HPV12 2,E6E7项目介绍

1、HPV12+2/E6E7项目介绍 市场部 刘玉洁 HPV12+2 临床应用 同类产品比较 项目信息及宣传资料 E6E7 临床应用 项目信息及宣传资料 HPV12+2 临床应用 同类产品比较 项目信息及宣传资料 E6E7 临床应用 项目信息及宣传资料l约50%女性在开始性生活后2年内，可有生殖道HPV感染，终身累积感染率高达80%lHPV感染高峰在20岁前后l最常见的感染类型为HPV16和18，占全部宫颈癌的5560，但也有地区差异，亚洲地区HPV58也相对较高lHPV感染多为一过性感染，清除时间一般为618个月，约90%在2年内消失lHPV持续感染是宫颈癌发生的必要条件HPV病毒感染的流行病学

2、特征宫颈癌与HPVHPV感染是宫颈癌发生的必要条件感染是宫颈癌发生的必要条件致癌性的人乳头瘤病毒（HR HPV）的持续性感染，是导致子宫颈浸润癌及其高等级癌前期病变（CIN2,3,包括原位癌）的主因。 宫颈癌危险因素的研究历史: 1800s:与性行为相关 1960s-80s: 感染因子 (HSV-2) 1980s-90s: 发现HPV与宫颈癌有关 1990s-:人乳头瘤病毒（HPV）被确认为宫颈癌的主要病因 目前国际医学界已经确认，HPV是引起宫颈癌的主要因素，表现在： 99.8的宫颈癌患者中可以检测到不同型别的HPV DNA，而HPV阴性者几乎不会发生宫颈癌。 FDA批准Roche coba

3、s HPV 检测用于宫颈癌的初筛2014.4.24，美国食品药品监督管理局（FDA）批准cobas HPV检测（罗氏分子诊断）应用于25岁及以上女性的宫颈癌一线筛查。是美国第一个也是唯一一个用于宫颈癌一线筛查的HPV DNA检测。该检测推荐用于一线初筛，可特异性分型HPV16和HPV18，这两类高危亚型与70%的宫颈癌发生有关。同时可检测到另12种高危HPV亚型（31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66及68）。 FDA批准Roche cobas HPV 检测用于宫颈癌的初筛基于HPV12+2的检测结果，16或18型阳性的女性需后续跟进阴道镜检测，若

4、12种高危亚型阳性需进行细胞学检测以确认是否还需阴道镜检查。AOGIN会议关于筛查方案的评估 2014.4.25-2014.4.27AOGIN会议关于筛查方案的评估 2014.4.25-2014.4.27第一类：细胞学检测为主，包括进行HPV分流和单独细胞学检测两种；第二类：HPV和细胞学联合筛查为主；第三类：HPV检测为主，结合细胞学分流或不结合；AOGIN会议关于筛查方案的评估根据多项研究表达，在宫颈癌筛查方面，使用HPV伴16/18分型检测法作为初筛，检出CIN3+的敏感性显著高于细胞学检测，且更为有效；该检测结合细胞学进行分流的筛查策略与高风险HPV检测联合细胞学检测的筛查策略敏感性相

5、似。因此，大会重点推荐HPV DNA检测作为一线方法，结合细胞学分流的策略。HPV 检测的临床验证不需要检测出每一个高危型HPV（hrHPV）阳性的妇女HPV检测目的是：发现当前有CIN2+病变或未来有可能发展为CIN2+风险人群分析敏感性和临床敏感性全球不同区域引起宫颈癌的排名前五位的HPV亚型HPV16、18型感染率最高对来自世界各地的宫颈癌组织标本的研究发现，HPV16、18型感染率占到55%60% 结果:1244 archived tumor tissue (2004-2006) from 19 hospitals in 7 geographic regions of China, e

6、xtending over the entire countryHPV 16 and 18 were most common types in cervical cancerSix Most Common HPV Types in Cervical Carcinoma by RegionATHENA 试验方案不同型别hrHPV阳性时CIN2 病变的10年累积发病率Follow-up time (months)Other high-risk HPV+HPV18+High-risk HPVHPV16+Cumulative incidence rate of CIN3 (%)17.2% (11.52

