第三章杂质检查(7版)

1、药物的纯度要求药物的纯度要求杂质的来源和种类杂质的来源和种类杂质的限量检查杂质的限量检查一般杂质检查一般杂质检查特殊杂质检查特殊杂质检查药物的纯度要求药物的纯度要求药物的纯度药物的纯度-是指药物的纯净程度。是指药物的纯净程度。药物的杂质检查是表明药物纯度的一个非常重药物的杂质检查是表明药物纯度的一个非常重要的方面。杂质（要的方面。杂质（impurityimpurity）是指药物中存在）是指药物中存在的无治疗作用或影响药物稳定性和疗效，甚至的无治疗作用或影响药物稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的物质。对人体健康有害的物质。因此，杂质检查也称为纯度检查。具体地说，因此，杂质检查也称为纯度检查。具体

2、地说，药物的纯度就是指药物中所含杂质及其最高限药物的纯度就是指药物中所含杂质及其最高限量的规定。量的规定。注意：药物纯度与化学纯度是不同的，不能互注意：药物纯度与化学纯度是不同的，不能互相代替使用。相代替使用。药物的杂质检查项下包括：药物的杂质检查项下包括：杂质检查杂质检查有效性有效性指与药物疗效有关的一些指标。指与药物疗效有关的一些指标。如：氢氧化铝的制酸力，药用碳的吸着力，如：氢氧化铝的制酸力，药用碳的吸着力，含氟药物的含氟量等。含氟药物的含氟量等。安全性安全性异常毒性，热原，降压物质，无异常毒性，热原，降压物质，无菌试验等。菌试验等。药物制剂要求药物制剂要求重量差异，崩解时限，含重量差异

3、，崩解时限，含量均匀度等。量均匀度等。杂质的来源与种类生产过程中引入生产过程中引入- 原料不纯，反应中间体，副产物；原料不纯，反应中间体，副产物； 加入的试剂，有机溶剂，催化剂；加入的试剂，有机溶剂，催化剂； 金属器皿、装置、管道等；金属器皿、装置、管道等； 制剂过程中产生的杂质制剂过程中产生的杂质。贮藏过程中产生贮藏过程中产生- 保管不当或贮藏时间过长；保管不当或贮藏时间过长； 湿度、温度、日光、空气等影响；湿度、温度、日光、空气等影响； 微生物作用。微生物作用。同分异构及同质异晶现象。同分异构及同质异晶现象。例例 生产中带入：生产中带入：l注射用氯化钠注射用氯化钠-各种盐类，卤化物等各种盐

4、类，卤化物等l阿片中提取吗啡阿片中提取吗啡-引入罂粟碱、其他生引入罂粟碱、其他生 物碱。物碱。l葡萄糖中葡萄糖中“可溶性淀粉可溶性淀粉”与与“醇中不溶物（糊醇中不溶物（糊精）精）”有机残留溶剂有机残留溶剂注射液灭菌时分解：注射液灭菌时分解：l盐普注射液盐普注射液-水解产生对氨基苯甲酸，二乙氨基水解产生对氨基苯甲酸，二乙氨基乙醇乙醇l葡萄糖注射液葡萄糖注射液 -5-5-羟甲基糠醛羟甲基糠醛 贮存过程中产生：贮存过程中产生：酯、内酯、酰胺、苷类药物易水解酯、内酯、酰胺、苷类药物易水解l例阿司匹林、青霉素类、阿托品、维生素例阿司匹林、青霉素类、阿托品、维生素E E等等酚羟基、巯基、亚硝基、醛基、共轭

5、双键等药物酚羟基、巯基、亚硝基、醛基、共轭双键等药物易被氧化。易被氧化。l例麻醉乙醚、肾上腺素类、维生素例麻醉乙醚、肾上腺素类、维生素A A、维生素、维生素C C杂质的种类杂质的种类按来源分按来源分 一般杂质一般杂质自然界分布较广，生产和自然界分布较广，生产和贮藏过程中易引入的杂质。贮藏过程中易引入的杂质。 特殊杂质特殊杂质个别药物生产和贮藏过程个别药物生产和贮藏过程中引入的杂质。中引入的杂质。 按理化性质分按理化性质分 无机杂质、有机杂质和残留溶剂无机杂质、有机杂质和残留溶剂按毒性分按毒性分 信号杂质（无害，反映工艺水平）信号杂质（无害，反映工艺水平） 毒性杂质（对人体有害）毒性杂质（对人体

