的基因的碱基序列后，怎样才能合确定目的基因的碱基序列后，怎样才能合成或改造目的基因（成或改造目的基因（DNADNA）？）？ 确定目的基因的碱基序列后，就可以确定目的基因的碱基序列后，就可以根据人类的需要改造它，通过根据人类的需要改造它，通

10、过人工合成的人工合成的方法方法或可以通过基因的或可以通过基因的定点诱变定点诱变技术来改技术来改变后从基因文库中获取。变后从基因文库中获取。基因基因表达（转录和翻译）表达（转录和翻译）形成氨基酸序列的多肽链形成氨基酸序列的多肽链天然蛋白质的合成途径：天然蛋白质的合成途径：形成具有高级结构的蛋白质形成具有高级结构的蛋白质行使生物功能行使生物功能蛋白质工程的途径：蛋白质工程的途径：预期的蛋白质功能出发预期的蛋白质功能出发设计预期的蛋白质结构设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列推测应有的氨基酸序列找到相应的脱氧核苷酸序列酸找到相应的脱氧核苷酸序列酸4、基础：、基础：蛋白质的结构和功能蛋白质的结构和

11、功能总结：蛋白质工程的概念 蛋白质工程是指以蛋白质分子的_及其与_的关系作为基础，通过_或_，对现有蛋白质进行_，或制造一种_，以满足生产和生活的需求。结构规律生物功能基因修饰基因合成改造新的蛋白质五、蛋白质改造工程举例五、蛋白质改造工程举例1水蛭素改造水蛭素改造水蛭素是水蛭唾液腺分泌的凝血酶特异抑制剂，它水蛭素是水蛭唾液腺分泌的凝血酶特异抑制剂，它有多种变异体，由有多种变异体，由65或或66个氨基酸残基组成。水蛭素个氨基酸残基组成。水蛭素在临床上可作为抗栓药物用于治疗血栓疾病。为提高在临床上可作为抗栓药物用于治疗血栓疾病。为提高水蛭素活性，在综合各变异体结构特点的基础上提出水蛭素活性，在综合

12、各变异体结构特点的基础上提出改造水蛭素主要变异体改造水蛭素主要变异体HV2的设计方案，将的设计方案，将47位的位的Asn（天冬酰胺）变成（天冬酰胺）变成Lys（赖氨酸），使其与分子（赖氨酸），使其与分子内第内第4或第或第5位位Thr（苏氨酸）间形成氢键来帮助水蛭（苏氨酸）间形成氢键来帮助水蛭素素N端肽段的正确取向，从而提高抗凝血效率，试管端肽段的正确取向，从而提高抗凝血效率，试管试验活性提高了试验活性提高了4倍，在动物模型上检验抗血栓形成倍，在动物模型上检验抗血栓形成的效果，提高的效果，提高20倍。倍。2 2生长激素改造生长激素改造生长激素通过对它特异受体的作用促进细胞和机体的生生长激素通过对

13、它特异受体的作用促进细胞和机体的生长发育，然而它不仅可以结合生长激素受体，还可以结合长发育，然而它不仅可以结合生长激素受体，还可以结合许多种不同类型细胞的催乳激素受体，引发其他生理过程。许多种不同类型细胞的催乳激素受体，引发其他生理过程。在治疗过程中为减少副作用，需使人的重组生长激素只与在治疗过程中为减少副作用，需使人的重组生长激素只与生长激素受体结合，尽可能减少与其他激素受体的结合。生长激素受体结合，尽可能减少与其他激素受体的结合。经研究发现，二者受体结合区有一部分重叠，但并不完全经研究发现，二者受体结合区有一部分重叠，但并不完全相同，有可能通过改造加以区别。由于人的生长激素和催相同，有可能

14、通过改造加以区别。由于人的生长激素和催乳激素受体结合需要锌离子参与作用，而它与生长激素受乳激素受体结合需要锌离子参与作用，而它与生长激素受体结合则无需锌离子参与，于是考虑取代充当锌离子配基体结合则无需锌离子参与，于是考虑取代充当锌离子配基的氨基酸侧链，如第的氨基酸侧链，如第1818和第和第2121位位HisHis（组氨酸）和第（组氨酸）和第1717位位GluGlu（谷氨酸）。实验结果与预先设想一致，但要开发作（谷氨酸）。实验结果与预先设想一致，但要开发作为临床用药还有大量的工作要做。为临床用药还有大量的工作要做。3胰岛素改造胰岛素改造天然胰岛素制剂在储存中易形成二聚体和六聚天然胰岛素制剂在储存