7、2.9)13.6% (3.623.7)3.0% (1.94.2)0.8% (0.61.1)4.5 1527395163758799119.5111020151050感染HPV16/18的女性，不论是近期，还是远期进展为高度宫颈病变的风险都远远高于其它HPV型别阳性Khan MJ, et al. J Natl Cancer Inst 2005; 97:10721079.3年CIN3累计风险初筛人群(25 岁)HPV 16 (+)HPV 18 (+)Other 12 hrHPV (+)HPV (-)CIR CIN3 (%)ACS/ASCCP/ASCP 指南（美国癌症学会、美国阴道镜和宫颈病理学会，

8、美国临床病理学会指南） 2012年更新30岁女性筛查策略的比较 权衡CIN3+的检出率和阴道镜转诊数量筛查策略筛查检测数量基线时CIN3+漏检的 CIN3+延迟的 CIN3+阴道镜检测数量检出1个CIN3+所需阴道镜数量细胞学，ASCUS者用HPV分流35,5461068308167.7联合筛查68,50810611728167.7单独HPV34,254170190234113.8先HPV检测伴16/18分型，再通过细胞学分流 (ASC-US)36,42313619349827.2 HPV12+2 临床应用 同类产品比较 项目信息及宣传资料 E6E7 临床应用 项目信息及宣传资料竞争者分析表竞

9、争者分析表检测方法HC2 Cervista HPV HR检测HPV 14 型检测检测型别 13种高危型HPV无HPV 66高危亚型，丢失HPV66亚型病人，延误随访时间 。14种高危HPV（包括HPV66亚型）14种高危HPV（包括HPV66亚型） 内质控 无内质控，易造成假阴性HIST2H2BE基因为内质控防止假阴性Betaglobin管家基因作为内质控，提供可信赖的阴性结果 交叉污染控制假阳性 (其说明书指明10%的假阳性)67、70交叉污染导致假阳性与低危型及其他微生物没有交叉反应提供可靠的阳性结果 结果定性检测，提供半定量参考，混合检测13型，不区分型别，无法进一步获知病人是否具有癌前

10、的高风险；面临阳性人群分流随访问题。一份样本三次检测得到如下结果：结果为分组检测，无法对HPV16、18分型A5/A6组（HPV51、56、66）阴性或阳性A7组（HPV18、39、45、59、68）阴性或阳性A9组（HPV16、31、33、35、52、58）阴性或阳性一份样本一次检测得到三个结果：HPV16阴性或阳性HPV18阴性或阳性其他高危（HPV31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66,68）阴性或阳性敏感度87.20%92.80%90.00%特异度71.10%44.20%70.50%阳性预测值13.70%8.30%14.00%阴性预测值99

11、.10%99.10%99.20%手工操作 存在人为操作错误与污染的风险 存在人为操作错误与污染的风险 全自动. HC2 存在的问题cobas 的优势只检测13种高危型，没有HPV66假阴性 which are extremely dangerous in co-testing/for patients who are not visiting doctors regularly14种高危HPV包括HPV66无内质控假阴性 which are extremely dangerous in co-testing/for patients who are not visiting doctors r

12、egularlyB球蛋白作为内质控，提供可靠的阴性结果与低危型产生交叉反应假阳性 (说明书显示有10%）Proven no cross reactivity to low risk HPV and many other microorganisms. Provides reliable positive results.无分型无法获知病人是否具有癌前的高风险. 专门分型16/18要求4ml的样本量样本不足够，影响操作3mL in ThinPrep vial1mL in 13 mm secondary tube.结果存在灰区需要重复检测没有灰区不是全自动化可能出现人为操作引起的错误，交叉污染。

13、全自动竞争者分析表HC2检测没有内质控，对于检测阴性或失败结果不能得知是由于取样细胞量不够而导致阴性还是真是阴性。FDA要求新批准的HPV DNA检测必须有内质控。HC2只检测13种高危型HPV，缺少66亚型，存在漏检风险，不能分型HPV16/18，无法获知病人是否具有高风险的疾病！ HPV12+2 临床应用 同类产品比较 项目信息及宣传资料 E6E7 临床应用 项目信息及宣传资料cobas 4800 HPV 检测平台概览1.66 m90 cmcobas x 480 instrument自动核酸提取仪（磁珠提取法）cobas z 480 实时定量PCR仪自动核酸扩增、检测、分析57 cm50

