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文档简介

1、最新考纲最新考纲高频考点高频考点1.植物组织培养植物组织培养2动物细胞培养和动物细胞培养和体细胞克隆体细胞克隆3动物细胞融合和动物细胞融合和单克隆抗体单克隆抗体1.植物组织培养、植物组织培养、植物体细胞杂交的植物体细胞杂交的过程及应用过程及应用2动物细胞培养、动物细胞培养、单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备及应用及应用一、植物细胞工程1植物细胞工程技术的理论基础细胞的全能性(1)概念生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能,细胞的这种特性叫做细胞的全能性。 (2)理论依据 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因,从理论上讲,生物体的每一个活

2、细胞都应该具有全能性。 (3)全能性的高低(大小) 受精卵配子体细胞。 分化程度低的细胞分化程度高的细胞。 植物细胞动物细胞。 (4)体细胞未表现全能性的原因:基因的表达具有选择性。 (5)体现全能性的条件:处于离体状态,在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下。 2植物组织培养和植物体细胞杂交名称名称植物组织培养植物组织培养植物体细胞杂交植物体细胞杂交原理原理植物细胞的全能性植物细胞的全能性细胞膜具有一定的流细胞膜具有一定的流动动性和植物细胞的全能性和植物细胞的全能性性过程过程 1植物组织培养的过程可以归纳为: 。对此叙述有错误的是 () A的再分化过程中,当细胞分裂素与生长素的浓度比低

3、时,有利于根的生成 B植物组织培养所依据的原理是植物细胞的全能性 C过程指植物的营养生长和生殖生长阶段 D包裹上人造种皮可获得人工种子 【解析】只有将离体植物细胞或组织培养成具有生根发芽能力的胚状结构,再包上人造种皮,才能得到人工种子,而是未分化的愈伤组织,不具有生根发芽能力,只有在分化培养基上培养后,才能用于制造人工种子。 【答案】D 2(2009年浙江模拟)下列有关植物体细胞杂交的叙述,不正确的是() A用酶解法去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体 B诱导两种植物的原生质体融合,进而形成杂种细胞 C植物体细胞杂交的最终目的是获得细胞代谢产物 D植物体细胞杂交技术可以克服不同种间远缘杂交不亲和

4、的障碍v【解析】去除植物细胞壁可以用纤维素酶和果胶酶;原生质体融合后经过一次有丝分裂产生出细胞壁标志着杂种细胞的形成;植物体细胞杂交的目的是为了获得杂种植株;植物体细胞杂交不经过有性生殖过程,所以可以克服远缘杂交不亲和的障碍。v【答案】C 二、动物细胞培养与动物体细胞核移植动物细胞培动物细胞培养养动物体细胞核动物体细胞核移植移植原理原理细胞增殖细胞增殖动物细胞核的动物细胞核的全能性全能性动物细胞培养动物细胞培养动物体细胞核移植动物体细胞核移植过程过程结果结果获得细胞群获得细胞群获得与供体遗传物获得与供体遗传物质基本相同的个体质基本相同的个体(1)动物细胞培养中两次用到胰蛋白酶,第一次用胰蛋白酶

5、处理剪碎的组织使之分散成单个细胞,第二次使贴壁细胞从瓶壁上脱落下来。 (2)原代培养与传代培养的分界点为分瓶的继续培养。 3动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于 () A培养基不同 B动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能 D动物细胞能够大量培养,而植物细胞不能 【解析】动物细胞培养所用的培养基是液体培养基,其中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。而植物细胞培养所用的培养基是固体培养基,通常含有水、矿质元素、激素、蔗糖、氨基酸、琼脂等。可见,动物细胞培养所用的培养基与植物组织培养是不相同的。 【答案】A 4在克隆多利羊的过程中,下列哪项技