15、中易形成二聚体和六聚体，延缓胰岛素从注射部位进入血液，从而延缓体，延缓胰岛素从注射部位进入血液，从而延缓了其降血糖作用，也增加了抗原性，这是胰岛素了其降血糖作用，也增加了抗原性，这是胰岛素B23-B28氨基酸残基结构所致。利用蛋白质工程氨基酸残基结构所致。利用蛋白质工程技术改变这些残基，则可降低其聚合作用，使胰技术改变这些残基，则可降低其聚合作用，使胰岛素快速起作用。该速效胰岛素已通过临床实验。岛素快速起作用。该速效胰岛素已通过临床实验。4治癌酶的改造治癌酶的改造 癌症的基因治疗分二个方面：药物作用于癌症的基因治疗分二个方面：药物作用于癌细胞，特异性地抑制或杀死癌细胞；药物保癌细胞，特异性地抑

16、制或杀死癌细胞；药物保护正常细胞免受化学药物的侵害，可以提高化护正常细胞免受化学药物的侵害，可以提高化学治疗的剂量。疱疹病毒（学治疗的剂量。疱疹病毒（HSV）胸腺嘧啶激）胸腺嘧啶激酶（酶（TK）可以催化胸腺嘧啶和其它结构类似）可以催化胸腺嘧啶和其它结构类似物磷酸化而使这些碱基物磷酸化而使这些碱基3-OH缺乏缺乏,从而阻断从而阻断DNA的合成，杀死癌细胞。的合成，杀死癌细胞。HSVTK催化能催化能力可以通过基因突变来提高。从大量的随机突力可以通过基因突变来提高。从大量的随机突变中进行筛选出一种酶变中进行筛选出一种酶,在酶活性部位附近有在酶活性部位附近有6个氨基酸被替换，催化能力个氨基酸被替换，催

17、化能力20倍以上。倍以上。蛋白质工程的发展很快，研究工作很多，以上仅蛋白质工程的发展很快，研究工作很多，以上仅介绍了几个例子。蛋白质工程除了用于改造天然蛋介绍了几个例子。蛋白质工程除了用于改造天然蛋白质或设计制造新的蛋白质外，其本身还是研究蛋白质或设计制造新的蛋白质外，其本身还是研究蛋白质结构功能的一种强有力的工具，它在解决生物白质结构功能的一种强有力的工具，它在解决生物理论方面所起的作用，可以和任何重大的生物研究理论方面所起的作用，可以和任何重大的生物研究方法相提并论。方法相提并论。六、蛋白质工程的进展和前景六、蛋白质工程的进展和前景蛋白质工程汇集了当代分子生物学等学科的蛋白质工程汇集了当代

18、分子生物学等学科的一些前沿领域的最新成就，它把核酸与蛋白质一些前沿领域的最新成就，它把核酸与蛋白质结合、蛋白质空间结构与生物功能结合起来研结合、蛋白质空间结构与生物功能结合起来研究。蛋白质工程将蛋白质与酶的研究推进到崭究。蛋白质工程将蛋白质与酶的研究推进到崭新的时代，为蛋白质和酶在工业、农业和医药新的时代，为蛋白质和酶在工业、农业和医药方面的应用开拓了诱人的前景。蛋白质工程开方面的应用开拓了诱人的前景。蛋白质工程开创了按照人类意愿改造、创造符合人类需要的创了按照人类意愿改造、创造符合人类需要的蛋白质的新时期。蛋白质的新时期。 1、 蛋白质工程中直接需要进行操作的对蛋白质工程中直接需要进行操作的

19、对象是（）象是（） 氨基酸结构氨基酸结构 B蛋白质空间结构蛋白质空间结构 C肽链结构肽链结构 D基因结构基因结构 练习：练习： 2、 下列关于蛋白质工程的说法错误的是（下列关于蛋白质工程的说法错误的是（） A蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构，蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构，使之更加符合人类的需要使之更加符合人类的需要 B蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构直接进行操作，定向改变分子的结构 C蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子的新型蛋白质分子 D蛋白质工程与基因工程