14、cm实验检测意义实验检测意义单管检测，多个结果单管检测，多个结果 4 通道检测通道检测多种标本适用多种标本适用PreservCyt 和和 SurePathcobas PCR Cell Collection Media艾康细胞保存液艾康细胞保存液各通道的各通道的cut-off值不同值不同Cobas 4800 HPV 检测2011年4月获欧盟与美国FDA批准； 2012年9月获中国药监局批准HRHR313545525866395156596833GT16GT18临床意义n12 种高风险种高风险HPV 基因型混合结果基因型混合结果n30% 宫颈癌与其相关宫颈癌与其相关nHPV16 结果结果n风险最高

15、风险最高nHPV18结果结果nHPV18+ 容易被细胞学检测漏诊容易被细胞学检测漏诊n腺癌多见，病变进展最快腺癌多见，病变进展最快cobas 4800 HPV检测特点二为 联合检测 提供便捷平台1次采样 2种检测 2份报告4个结果HR121618-globinTBS(LSIL) +/- +/- +/- CTTCT检查 HPV检测cobas 4800 HPV检测特点三 结果准确可靠内部质控（-球蛋白）对取样、检测质量全程监测和评估高精密移液技术严格控制样本、试剂加样避免加样漏液导致的样本交叉污染避免因未取到宫颈上皮细胞造成的假阴性结果避免反应抑制造成的假阴性结果cobas 4800 HPV检测特

16、点三 结果准确可靠防止与其他低危亚型交叉污染实现一次检测3个结果UNG酶抑制遗留扩增子避免样本受扩增子污染导致假阳性高保守靶标选择，优化PCR引物、探针设计cobas 4800 HPV 检测特点四PCR方法具有经临床验证的灵敏度和特异性FluorescenceCycle number (CT-cycle threshold)Negative Positive (CT40)Significance level of net fluorescence 40 通过数万例临床标本建立检查信号基线检测结果可以高度预测癌前病变CIN2+的相关度。临床特异性和临床灵敏度的最佳平衡点 - 医学决定点。报告时间

17、：4个工作日 HPV12+2 临床应用 同类产品比较 项目信息及宣传资料 E6E7 临床应用 项目信息及宣传资料HPV感染与宫颈癌的发病关系70%-80%女性一生中会感染该病毒。 HPV感染后，大部分女性会在9至16个月内，通过自身免疫力将病毒清除。约30至50感染者会出现宫颈上皮细胞轻度病变，但在病毒清除后3 至4 个月内，会逐渐恢复正常。但也有约5至10，因自身免疫因素或其他因素不能将病毒清除，并在体内维持高水平病毒载量，成为HPV持续感染，最终发展为宫颈癌。宫颈癌的病因致癌机理高危亚型HPV（人乳头瘤病毒）感染宫颈上皮细胞后，病毒癌基因转录生成E6、E7 mRNA，进一步翻译生成两种癌蛋

18、白：E6和E7蛋白。癌蛋白可与宿主细胞的细胞周期调节蛋白（抑癌蛋白如P53、RB等）相结合，导致细胞周期控制失常，发生癌变。临床应用组织病理学 CIN/CIN/CIN癌基因 E6/E7 mRNA，辅助确定筛查间隔、是否手术及手术类型流行病学 30岁以下高感染、高转归女性，不适合做HPV DNA, 癌基因 E6/E7 mRNA可选出致癌风险较大者，规避过度诊断治疗病毒学 HPV DNA（+）癌基因 E6/E7 mRNA ，选出有致癌活动的HPV感染者细胞学 ASC-US以上癌基因 E6/E7 mRNA，降低细胞学的漏诊率治疗学 手术后癌基因 E6/E7 mRNA，评估治疗效果并指导术后随访。流行

19、病学 30岁以下高感染、高转归女性癌基因 E6/E7 mRNA1、此类人群HPV的感染率很高。2、此类人群宫颈癌患癌率低。3、HPV DNA检测的意义不突出 HPV的感染与性生活的频、早、多密切相关， 由于此类人群的免疫力较强、HPV致癌时间较长，所以该人群的患癌率相对较低。 NCCN指南 显示此类人群不建议做HPV DNA检测。流行病学 30岁以下高感染、高转归女性癌基因 E6/E7 mRNA21-29年龄段：高感染高清除持续高危HPV感染：是高风险因素HPV-DNA检测： 只能测出感染情况 不能评估罹患宫颈癌风险E6、E7 mRNA检测： 可测出E6、E7癌基因在宫颈细胞中的表达情况 检测E6