6、术没有运用到 () A细胞培养技术 B细胞核移植 C胚胎移植技术 D基因工程技术 【解析】克隆技术需利用核移植以产生重组细胞,重组细胞经细胞培养形成早期胚胎后,需移植到母体子宫发育成个体。 【答案】D 三、植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合(单克隆抗体制备单克隆抗体制备)理论理论基础基础(原理原理)细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞的全能性细胞膜的流动性、细细胞膜的流动性、细胞增殖胞增殖融合融合前处理前处理酶解法酶解法(纤维素酶纤维素酶、果胶酶、果胶酶)去除细去除细胞壁胞壁注射特定抗原使正常注射特定抗原使正常小鼠产生免疫反应小鼠

7、产生免疫反应促融促融物理法:离心、物理法:离心、振动、电刺激等;振动、电刺激等;化学法:聚乙二化学法:聚乙二醇醇(PEG)物理、化学法:与物理、化学法:与植物细胞融合相同;植物细胞融合相同;生物法:灭活的病生物法:灭活的病毒毒植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合(单克隆抗体制备单克隆抗体制备)过过程程第第一一步步原生质体原生质体的制备的制备(酶酶解法解法)正常小正常小鼠免疫鼠免疫处理处理第第二二步步原生质体原生质体融合融合(物、物、化法化法)动物细动物细胞融合胞融合第第三三步步杂种细胞杂种细胞的筛选与的筛选与培养培养杂交瘤杂交瘤细胞的细胞的筛选与筛选与培养培养第第四四步步杂种植

8、株杂种植株诱导与鉴诱导与鉴定定单克隆单克隆抗体的抗体的提纯提纯意义意义和和用途用途克服远缘杂交克服远缘杂交不亲和的障碍,不亲和的障碍,大大扩展了可用大大扩展了可用于杂交的亲本组于杂交的亲本组合范围合范围突破有性杂交突破有性杂交的母系遗传,获的母系遗传,获得细胞质基因的得细胞质基因的杂合子,研究细杂合子,研究细胞质遗传胞质遗传制备单克隆抗体制备单克隆抗体诊断、治疗和预防疾病诊断、治疗和预防疾病,例如:,例如:a肿瘤定位诊断,放射性肿瘤定位诊断,放射性抗体抗体肿瘤肿瘤b生物导弹治疗,抗体生物导弹治疗,抗体抗癌药物抗癌药物肿瘤肿瘤(1)动物细胞融合和植物体细胞杂交,均需对杂种细胞进行筛选,但筛选的方

9、法不同,前者可用免疫法,后者可用机械方法、生理学或遗传学方法。 (2)各项技术在使用中一般要借助于其他某种技术的协助,如动物细胞融合、单克隆抗体的制备、胚胎移植、核移植等,其中动物细胞培养是动物细胞工程技术的基础。 5(2010年潍坊模拟)下列关于单克隆抗体制备过程的叙述,正确的是() A制备过程中不需要动物细胞培养技术 B杂交瘤细胞具有浆细胞与癌细胞的所有特点 C经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产 D单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂 【解析】单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与浆细胞结合,经过选择培养基的筛选得到杂交瘤细胞并经单一抗体检测后,培养能产生特定抗体的杂

10、交瘤细胞即可得单克隆抗体,杂交瘤细胞能无限繁殖但不具有癌细胞的转移能力。 【答案】D(2009年全国卷)下列关于植物体细胞杂交或植物细胞质遗传的叙述,错误的是()A利用植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制,培育远缘杂种B不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程 C两个不同品种的紫茉莉杂交,正交、反交所得F1的表现型一致 D两个不同品种的紫茉莉杂交,F1的遗传物质来自母本的多于来自父本的 【解析】植物体细胞杂交可以用两种不同的植物细胞,从而可克服生殖隔离的限制,植物体细胞杂交的过程,实际上是不同植物体细胞的原生质体融合的过程。紫茉莉枝叶的性状的遗传是细胞质遗传,两个不同品种的紫茉莉杂

11、交,正交、反交所得F1的表现型应与母本一致,F1的遗传物质来自母本的多于来自父本的,因为受精卵中的细胞质几乎全部来自母本。故C错误。 【答案】C(2008年宁夏理综)回答下列有关动物细胞培养的问题: (1)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面_时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的_。此时,瓶壁上形成的细胞层数是_。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是_。相互接触接触抑制单层胰蛋白酶 (2)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现_的现象;但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成_细胞,该种细胞的黏着性_,细胞膜表面蛋