6、有害）还有一类杂质为无效、低效的异构体或晶型还有一类杂质为无效、低效的异构体或晶型 光学异构体（左旋体，右旋体）光学异构体（左旋体，右旋体） 例肾上腺素为左旋体，其升压作用是右旋体例肾上腺素为左旋体，其升压作用是右旋体的的12倍，盐酸普萘洛尔左旋异构体的倍，盐酸普萘洛尔左旋异构体的 - 受受体阻断作用比右旋体大体阻断作用比右旋体大60倍。倍。 几何异构体（顺式体，反式体）几何异构体（顺式体，反式体） 例维生素例维生素A全反式的生物活性最高全反式的生物活性最高 多晶型（晶型不同，理化常数，、溶解度、稳多晶型（晶型不同，理化常数，、溶解度、稳定性、体内吸收和疗效也不同）定性、体内吸收和疗效也不同）

7、 例无味氯霉素有多晶现象，例无味氯霉素有多晶现象，B晶型易被酯酶晶型易被酯酶水解而吸收，为有效晶型，而水解而吸收，为有效晶型，而A晶型则不易晶型则不易被酯酶水解，活性很低。被酯酶水解，活性很低。注意：药典中规定的检查项目，是指正常生产注意：药典中规定的检查项目，是指正常生产和储存中可能产生并需控制的杂质。药典中未规和储存中可能产生并需控制的杂质。药典中未规定的杂质，一般有以下几种情况：定的杂质，一般有以下几种情况：指正常生产和储存中不可能引入；指正常生产和储存中不可能引入；含量甚微，对人体和药物质量无不良影响；含量甚微，对人体和药物质量无不良影响；限量要求较宽，现有产品均能达到；限量要求较宽，

8、现有产品均能达到；对杂质认识不足，有待于积累资料。对杂质认识不足，有待于积累资料。杂质的限量检查限量检查（限量检查（Limit testLimit test）药物中的杂质在不影响疗效和不发生毒性的药物中的杂质在不影响疗效和不发生毒性的原则下允许有一定限量。通常不测定其准确原则下允许有一定限量。通常不测定其准确含量，只检查杂质的量是否超过限量，所以含量，只检查杂质的量是否超过限量，所以称这种检查方法为杂质的限量检查。称这种检查方法为杂质的限量检查。杂质的检查方法：杂质的检查方法：取一定量杂质对照品与一定量供试品在相同取一定量杂质对照品与一定量供试品在相同条件下处理后，比较结果，以确定杂质含量条件

9、下处理后，比较结果，以确定杂质含量是否超过规定量。是否超过规定量。 对照对照 样品样品样品管所显颜色或浑浊浅于对照管样品管所显颜色或浑浊浅于对照管日光日光平平行行操操作作纳氏比色管纳氏比色管杂质的限量是指药物中所含杂质的最大允许量，杂质的限量是指药物中所含杂质的最大允许量，通常用通常用%，百万分之几表示。，百万分之几表示。对人体有毒的杂质控制较严，对人体有毒的杂质控制较严，例：例：l砷砷-规定一般不得过百万分之十规定一般不得过百万分之十l重金属重金属-易在体内积蓄，引起慢性中毒，易在体内积蓄，引起慢性中毒，一般规定不得过百万分之五十。一般规定不得过百万分之五十。药物中杂质的限量除考虑杂质本身的

10、性质外，药物中杂质的限量除考虑杂质本身的性质外，还要结合实际的生产水平，参考各国药典的标还要结合实际的生产水平，参考各国药典的标准来制订。准来制订。药物中杂质的限量计算药物中杂质的限量计算杂质限量（杂质限量（ L ） = = 杂质最大允许量杂质最大允许量=(=(浓度浓度C 体积体积V) )标准液标准液L = C V / S 100%杂质最大允许量杂质最大允许量供试品量（供试品量（ S ） 100% 100%例例1 1 对乙酰氨基酚中检查氯化物。取对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚中检查氯化物。取对乙酰氨基酚2.02.0g,g,加水加水100100ml,ml,加热溶解后冷却，滤过，取滤液加热溶解后冷却，滤

11、过，取滤液2525mlml，依法检查氯化物，发生的浑浊与标准氯化钠，依法检查氯化物，发生的浑浊与标准氯化钠溶液溶液5.05.0ml ml （每（每1 1ml ml 相当于相当于1010 g g 的的ClCl）制成的）制成的对照液比较，不得更浓。问氯化物的限量是多少？对照液比较，不得更浓。问氯化物的限量是多少？ L=CL=CV/S V/S 100% 100% =(10 =(10 5)/(2 5)/(2 25 /100 25 /100 10 106 6 ) ) 100% 100% =50/500000 =50/500000 100% =0.01%100% =0.01%例例2 2 葡萄糖中检查重金属

12、。取葡萄糖葡萄糖中检查重金属。取葡萄糖4.04.0g g，加水，加水2323mlml溶解后，加醋酸盐缓冲液溶解后，加醋酸盐缓冲液( (pH3.5)2mlpH3.5)2ml，依，依法检查重金属，含重金属不得过百万分之五。问法检查重金属，含重金属不得过百万分之五。问应取标准铅溶液多少应取标准铅溶液多少mlml（每（每1 1ml ml 相当于相当于1010 g g的的PbPb）? ?w V=LV=LS/CS/C V =(5 V =(510106 6 4.0)/(10 4.0)/(10 10 106 6 ) ) V =20/10=2(ml) V =20/10=2(ml)例例3 3 溴化钠中砷盐检查，规

