临床检验方法的评价CLSIEP文件ppt课件

1、决议性方法决议性方法definitive method：经详尽：经详尽研讨尚未发现不准确度或不确定性缘由研讨尚未发现不准确度或不确定性缘由的方法。的方法。参考方法参考方法reference method：经详尽研：经详尽研讨证明其不准确度与不精细度可以忽略讨证明其不准确度与不精细度可以忽略的方法。的方法。常规方法常规方法routing method：可满足临：可满足临床或其他目的需求的日常运用的方法。床或其他目的需求的日常运用的方法。分分析析物物 决决定定性性方方法法参参考考方方法法CaID-MS原原子子吸吸收收分分光光光光度度法法Cl电电量量滴滴定定中中子子活活化化法法电电流流滴滴定定法法F

2、eID-MS沉沉淀淀蛋蛋白白后后亚亚铁铁嗪嗪反反应应MgID-MS原原子子吸吸收收分分光光光光度度法法PID-MSKID-MS中中子子活活化化法法火火焰焰光光度度法法Na重重量量分分析析法法中中子子活活化化法法火火焰焰光光度度法法分析物分析物决定性方法决定性方法参考方法参考方法AlbAlb免疫化学法免疫化学法TPTP双缩脲法双缩脲法CreaCreaID-MSID-MS中子活化法中子活化法离子交换层析离子交换层析UreaUreaID-MSID-MS尿素酶法尿素酶法UAUAID-MSID-MS尿酸酶法尿酸酶法BilBil重氮法重氮法GluGluID-MSID-MS己糖激酶法己糖激酶法CholCho

3、lID-MSID-MS胆固醇氧化酶法胆固醇氧化酶法TGTGID-MSID-MS酶法酶法仪器参数仪器参数试剂试剂评价内容：评价内容： 初步评价初步评价NCCLS EP10 精细度精细度 NCCLS EP5 对比及偏向对比及偏向 NCCLS EP9 线性线性 NCCLS EP6 抗干扰才干抗干扰才干 NCCLS EP7 基质效应基质效应 NCCLS EP14 临床准确度敏感性和特异性临床准确度敏感性和特异性 NCCLS GP10，ROC曲线曲线NCCLS文件文件EP9-A用患者样本进展方法对比用患者样本进展方法对比及偏向评价及偏向评价同意指南同意指南2019年年12月月评价两种分析方法同一分析工程

4、评价两种分析方法同一分析工程的偏向。的偏向。评价要求：评价要求：熟习仪器操作熟习仪器操作熟习评价方案熟习评价方案质控质控足够的数据最少足够的数据最少5个任务日，个任务日，40个样本个样本用途：用途：目的：目的： 引进新方法前或用一种方法替代另一种方引进新方法前或用一种方法替代另一种方 法时进展偏向分析。法时进展偏向分析。测定范围：医学决议程度范围内均匀分布测定范围：医学决议程度范围内均匀分布 样本数：至少样本数：至少40例，添加可提高可信性。例，添加可提高可信性。测定方法：两种方法分别做双份测定。测定方法：两种方法分别做双份测定。测定顺序：测定顺序： 每天每天 ：1、2、3、4、5、6、7、8

5、 8、7、6、5、4、3、2、1测定次数：测定次数： 每天分别用两种方法进展测定，每天分别用两种方法进展测定， 至少测定至少测定5天，共天，共40个样本个样本数据监视：系统误差、人为误差数据监视：系统误差、人为误差质控：常规质控质控：常规质控表表 1 1 病病 人人 样样 本本 检检 验验 结结 果果B BE EC CK KM MA AN N（Y Y） （g g/ /l l）H HI IT TA AC CH HI I( (X X) )( (g g/ /l l) )样样 品品号号结结 果果1 1( (Y Y1 1) )结结 果果2 2( (Y Y2 2) )均均 值值Y Yi i) )D DY

6、Yi i结结 果果1 1( (X X1 1) )结结 果果2 2( (X X2 2) )均均 值值( (X Xi i) )D DX Xi iY Yi i- -X Xi i1 12 25 52 25 52 25 50 02 28 8. .3 32 28 8. .1 12 28 8. .2 20 0. .2 2- -3 3. .2 22 24 46 64 47 74 46 6. .5 51 14 47 7. .5 54 47 7. .4 44 47 7. .5 50 0. .1 1- -1 13 33 36 63 36 63 36 60 03 38 8. .4 43 38 8. .1 13 38

7、8. .3 30 0. .2 2- -2 2. .3 34 43 39 94 40 03 39 9. .5 51 14 41 1. .3 34 40 0. .8 84 41 1. .1 10 0. .5 5- -0 0. .6 65 51 14 41 14 41 14 40 01 18 8. .7 71 18 8. .9 91 18 8. .8 80 0. .2 2- -4 4. .8 86 63 32 23 32 23 32 20 03 36 6. .1 13 36 6. .2 23 36 6. .2 20 0. .1 1- -4 4. .2 27 72 27 72 28 82 27 7.