12、白质(糖蛋白)的量_。 (3)现用某种大分子染料,对细胞进行染色时,观察到死细胞被染色,而活细胞不染色,原因是_。衰老甚至死亡不死性降低减少由于活细胞的膜具有选择透过性,大分子染料不能进入活细胞内,故活细胞不能着色(或由于死细胞的膜丧失了选择透过性,大分子染料能够进入死细胞内而着色) (4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目,最好选用细胞分裂到_期的细胞用显微镜进行观察。 (5)在细胞培养过程中通常在_条件下保存细胞。因为在这种条件下,细胞中_的活性降低,细胞_的速率降低。 (6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了排斥现象,这是因为机体把移植的皮肤组织当作_进行攻击。中冷冻(或超

13、低温、液氮)酶新陈代谢抗原 【解析】在动物细胞培养过程中,细胞会表现出接触抑制现象,此时是单层细胞。用胰蛋白酶可以使贴壁细胞从瓶壁上分离开来。随着细胞传代培养代数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现衰老甚至死亡的现象,但极少数细胞可以连续增殖,有些细胞会因遗传物质改变而变成不死性细胞。由于活细胞的膜具选择透过性,大分子染料不能进入活细胞内,而死细胞的细胞膜丧失选择透过性,大分子染料能够进入死细胞内而着色。由于中期染色体形态固定、数目清晰,因此最好选用细胞分裂到中期的细胞用显微镜观察染色体数目。由于在冷冻超低温液氮下,细胞中酶的活性降低,细胞新陈代谢的速率降低,通常在此条件下保存细胞。机体把移

14、植的皮肤组织当作抗原攻击,会发生排斥现象。(2008年上海生物)制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括() 细胞培养细胞融合胚胎移植细胞核移植 A B C D 【解析】制备单克隆抗体时,首先采用细胞融合技术得到杂交瘤细胞,再采用动物细胞培养技术获得能产生所需抗体的细胞群。 【答案】A动物细胞融合与植物体细胞杂交比较比较项目项目细胞融合细胞融合的原理的原理细胞融合细胞融合的过程的过程诱导手段诱导手段用途用途植物体细植物体细胞杂交胞杂交细胞膜的细胞膜的流动性流动性去除细胞去除细胞壁后诱导壁后诱导原生质体原生质体融合融合离心、电离心、电刺激、振刺激、振动、聚乙动、聚乙二醇等试二醇等试剂诱导剂诱导克服

15、远缘克服远缘杂交不亲杂交不亲和,获得和,获得杂种植株杂种植株动物细胞动物细胞融合融合细胞膜的细胞膜的流动性流动性使细胞分使细胞分散后诱导散后诱导细胞融合细胞融合除应用植除应用植物细胞杂物细胞杂交手段外交手段外,再加灭,再加灭活的病毒活的病毒诱导诱导制备单克制备单克隆抗体隆抗体1(2009年高考浙江理综卷)用动、植物成体的体细胞进行离体培养,下列叙述正确的是()A都需用 CO2培养箱 B都须用液体培养基C都要在无菌条件下进行 D都可体现细胞的全能性 【解析】植物组织培养用固体培养基不需用CO2培养箱,植物组织培养可得到完整的植物个体,体现了细胞的全能性,动物细胞培养获得的是动物细胞或代谢产物,未

16、体现细胞的全能性;植物组织培养和动物细胞培养均需要在无菌条件下进行。 【答案】C 2(2009年山东卷)人类在预防与诊疗传染性疾病过程中,经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,且疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图: 请回答: (1)过程代表的是_。 (2)过程构建A基因表达载体时,必须使用_和_两种工具酶。 (3)过程采用的实验技术是_,获得的X是_。 (4)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的_所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可以疑似患者体内分离病毒,与已知病毒进行_比较;或用图中的_进行特异性结合检测。逆转录限制