13、定含砷量不得过溴化钠中砷盐检查，规定含砷量不得过0.0004%0.0004%，药典规定，取标准砷液，药典规定，取标准砷液2.02.0mlml（1 1 gAs/mlgAs/ml）。应取供试品多少克？）。应取供试品多少克？ L=CL=CV/S V/S 100%100% 0.0004%=2 0.0004%=21 1 10 10-6 -6 /S/S 100%100% S=0.000002/0.000004=0.5 S=0.000002/0.000004=0.5（g g）例例4 4 磷酸可待因中检查吗啡。取本品磷酸可待因中检查吗啡。取本品0.100.10g g，加，加盐酸溶液（盐酸溶液（91000910

14、00）使溶解成）使溶解成5 5mlml，加亚硝酸，加亚硝酸钠试液钠试液2 2mlml，放置，放置1515分钟，加氨试液分钟，加氨试液3 3mlml，所显，所显颜色与吗啡溶液颜色与吗啡溶液 取无水吗啡取无水吗啡2.02.0mgmg，加盐酸溶液，加盐酸溶液（ 9 1000 9 1000 ）使溶解成）使溶解成100100mlml5.0ml5.0ml用同一方用同一方法制成的对照液比较，不得更深。问限量为多少？法制成的对照液比较，不得更深。问限量为多少？ L=C L=CV/SV/S100%100% L=(2.0 L=(2.05.0/100)/0.10 5.0/100)/0.10 10001000100%

15、100% L=0.1/100 L=0.1/100100%100%=0.1%=0.1%杂质检查也有不用标准溶液进行对比的，而是杂质检查也有不用标准溶液进行对比的，而是采用供试品溶液中加入一定试剂后，在一定反应采用供试品溶液中加入一定试剂后，在一定反应条件下观察有无正反应出现，即以条件下观察有无正反应出现，即以 该实验条件该实验条件下的反应灵敏度来控制杂质限量。下的反应灵敏度来控制杂质限量。也有采用以纯水为对照的。也有采用以纯水为对照的。例如例如 NaClNaCl中中BaBa2 2 、CaCa2 2 、 SOSO4 42-2-的检查，的检查，分别采用了上述三种检查方法。分别采用了上述三种检查方法。

16、Ba Ba 2 2 的检查的检查（纯水对照）（纯水对照）NaCl 4gNaCl 4g水水过滤过滤量量H2SO4 2ml 量量H2O 2ml 同同样样澄澄清清Ca 2 的检查（反应灵敏度）的检查（反应灵敏度）NaCl 2gNaCl 2g水水NHNH3 3HH2 2OO（NHNH4 4）2 2C C2 2O O4 4CaCCaC2 2OO4 4 （5min 5min 内不应有沉淀产生）内不应有沉淀产生）SO42-的检查（杂质对照品对照）的检查（杂质对照品对照）NaCl 2g NaCl 2g 水水 BaBa2 2 BaSOBaSO4 4 标准标准SOSO4 42-2-1 1ml ml 水水 BaBa

17、2 2 BaSOBaSO4 4 一般杂质的检查方法（一般杂质的检查方法（P.118P.118）氯化物检查法氯化物检查法原理：原理：ClCl+Ag+AgAgClAgCl（白色）（白色）加硝酸的作用：加硝酸的作用：1 1）加速）加速AgClAgCl生成，并产生较好的乳生成，并产生较好的乳浊；浊；2 2）可避免）可避免AgAg2 2COCO3 3, Ag, Ag2 2O, O, AgAg3 3POPO4 4等的形成，消除这些阴离子的干等的形成，消除这些阴离子的干扰。扰。ClCl的浓度：的浓度： 50-80 50-80 g/50mlg/50ml为宜。相为宜。相当于标准当于标准NaCl NaCl 溶液溶

18、液(10(10 g Clg Cl /ml) /ml) 5.0-8.0ml5.0-8.0ml供试品处理供试品处理供试品不澄明：用含硝酸的蒸馏水洗净滤纸中供试品不澄明：用含硝酸的蒸馏水洗净滤纸中ClCl，至洗液遇，至洗液遇AgNOAgNO3 3不产生浑浊，取该滤纸过不产生浑浊，取该滤纸过滤供试液。滤供试液。供试品有色：供试品有色：v内消色法：供试品溶液等分为二等份内消色法：供试品溶液等分为二等份 1 1份份AgNOAgNO3 3反复过滤至澄清标准反复过滤至澄清标准ClCl 对对照照 另另1 1份份 AgNOAgNO3 3 样品样品比较对照与样品的浑浊程度比较对照与样品的浑浊程度v外消色法外消色法