8、.5 51 13 31 1. .2 23 31 1. .2 23 31 1. .2 20 0- -3 3. .7 78 84 42 24 43 34 42 2. .5 51 14 43 3. .8 84 43 3. .9 94 43 3. .9 90 0. .1 1- -1 1. .4 433343434035.636.335.90.3-1.934303030032.132.632.30.5-2.335404040041.14141.10.1-1.136424242043.243.443.30.2-1.337383838038.638.938.70.3-0.73843434304544.944

9、.90.1-1.939353535036.93736.90.1-1.940444544.5144.845.3450.5-0.5平平 均均 数数0 0. .3 37 70 0. .4 41 1- -2 2. .7 7y = 1.1722x - 9.0485R = 0.969510203040501020304050HITACHI 7170(BCG)BECKMAN CX9(BCP)Yi-Xi对X i偏 倚图-15-10-505101520304050HITACHI 7170（B CG）Yi-Xi偏向图：每次测定的偏向图：每次测定的Y均值与均值与X均值均值 之差之差-相应相应X均值图均值图X 最适范

10、围检查相关最适范围检查相关 （ALB）r =N Ni i2 2ijij2 2j jN Ni i2 2ijij2 2j jN Ni i2 2j jijijijij) )y y(y(y) )x x(x(x) )y y)(y)(yx x(x(xr =0.9695回归系数评价计算回归系数评价计算截距截距 a = - 9.05斜率斜率 b = 1.17Y = 1.17 X 9.05B BC CP P 与与B BC CG G 法法测测定定血血清清A AL LB B 时时结结果果的的预预期期偏偏倚倚估估计计B BP PG G 法法( (g g/ /l l) )B BC CP P 法法( (g g/ /l l

11、) )预预期期偏偏倚倚（g g/ /l l）相相对对偏偏倚倚（% %）3 30 02 26 6. .5 5- -3 3. .5 51 11 1. .6 64 40 03 37 7. .8 8- -2 2. .2 25 5. .5 55 50 04 49 9. .1 1- -0 0. .9 91 1. .8 8Evaluation of The Linearity of Quantitative Analytical MethodsEP6-P 为实验室中采用定量分析方法的用户提为实验室中采用定量分析方法的用户提供评价仪器或方法能否满足厂家线性目供评价仪器或方法能否满足厂家线性目的的评价方法。的的

12、评价方法。 用户可为分析方法设定线性范围。用户可为分析方法设定线性范围。 Assay RangeLinear Range) The range of concentration or activity in which the final output value of a system is proportional to the analyte concentration or activity within a stated tolerance. Linearity:The measure of the degree to which a curve approximates a str

13、aight line.It refers to overall system response (i.e., the final analytical answer rather than the instrument output) 线性是分析方法的一个特征，不同于准线性是分析方法的一个特征，不同于准确性和精细度。确性和精细度。 线性实验应该运用与待分析物基质类似线性实验应该运用与待分析物基质类似的样本。的样本。 线性检验系统反响，包括校准、线性化线性检验系统反响，包括校准、线性化技术、系数和仪器反响。技术、系数和仪器反响。 用简单的实验来检验厂家标示的线性范用简单的实验来检验厂家标示的线性

14、范围及定量分析方法的分析范围。围及定量分析方法的分析范围。 在实验室中作为方法学的信息方法线在实验室中作为方法学的信息方法线性。性。 进展线性评价实验。进展线性评价实验。 执行分析过程的实验室人员必需掌握仪执行分析过程的实验室人员必需掌握仪器操作和维护程序、样本预备方法和校器操作和维护程序、样本预备方法和校准。准。 对较简单的设备需求对较简单的设备需求5天或更少时间。天或更少时间。 对较复杂的多通道设备需求对较复杂的多通道设备需求5天或更长时天或更长时间。间。 在完成仪器熟习过程后开场实验并搜集在完成仪器熟习过程后开场实验并搜集数据。数据。 全部实验和数据采集应在同一任务日内全部实验和数据采集

15、应在同一任务日内完成。完成。 样本要求： 最少4个浓度程度，引荐5个程度。 基质效应： 应运用与病人样本类似的样本或注明基质类型。 病人混合血清病人混合血清 理想的样本基质理想的样本基质 高值样本：高于上限高值样本：高于上限30% 低值样本：线性低限或更低。低值样本：线性低限或更低。 Patient-Sample Pool Spiked with Analyte 参与品在没有干扰物存在时不需高纯度。参与品在没有干扰物存在时不需高纯度。 Pool Diluted with Treated Pool Material 用于降低分析物浓度，如：透析、热处用于降低分析物浓度，如：透析、热处置、层析。置