17、性内切酶DNA连接酶细胞融合杂交瘤细胞A蛋白核酸(基因)序列抗A蛋白的单克隆抗体抗A蛋白的单克隆抗体 【解析】本题以图展示了疫苗的生产和单克隆抗体的制备的过程,考察了中心法则、基因工程、动物细胞工程等现代生物科技。(1)中心法则中,对于少数的以RNA为遗传物质的病毒,其遗传信息的传递过程需要补充的过程有RNA的逆转录和RNA的复制的过程,图中过程正代表的是逆转录的过程。 (2)基因工程的步骤是:目的基因的提取构建基因表达载体导入受体细胞目的基因的检测和表达,其中构建基因表达载体中需要限制酶来切割以获取目的基因,同时还需要相同的限制酶切割运载体以获取与目的基因相同的黏性末端,再通过 DNA连接酶

18、连接目的基因和运载体。 (3)过程是将瘤细胞与B淋巴细胞融合的过程,获得的叫杂交瘤细胞,其具备了瘤细胞的无限增殖的特性和B淋巴细胞的产生抗体的特性,从而制备单克隆抗体。 (4)本题考察了免疫预防的操作过程,以及欲确诊疑似患者而采取的方法。本题中提示该RNA病毒表面的A蛋白为主要的抗原,故而可选用通过基因工程生产的A蛋白制备疫苗;确诊时为判断该病毒是否为题目中的RNA病毒,可以进行核酸序列的比对,也可以利用单克隆抗体具备特异性,利用抗A蛋白的特异性单克隆抗体通过能否特异性结合判断病毒表面是否有A蛋白的存在进一步进行检测是否为目的RNA病毒。 3(2009年江苏卷)动物器官的体外培养技术对于研究器

19、官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图,请回答下列问题。 (1)肝脏切成小薄片,这有利于肝脏细胞_。 (2)气室中充入5%CO2气体的主要作用是_。 (3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长,但要注意选择抗生素的_,以保证抗生素对肝脏无害。吸收氧气和营养物质排出代谢废物维持培养液适宜的pH种类和剂量 (4)有机物X有毒性,可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具,探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。 材料用具: 肝脏小块,外周血淋巴细胞,淋巴细胞培养液,植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂);显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,滴管;吉姆萨染液(

20、使染色体着色),有机物X溶液等。实验过程: 在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞,取4等份,备用。 利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置,按下表步骤操作(“”表示已完成的步骤)。 上表中还需进行的操作是_。甲甲乙乙丙丙丁丁步骤一:加入肝脏培步骤一:加入肝脏培养液养液步骤二:加入有机物步骤二:加入有机物X溶液溶液步骤三:放置肝脏小步骤三:放置肝脏小块块向乙(或丁)组装置中放置肝脏小块 培养一段时间后,取4组装置中的等量培养液,分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。 一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察_,并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常,而甲组的淋巴细胞正常,则说明

21、_。染色体形态和数量肝脏小块对有机物X具有解毒作用 【解析】本题考查动物细胞培养的相关知识。(1)把肝脏切成小薄片,有利于肝脏细胞的呼吸代谢,即吸收氧气和营养物质、排出代谢废物。(2)气室中充入5%CO2的作用是形成碳酸来维持培养液适宜的pH。(3)同时也要注意选择抗生素的种类和数量来抑制细菌生长。(4)乙组或丁组没有处理向乙(或丁)组装置中放置肝脏小块作为对照实验,有机物X有毒性,可诱发染色体断裂所以要观察淋巴细胞的染色体形态和数量是否变化。甲组添加肝脏小块淋巴细胞染色体正常,丙组没有添加出现染色体异常,说明肝脏小块对有机物X具有解毒作用,所以甲组正常。一、植物细胞工程1植物细胞工程技术的理论基础细胞的全能性(1)概念生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能,细胞的这种特性叫做细胞的全能性。(2008年宁夏理综)回答下列有关动物细胞培养的问题: (1)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面_时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的_。此时,瓶壁上形成的细胞层数是_。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是_。相互接触接触抑制单层胰蛋白酶(2008年上海生物)制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括() 细胞培养细胞融合

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