19、例例 KMnOKMnO4 4中中ClCl- -的检查的检查样品（紫色）乙醇样品（紫色）乙醇颜色消退后再检查颜色消退后再检查供试品（溴化物、碘化物）有干扰供试品（溴化物、碘化物）有干扰I I- -（BrBr- -）HH+ +HH2 2OO2 2 I I2 2（BrBr2 2），溶液无色澄明后再依法检查溶液无色澄明后再依法检查ClCl- -ClCl的存在状态的存在状态溶于水的药物溶于水的药物直接测定直接测定不溶于水的药物：不溶于水的药物：加水振摇，过滤，取滤液检查。加水振摇，过滤，取滤液检查。若药物在稀乙醇或丙酮中有一定溶解度，若药物在稀乙醇或丙酮中有一定溶解度，可加稀乙醇或丙酮溶解后再检查。可加

20、稀乙醇或丙酮溶解后再检查。也可采用超声，加热等方法，使也可采用超声，加热等方法，使ClCl溶溶解，取滤液或上清液进行检查。解，取滤液或上清液进行检查。有机氯有机氯有机破坏有机破坏二、硫酸盐的检查二、硫酸盐的检查原理：原理：SOSO4 42 2 + Ba+ Ba2+2+BaSOBaSO4 4(白色白色) )SOSO4 42 2的浓度：的浓度：0.1-0.50.1-0.5mg SOmg SO4 42 2 /50 ml/50 ml为为宜，相当于标准宜，相当于标准K K2 2SOSO4 4溶液（溶液（0.10.1mg SOmg SO4 42 2 /ml /ml ）1.0-5.0ml1.0-5.0ml。

21、酸及酸度：加酸及酸度：加HClHCl使成酸性，可防止使成酸性，可防止BaCOBaCO3 3,Ba,Ba3 3(PO(PO4 4) )2 2 形成。形成。v注意注意溶液浑浊或有色：处理方法与溶液浑浊或有色：处理方法与ClCl检查法相检查法相似。似。三、铁盐检查法三、铁盐检查法原理：原理： FeFe3+3+ + 6SCN Fe(SCN) + 6SCN Fe(SCN)6 6 3 3 （红色）（红色） FeFe3+3+的浓度：的浓度：10-5010-50 g Feg Fe3+3+ /50ml /50ml为宜，相当为宜，相当于标准硫酸铁铵于标准硫酸铁铵 FeNH4(SO4)2 12H2O 1.0-1.0

22、-5.05.0ml (10ml (10 gFegFe3+ 3+ / / mlml) )反应在反应在HClHCl酸性中进行，可防止酸性中进行，可防止FeFe3+3+水解，同时水解，同时可避免弱酸盐如可避免弱酸盐如 AcAc，POPO4 433，AsOAsO4 43 3 等的等的干扰。干扰。注意注意 标准硫酸铁铵配制时为防止水解，需加适量硫酸。标准硫酸铁铵配制时为防止水解，需加适量硫酸。反应可逆，加过量试剂可提高反应灵敏度。反应可逆，加过量试剂可提高反应灵敏度。FeFe的存在形式：的存在形式： FeFe2+2+无此反应，需加入氧化剂过无此反应，需加入氧化剂过硫酸氨或硝酸（需加热煮沸除去硫酸氨或硝酸

23、（需加热煮沸除去NONO）氧化）氧化FeFe2+2+ FeFe3+3+供试品与对照品色调不一致：可加正丁醇或异戊供试品与对照品色调不一致：可加正丁醇或异戊醇提取。醇提取。环状结构的有机药物：需经炽灼破坏环状结构的有机药物：需经炽灼破坏例例 枸橼酸钠中铁的检查枸橼酸钠中铁的检查 为避免枸橼酸与铁络合，形成有色配位化合物而干为避免枸橼酸与铁络合，形成有色配位化合物而干扰比色，需加盐酸扰比色，需加盐酸3 3mlml，但又由于，但又由于 FeFe3+3+ +HClHFeCl +HClHFeCl6 62-2-，使使 FeFe3+3+ + +SCNSCN- - FeFe（SCNSCN）6 63- 3- 向

24、左进行，红色变浅，故用正丁醇提取红色生成物，向左进行，红色变浅，故用正丁醇提取红色生成物，因为其在正丁醇等有机溶剂中有较大的溶解度，能因为其在正丁醇等有机溶剂中有较大的溶解度，能增加颜色深度，并可排除其它干扰物的影响。增加颜色深度，并可排除其它干扰物的影响。四、重金属（四、重金属（Heavy Metals）检查法）检查法重金属是指在实验条件下能与重金属是指在实验条件下能与S S2 2作用显色的作用显色的金属杂质金属杂质( (Ag , Pb, Hg, Cu, Cd, Sn, BiAg , Pb, Hg, Cu, Cd, Sn, Bi等），等），以铅为代表。中国药典采用四种方法测定：以铅为代表。中