16、、层析。 Pool Diluted with Saline。 在线性实验中运用此类样本可掩盖不同的基在线性实验中运用此类样本可掩盖不同的基质效应。质效应。 Commercial Control/Calibrator Material 此类样本由于不是正常的生理方式，可掩盖此类样本由于不是正常的生理方式，可掩盖实践的线性结果。实践的线性结果。 Underdiluted/Overdiluted Commercial Control Material Aqueous Solutions 普通无基质效应普通无基质效应 Solution in Other Solvents 基质效应与基质效应与有机溶剂类

17、似有机溶剂类似 ALB：白蛋白干粉、：白蛋白干粉、human fraction V. 乙醇：无水乙醇乙醇：无水乙醇 ALP：纯酶：纯酶 AMS：腮腺或胰腺提取物：腮腺或胰腺提取物 BIL： 胆红素纯品胆红素纯品 Ca: CaCO3 Cl: NaCl CHOL：胆固醇纯品或稀释质控品：胆固醇纯品或稀释质控品 CO2： CaCO3 CREA：规范液或高值血清：规范液或高值血清-ALT： 纯酶纯酶 GLU： 右旋糖右旋糖 AST： 纯酶纯酶 ALT： 纯酶纯酶 HBD： 纯酶纯酶 LDH： 纯酶纯酶 Lipase： 胰腺提取物胰腺提取物 Mg： MgCl2 P: K(H)2PO4或或Na(H)PO4

18、 TP： 白蛋白干粉、人或牛的成份白蛋白干粉、人或牛的成份V UA： 在得不到高值病人样本时，运用规范贮藏液或在得不到高值病人样本时，运用规范贮藏液或枯燥尿酸枯燥尿酸 。 BUN：在得不到高值病人样本时，运用规范贮藏液或：在得不到高值病人样本时，运用规范贮藏液或枯燥尿素枯燥尿素 。 分析序列应为随机陈列。分析序列应为随机陈列。 有显著携带污染时，运用空白隔开样本。有显著携带污染时，运用空白隔开样本。 每个实验组内应至少分析每个实验组内应至少分析4个最好是个最好是5个不同浓度程度的样本。个不同浓度程度的样本。 应覆盖待评线性范围的上、下限。应覆盖待评线性范围的上、下限。 评价结果不称心时应重新设

19、定浓度。评价结果不称心时应重新设定浓度。 线性范围内至少应保管有线性范围内至少应保管有4个浓度。个浓度。 足量的混合血清。足量的混合血清。 低浓度混合血清低浓度混合血清No1；高浓度混合血；高浓度混合血清清No5 血清血清No2：3份份“No1 + 1份份“No5 血清血清No3：2份份“No1 + 2份份“No5 血清血清No4：1份份“No1 + 3份份“No5 C1V1 + C5 V5浓度 = - V1 + V5x1 y1-1 y1-2 y1-3 y1-4x2 y2-1 y2-2 y2-3 y2-4x3 y3-1 y3-2 y3-3 y3-4 x4 y4-1 y4-2 y4-3 y4-4

20、x5 y5-1 y5-2 y5-3 y5-4 察看有无明显的数据错误。察看有无明显的数据错误。 假设有明显异常时应判别能否为离群点。假设有明显异常时应判别能否为离群点。 如离群点超出如离群点超出2点，那么保管全部数据或点，那么保管全部数据或重做全部实验。重做全部实验。 用于特定浓度用于特定浓度Y值离群点的检验。值离群点的检验。 将将4个反复值从大到小陈列个反复值从大到小陈列Y1到到Y4。 计算：计算：D = Y1 - Y4 假设假设Y1能够是离群点，计算：能够是离群点，计算： D1 = Y1 - Y2/ D 假设假设Y4能够是离群点，计算：能够是离群点，计算： D4 = Y3 - Y4/ D判

21、别值判别值Critical value)(0.05) 0.765(0.01) 0.889 线性线性X-Y图，图，X轴为分析物浓度。轴为分析物浓度。 反响值或仪器输出值为反响值或仪器输出值为Y轴。轴。 目测离群值。目测离群值。 ( Y= aX + b ) 目测线性判别能否符合要求。目测线性判别能否符合要求。 进展统计学判别和评价。进展统计学判别和评价。 统计学规范和临床可接受限不同。统计学规范和临床可接受限不同。 慎用方法学线性范围从慎用方法学线性范围从0开场。开场。 有临床意义的浓度应在线性评价中：有临床意义的浓度应在线性评价中： 最小的线性浓度最小的线性浓度 医学决议程度医学决议程度 最大的线性浓度最大的线性浓度 Dixon W.J. and Ma