20、密不可分，又被称蛋白质工程与基因工程密不可分，又被称为第二代基因工程为第二代基因工程 3 3以下关于蛋白质工程的说法正确的是（以下关于蛋白质工程的说法正确的是（） A A、蛋白质工程以基因工程为基础、蛋白质工程以基因工程为基础 B B、蛋白质工程就是酶工程的延伸、蛋白质工程就是酶工程的延伸 C C、蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进行、蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进行改造改造 D D、蛋白质工程只能生产天然的蛋白质、蛋白质工程只能生产天然的蛋白质 4 4蛋白质工程的基本流程正确的是（）蛋白质工程的基本流程正确的是（） 蛋白质分子结构设计蛋白质分子结构设计DNA合成合成预期蛋预期蛋白质功能白质功

21、能根据氨基酸序列推出脱氧核苷酸根据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列序列 A B C D 5 5蛋白质工程是在基因工程基础上，延伸出蛋白质工程是在基因工程基础上，延伸出来的第二代基因工程，其结果产生的蛋白来的第二代基因工程，其结果产生的蛋白质是（）质是（） A氨基酸种类增多氨基酸种类增多 B氨基酸种类减少氨基酸种类减少 C仍为天然存在蛋白质仍为天然存在蛋白质 D可合成天然不存在蛋白质可合成天然不存在蛋白质对位训练对位训练1.1.下列有关基因工程技术的叙述下列有关基因工程技术的叙述, ,正确的是（正确的是（ ） A.A.重组重组DNADNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶技术所用的工具酶是限制酶、连接

22、酶 和载体和载体 B.B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸 序列序列 C.C.选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌 繁殖快繁殖快 D.D.只要目的基因进入受体细胞就能实现表达只要目的基因进入受体细胞就能实现表达C2.2.利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所 需要的产品。下列选项中能说明目的基因完成了需要的产品。下列选项中能说明目的基因完成了 在受体细胞中表达的是在受体细胞中表达的是（ ） A A棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因棉花二倍体细胞中检测到细菌

23、的抗虫基因 B B大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNAmRNA C C山羊乳腺细胞中检测到人生长激素山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNADNA序列序列 D D酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白D3.(3.(20092009浙江卷浙江卷,3,3) )下列关于基因工程的叙述下列关于基因工程的叙述, ,错误错误 的是的是 ( )( ) A. A.目的基因和受体细胞均可来自动、植物目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生或微生物物 B.B.限制性核酸内切酶和限制性核酸内切酶和DNADNA连接酶是两类常用的工连接酶是两类常用的工 具酶具酶 C

24、.C.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原 无生物活性无生物活性 D.D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNADNA的细胞的细胞 和促进目的基因的表达和促进目的基因的表达D4.(4.(20092009重庆卷重庆卷,2,2) )下表有关基因表达的选项中下表有关基因表达的选项中, ,不不 可能的是可能的是 ( )( )基因基因表达的的细胞表达的的细胞表达产物表达产物A A细菌抗虫蛋白基因细菌抗虫蛋白基因抗虫棉叶肉细胞抗虫棉叶肉细胞细菌抗虫蛋白细菌抗虫蛋白B B人酪氨酸酶基因人酪氨酸酶基因正常人皮肤细胞正常人皮肤细胞人酪氨

25、酸酶人酪氨酸酶C C动物胰岛素基因动物胰岛素基因大肠杆菌工程菌大肠杆菌工程菌细胞细胞动物胰岛素动物胰岛素D D兔血红蛋白基因兔血红蛋白基因兔成熟红细胞兔成熟红细胞兔血红蛋白兔血红蛋白D5.(5.(20092009安徽卷安徽卷,4,4)2008)2008年诺贝尔化学奖授予了年诺贝尔化学奖授予了 “ “发现和发展了水母绿色荧光蛋白发现和发展了水母绿色荧光蛋白”的三位科学的三位科学 家。如果将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因家。如果将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因 连接起来组成一个融合基因连接起来组成一个融合基因, ,再将该融合基因转入再将该融合基因转入 真核生物细胞内真核生物细胞内, ,表达出的

26、蛋白质就会带有绿色荧表达出的蛋白质就会带有绿色荧 光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是( )( ) A. A.追踪目的基因在细胞内的复制过程追踪目的基因在细胞内的复制过程 B.B.追踪目的基因插入到染色体上的位置追踪目的基因插入到染色体上的位置 C.C.追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布 D.D.追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构C6.6.我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆 菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出菌的抗虫基因导