25、国药典采用四种方法测定： 第一法第一法 直接测定法。直接测定法。原理原理：CH3CSNH2 + H2O CH3CONH2 +H2SH2S = 2H+ + S2Pb2+ + S2 PbS（黄（黄-黑色）黑色）酸度：本反应的酸度：本反应的pHpH对显色有很大影响，在对显色有很大影响，在pH3-pH3-3.53.5时，时，PbSPbS较完全，酸度增大，呈色变浅，甚较完全，酸度增大，呈色变浅，甚至不呈色至不呈色. .因此用强酸处理过的溶液必须先用因此用强酸处理过的溶液必须先用NHNH3 3HH2 2OO调调pHpH值至中性。值至中性。以以Pb(NOPb(NO3 3) )2 2为标准为标准( (为防止水

26、解，需先配成储备为防止水解，需先配成储备液，临用时再稀释。用量：液，临用时再稀释。用量：10-20 10-20 g Pbg Pb2+2+/27ml/27ml为宜。相当于标准为宜。相当于标准PbPb2+2+溶液溶液( (1010 g Pbg Pb2+2+/ ml)1ml-/ ml)1ml-2ml2ml. .第二法第二法 炽灼破坏后测定法炽灼破坏后测定法适合于含芳环或杂环等能与重金属离子形成配适合于含芳环或杂环等能与重金属离子形成配位化合物的有机药物。采用三酸处理，用氨水位化合物的有机药物。采用三酸处理，用氨水调调pHpH值至中性，然后按第一法测定。值至中性，然后按第一法测定。方法：方法：1.1.

27、 取炽灼残渣项下遗留的残渣（取炽灼残渣项下遗留的残渣（H2SO4处理）处理）2.2. 残渣残渣+ +HNOHNO3 3加热处理，蒸干（除加热处理，蒸干（除NONO） 残渣残渣3.3. 残渣残渣+HCl +HCl 溶解溶解加热蒸干（除残留加热蒸干（除残留HCl HCl ） 4.残渣残渣+水水溶解溶解+NH3试液试液中和中和 +醋酸醋酸盐缓冲液盐缓冲液 转移至比色管中转移至比色管中+水水 25ml，作为样品管。作为样品管。 5.另取同样量的酸碱，置蒸发皿中蒸干另取同样量的酸碱，置蒸发皿中蒸干+ +醋醋酸盐缓冲液酸盐缓冲液+ +水水 转移至比色管中转移至比色管中+ +标标准准PbPb溶液溶液+ +水

28、水 25 25mlml，作为标准管。，作为标准管。 6.取样品管和标准管按第一法检查。取样品管和标准管按第一法检查。第三法第三法 在碱性条件下，以硫化钠为试液，适在碱性条件下，以硫化钠为试液，适合于不溶于稀酸而溶于碱的药物。合于不溶于稀酸而溶于碱的药物。取供试品适量取供试品适量+ +NaOH+HNaOH+H2 2OO溶解溶解+ +NaNa2 2S S试液，试液，与一定量标准铅液同法处理后的颜色比较。与一定量标准铅液同法处理后的颜色比较。第四法第四法 微孔滤膜过滤法，适合于重金属含量微孔滤膜过滤法，适合于重金属含量低的药物。低的药物。取供试液取供试液1010ml+ml+醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液2

29、ml + 2ml + 硫代乙酰硫代乙酰胺胺1 1mlml摇匀，放置摇匀，放置1010minmin，用，用 50 50mlml注射器注射器转移至滤器中进行压滤，取下滤膜，干燥，比转移至滤器中进行压滤，取下滤膜，干燥，比较生成的斑点颜色。较生成的斑点颜色。上盖上盖上盖上盖垫圈垫圈滤膜滤膜辅助辅助 滤板滤板连接头连接头滤器下部支滤器下部支撑器撑器滤器下部支滤器下部支撑器撑器w 注意注意v供试品溶液有色：在对照管中加少量稀焦糖溶供试品溶液有色：在对照管中加少量稀焦糖溶液，（也可加其他无干扰的指示剂等）使两管液，（也可加其他无干扰的指示剂等）使两管色调一致。如果外消色法不能消除干扰，可采色调一致。如果外

30、消色法不能消除干扰，可采用内消色法。用内消色法。v供试品含有微量供试品含有微量FeFe3+3+ ：会氧化：会氧化HH2 2S S析出析出SS，可加可加VitC 0.5-1.0gVitC 0.5-1.0g，使，使FeFe3+3+ FeFe2+2+ ，同时，同时在对照管中加等量的在对照管中加等量的VitCVitC，再依法测定。，再依法测定。v供试品为供试品为FeFe3+ 3+ ：可利用：可利用FeFe3+3+在比重在比重1.1.103-103-1.1051.105的的HClHCl（9mlHCl+6ml9mlHCl+6ml水）中成为水）中成为HFeClHFeCl6 622，用乙醚提取，除去大部分，用

