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文档简介
1、第二十二章 流式细胞仪分析技术及运用流式细胞术流式细胞术(Flow Cytometry, (Flow Cytometry, FCM)FCM)第一节第一节 流式细胞仪的原理流式细胞仪的原理 Principle of Flow Cytometer台式流式细胞仪台式流式细胞仪台式流式细胞仪台式流式细胞仪台式流式细胞仪台式流式细胞仪落地式流式细胞仪落地式流式细胞仪一、任务原理一、任务原理一一 液流系统液流系统 细胞样品和包裹在外的鞘液,细胞样品和包裹在外的鞘液,保证细胞逐个以一样的速度、一样保证细胞逐个以一样的速度、一样的轨迹检测区。单细胞流技术。的轨迹检测区。单细胞流技术。二激发光与光速成形系统二激
2、发光与光速成形系统 多为氩离子气体激光多为氩离子气体激光488nm,用圆柱形透镜聚焦成高用圆柱形透镜聚焦成高15um、宽、宽57um椭圆形光斑椭圆形光斑检测区。长轴垂检测区。长轴垂直细胞流和激光束中心轴,短轴与细直细胞流和激光束中心轴,短轴与细胞轴一致并重叠。胞轴一致并重叠。 保证每一细胞遭到保证每一细胞遭到一致的光照。单细胞照明技术。一致的光照。单细胞照明技术。三细胞信号检测与分析和处置系统三细胞信号检测与分析和处置系统 细胞产生散射光和荧光信号细胞产生散射光和荧光信号360360度发度发射。分光镜和滤光片将不同波长的光射。分光镜和滤光片将不同波长的光分开,光电倍增管及电子线路接纳并分开,光电倍增管及电子线路接纳并转化为电信号,模数转化器量化为数转化为电信号,模数转化器量化为数字信号由计算机采集、分析、显示和字信号由计算机采集、分析、显示和存储。单细胞检测技术。存储。单细胞检测技术。 二、流式细胞仪检测二、流式细胞仪检测 1.1.散射光测定散射光测定 2.2.荧光测定荧光测定 3.3.细胞分选原理细胞分选原理 第二节第二节 数据的显示与分析数据的显示与分析一、信道值一、信道值二、
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