27、入棉花细胞并成功表达，培育出 了抗虫棉。下列叙述不正确的是了抗虫棉。下列叙述不正确的是 ( )( ) A. A.RNARNA聚合酶对于抗虫基因在棉花细胞中的表达聚合酶对于抗虫基因在棉花细胞中的表达 不可缺少不可缺少 B.B.重组重组DNADNA分子中增加一个碱基对，不一定导致分子中增加一个碱基对，不一定导致 毒蛋白的毒性丧失毒蛋白的毒性丧失 C.C.抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作 物，从而造成基因污染物，从而造成基因污染 D.D.转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花 对抗生素抗性来确定的对抗生素抗性来确定

28、的D7.7.下列关于蛋白质工程应用的叙述，不正确的是下列关于蛋白质工程应用的叙述，不正确的是（ ） A.A.蛋白质工程可以改造酶的结构，提高酶的热稳蛋白质工程可以改造酶的结构，提高酶的热稳 定性定性 B.B.通过蛋白质工程可以改变蛋白质的活性通过蛋白质工程可以改变蛋白质的活性 C.C.利用蛋白质工程可以在大肠杆菌细胞中得到人利用蛋白质工程可以在大肠杆菌细胞中得到人 的胰岛素的胰岛素 D.D.蛋白质工程可以对胰岛素进行改造和修饰，合蛋白质工程可以对胰岛素进行改造和修饰，合 成速效型胰岛素制剂成速效型胰岛素制剂C8 8. .（20122012浙江）天然的玫瑰没有蓝色花，这是浙江）天然的玫瑰没有蓝色

29、花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因由于缺少控制蓝色色素合成的基因B B，而开蓝色，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因花的矮牵牛中存在序列已知的基因B B。现用基因。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是( )( )A.A.提取矮牵牛蓝色花的提取矮牵牛蓝色花的mRNAmRNA，经逆转录获得互，经逆转录获得互补的补的DNADNA，再扩增基因，再扩增基因B BB.B.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因基因文库中获取基因B BC.C.利用利用DNADNA聚合酶将基因聚合酶将基因B B与质粒连接

30、后导入玫与质粒连接后导入玫瑰细胞瑰细胞D.D.将基因将基因B B直接导入大肠杆菌，然后感染并转直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞入玫瑰细胞A 9水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中Asp、Gly和Ser构成发光环，现将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中，这蛋白质的作用( ) A促使目的基因导入宿主细胞中 B促使目的基因在宿主细胞中复制 C使目的基因容易被检测出来 D使目的基因容易成功表达 10、基因治疗是指( )A、用DNA探针修复缺陷基因 B、用DNA探针检测疾病C、用健康基因导入有基因缺陷的细胞中 D、用健康基因导入受体细胞 11下列有关基因工程技术的叙述，正确的

31、是( ) A重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 B所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 C选用细菌为基因表达载体的受体细胞是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快 D只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达12.右图为大肠杆菌及右图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式质粒载体的结构模式图，据图回答下列问图，据图回答下列问题。题。 (1)a代表的物质和质粒的化学本质都是代表的物质和质粒的化学本质都是_，二者还具有其他共同点，二者还具有其他共同点，如如_，_。DNA能够自主复制能够自主复制具有遗传效应具有遗传效应DNA连接酶连接酶标记基因标记基因供重组供重组DNA的鉴定和选的鉴定和选择择

32、 13继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：素并分泌到尿液中。请回答： (1)将人的生长激素基因导入小鼠受体细将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是胞，常用方法是_。 (2)进行基因转移时，通常要将外源基因进行基因转移时，通常要将外源基因转入转入_中，原因是中，原因是_。显微注射技术显微注射技术受精卵受精卵(或早期胚胎或早

33、期胚胎)受精卵受精卵(或早期胚胎细胞或早期胚胎细胞)具有全能性，可具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达使外源基因在相应组织细胞表达 (3)通常采用通常采用_技术技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。 (4)在研制膀胱生物反应器时，应使外源在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的基因在小鼠的_细胞中特异表达。细胞中特异表达。 (5)为使外源基因在后代长期保持，可将为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠体细胞的转基因小鼠体细胞的_转入转入_细胞中构成重组细胞，使其发细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为称为_。DNA分子杂交分子杂交(核酸探针核酸探针)膀胱上皮膀胱上皮细胞核细胞核去核的卵去核的卵核移植核移植(或克隆或克隆) （新课标（新课标II II）40.4