31、乙醚提取，除去大部分FeFe3+3+ ，再，再加加KCNKCN，将残留的，将残留的FeFe3+3+掩蔽起来。掩蔽起来。v药物本身能生成不溶性硫化物时，可加入适当药物本身能生成不溶性硫化物时，可加入适当掩蔽剂，如掩蔽剂，如KCNKCN，酒石酸等，使与药物形成稳定，酒石酸等，使与药物形成稳定的络合物。的络合物。v药典规定的一、二、四法是在酸性溶液中，以药典规定的一、二、四法是在酸性溶液中，以硫代乙酰胺为显色剂；而三法则在碱性溶液中以硫代乙酰胺为显色剂；而三法则在碱性溶液中以硫化钠为显色剂。两种情况不能混扰。硫化钠为显色剂。两种情况不能混扰。w UspUsp法法供试品供试品 对照品对照品 同法操作同

32、法操作 监控管（监控管（ + + ）w BPBP法法供试品供试品1212ml ml 对照品对照品1010ml ml +2ml +2ml 水水1010ml ml +2ml +2ml 空白管用来检查对照管的呈色是否正常。空白管用来检查对照管的呈色是否正常。uJPJP法法用硫化钠显色。用硫化钠显色。 五、砷盐（五、砷盐（Arsenic）检查法）检查法第一法第一法 古蔡法古蔡法原理原理: :AsOAsO3 333+ 3Zn +9H+ 3Zn +9H+ + AsH AsH3 3+Zn+Zn2+2+AsHAsH3 3+ 2HgBr+ 2HgBr2 2 （试纸）（试纸） 砷斑砷斑与与2 2mlml标准砷溶液

33、同法操作。标准砷溶液同法操作。 砷斑：砷斑： As(HgBr)As(HgBr)3 3 ( (黄色黄色) )； AsH(HgBr)AsH(HgBr)2 2( (棕色棕色) )； AsAs2 2HgHg3 3 ( (棕黑色棕黑色) )KIKI和和SnClSnCl2 2的作用：的作用：AsOAsO4 433+ I+ I AsO AsO3 333+ I+ I2 24 4 I I+ Zn+ Zn2+ 2+ ZnI ZnI4 422I I2 2 + Sn+ Sn2+ 2+ 2 I2 I+ Sn+ Sn4+4+AsOAsO4 433+ Sn+ Sn2+ 2+ AsO AsO3 33 3 + Sn+ Sn4+

34、4+SnClSnCl2 2 + Zn Zn-Sn+ Zn Zn-Sn齐齐SnClSnCl2 2和和KIKI还可抑制还可抑制SbHSbH3 3的生成的生成醋酸铅棉花的作用醋酸铅棉花的作用: :ZnZn粒及供试品中可能含有少量粒及供试品中可能含有少量S S22, ,在酸性条在酸性条件下产生件下产生 HH2 2SS，与，与HgBrHgBr2 2作用，生成作用，生成HgSHgS，干扰测定，故在测砷管中部，用，干扰测定，故在测砷管中部，用Pb(Ac)Pb(Ac)2 2棉花填充，以消除干扰棉花填充，以消除干扰 ： H H2 2SS + + Pb(Ac)Pb(Ac)2 2 PbS PbS 沉积在棉花上。沉积

35、在棉花上。标准砷液（标准砷液（AsAs2 2OO3 3溶液，溶液，1 1 gAs/mlgAs/ml） 药典药典 规定为规定为2 2mlml。测砷瓶测砷瓶测砷管测砷管Hg(Br)2试纸试纸Pb(Ac)2棉花棉花玻璃玻璃试管试管古蔡法古蔡法Ag(DDC)反应液反应液Ag(DDC)法法第二法第二法 二乙基二硫代氨基甲酸银法二乙基二硫代氨基甲酸银法 简称简称 Ag(DDC)Ag(DDC)法法 AsHAsH3 3+ 6Ag(DDC) +3+ 6Ag(DDC) +3吡啶吡啶 As (DDC) As (DDC) 3 3 + 6Ag + 6Ag （红色胶态银）（红色胶态银） + 3+ 3吡啶吡啶 HDDCHD

36、DC于于510510nmnm波长处测定吸收度，以波长处测定吸收度，以Ag(DDC) Ag(DDC) 溶液为溶液为空白。空白。C2H5C2H5NCSSAg本法灵敏度高（本法灵敏度高（0.50.5 g Asg As3+3+/30ml/30ml），在），在1 110 10 g As g As3+3+/40ml/40ml浓度范围内线性关系良好，呈色浓度范围内线性关系良好，呈色可稳定可稳定2 2h h，重现性好，可采用标准对照法进行定，重现性好，可采用标准对照法进行定量。量。本反应可逆，加入有机碱使与本反应可逆，加入有机碱使与HDDCHDDC结合，有利结合，有利于反应向右定量进行完全。于反应向右定量进行

37、完全。有机碱：吡啶（有机碱：吡啶（USPUSP法）法） 三乙胺三乙胺- -氯仿溶液（氯仿溶液（ChPChP法）法） 三乙醇胺、麻黄碱等三乙醇胺、麻黄碱等w注意注意在砷盐测定中，无论采用哪种方法，遇到在砷盐测定中，无论采用哪种方法，遇到下列供试品时，需采用不同方法进行处理下列供试品时，需采用不同方法进行处理后再进行检查。后再进行检查。供试品为硫化物干扰测定。供试品为硫化物干扰测定。 （S S22，SOSO3 322，S S2 2OO3 322）+H+H+ +HH2 2SS或或 SOSO2 2+HgBr+HgBr2 2试纸试纸HgSHgS或或HgHg 可先加可先加HNOHNO3 3处理，使硫化物氧

38、化成处理，使硫化物氧化成 SOSO4 42 2, , 以消除干扰。以消除干扰。例例 硫代硫酸钠硫代硫酸钠。供试品为铁盐：消耗供试品为铁盐：消耗KIKI，SnClSnCl2 2 并并 氧化氧化AsHAsH3 3，可先加酸性，可先加酸性SnClSnCl2 2，使使FeFe3+3+ Fe Fe2+2+，再，再进行检查。进行检查。 例例 枸橼酸铁铵枸橼酸铁铵环状药物须先进行有机破坏，常用方法有：环状药物须先进行有机破坏，常用方法有： Ca(OH)Ca(OH)2 2例例 酚磺酞、呋塞米酚磺酞、呋塞米 无水无水 NaNa2 2COCO3 3例例 苯甲酸钠、对氨基水苯甲酸钠、对氨基水 杨酸钠杨酸钠 Br B

39、r2 2水水例例 葡萄糖葡萄糖 六、炽灼残渣（六、炽灼残渣（Residue on ignition） 炽灼残渣也称硫酸盐灰分炽灼残渣也称硫酸盐灰分-有机药物经炽灼有机药物经炽灼炭化，加硫酸湿润，低温加热至硫酸蒸气除炭化，加硫酸湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，于高温（尽后，于高温（700800）炽灼灰化逸出，）炽灼灰化逸出，残留下非挥发性无机杂质（金属氧化物或无残留下非挥发性无机杂质（金属氧化物或无机盐类）成为硫酸盐。机盐类）成为硫酸盐。 限量一般控制在限量一般控制在0.1-0.2%, 0.1-0.2%, 取样量为取样量为1-21-2g g。注意：注意：遗留的炽灼残渣需留作重金属检查时，遗留的炽

40、灼残渣需留作重金属检查时， 炽灼温炽灼温度应控制在度应控制在500-600500-600C C炽灼至恒重的第二次称重应在规定温度继续炽炽灼至恒重的第二次称重应在规定温度继续炽灼灼3030分钟以上。分钟以上。恒重恒重连续二次称重重量差连续二次称重重量差0.30.3mgmg。含氟药物对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚。含氟药物对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚。（p.p.128128上的其他事项在工作中极其有用上的其他事项在工作中极其有用标记坩标记坩埚埚） 七、干燥失重（七、干燥失重（Loss on drying） 是指药物在规定的条件下经干燥后所减失的重量。是指药物在规定的条件下经干燥后所减失的重量。主要指

41、水分，也包括其他挥发性杂质。测定方法有：主要指水分，也包括其他挥发性杂质。测定方法有： 常压恒温干燥法（常压恒温干燥法（105 105 ） 适用于受热较稳定的药物。将样品（研细）平铺适用于受热较稳定的药物。将样品（研细）平铺于扁称量瓶中，厚度于扁称量瓶中，厚度5 5mmmm。干燥时间一般在达。干燥时间一般在达到指定温度后干燥到指定温度后干燥2-42-4h h，称重，再干燥，直至恒，称重，再干燥，直至恒重。重。注意：注意： 在干燥至恒重的第二次及以后各次称重均在干燥至恒重的第二次及以后各次称重均应在规定温度下干燥应在规定温度下干燥1 1小时后进行。小时后进行。对于含水量大且对于含水量大且mpmp

42、又低的样品，须先在低又低的样品，须先在低温下将大部分水分除去后，再升温至规定温温下将大部分水分除去后，再升温至规定温度，干燥至恒重。这样可避免因表面融化，度，干燥至恒重。这样可避免因表面融化，结膜，而使水分不易挥发。结膜，而使水分不易挥发。 例例 NaNa2 2S S2 2O O3 3干燥剂干燥法干燥剂干燥法本法适用于受热易分解或易挥发的药物。将样品置本法适用于受热易分解或易挥发的药物。将样品置于存放有干燥剂的干燥器内，干燥至恒重。常用干于存放有干燥剂的干燥器内，干燥至恒重。常用干燥剂有：硅胶、硫酸、无水氯化钙、五氧化二磷等。燥剂有：硅胶、硫酸、无水氯化钙、五氧化二磷等。其中五氧化二磷吸水效力

43、最强，但其中五氧化二磷吸水效力最强，但P P2 2OO5 5吸水后产生吸水后产生HH3 3POPO4 4，若样品对酸不稳定，可能会受影响。，若样品对酸不稳定，可能会受影响。减压干燥法与恒温减压干燥法与恒温减压干燥法减压干燥法适用于适用于mpmp低，受热不稳定及难除去水分的药低，受热不稳定及难除去水分的药物。减压干燥时可用减压干燥器或恒温干燥物。减压干燥时可用减压干燥器或恒温干燥箱，一般压力箱，一般压力2.672.67KPa20mmHgKPa20mmHg 。通常分析一个药物时，干燥失重与含量测定通常分析一个药物时，干燥失重与含量测定应同时进行，然后根据干燥失重应同时进行，然后根据干燥失重%，将样

44、品，将样品折算成干燥品，再计算含量。折算成干燥品，再计算含量。w 热分析法（热分析法（Thermal analysis）(P.113)热分析是指在程序控制温度下，测量物质的热分析是指在程序控制温度下，测量物质的物理、化学变化与温度关系的一类技术。物理、化学变化与温度关系的一类技术。物质在加热（冷却）过程中，往往会脱水、物质在加热（冷却）过程中，往往会脱水、挥发或发生相变（熔化、冷凝、升华、沸腾）挥发或发生相变（熔化、冷凝、升华、沸腾）及发生分解、氧化、还原等化学变化，热分及发生分解、氧化、还原等化学变化，热分析就是将这些变化作为温度的函数来进行研析就是将这些变化作为温度的函数来进行研究和测定。

45、究和测定。 常用方法有：常用方法有：热重分析（热重分析（Thermogravimetric analysisThermogravimetric analysis，TGATGA） 是测量物质在加热过程中的质量是测量物质在加热过程中的质量变化。并从这种变化来研究物质在加热过程中变化。并从这种变化来研究物质在加热过程中所产生的具有质量变化的反应所产生的具有质量变化的反应 。 方法：将样品置热天平中，按一定速度升温，方法：将样品置热天平中，按一定速度升温，记录样品重量随温度的变化，即热重曲线。记录样品重量随温度的变化，即热重曲线。WT反应区间反应区间= Tf Ti减失重量减失重量=W1-W2ABCTi

46、TfW1W2差示热分析法（差示热分析法（Differential thermal Differential thermal analysisanalysis，DTADTA）基于药物在加热过程中，基于药物在加热过程中，由于发生由于发生熔化、冷凝、升华、沸腾及发生分解、熔化、冷凝、升华、沸腾及发生分解、氧化、还原等氧化、还原等物理或化学变化，同时拌随着吸热物理或化学变化，同时拌随着吸热或放热，势必影响温度，通过测定供试品与或放热，势必影响温度，通过测定供试品与惰性惰性参比物质参比物质之间温差随温度或时间的变化。典型的之间温差随温度或时间的变化。典型的差热曲线如下：差热曲线如下：TT+放热峰放热峰吸

47、热峰吸热峰峰宽峰高外推起始点外推起始点（与熔点相当）（与熔点相当）在在DTADTA曲线中，化学变化峰形较宽，物理变化曲线中，化学变化峰形较宽，物理变化峰形尖锐。因此，根据峰形、峰数目及峰位置峰形尖锐。因此，根据峰形、峰数目及峰位置可对药物定性，估测纯度。可对药物定性，估测纯度。差示扫描热量法（差示扫描热量法（ differential scanning differential scanning calorimetrycalorimetry，DSCDSC）-在分析过程中保持供试在分析过程中保持供试品与参比物的温度相同，测定维持在相同温度时品与参比物的温度相同，测定维持在相同温度时所需的能量差随

48、温度的变化。所需的能量差随温度的变化。DSCDSC法峰的位置、形状、数目与物质的性质有法峰的位置、形状、数目与物质的性质有关，可用来鉴别物质，而峰的面积与反应热焓关，可用来鉴别物质，而峰的面积与反应热焓有关，可用来定量地估计参与反应的物质的量有关，可用来定量地估计参与反应的物质的量或测定热化学参数。或测定热化学参数。 （测定熔点）（测定熔点）实测熔点163167 2022-5-1056八、有机溶剂残留量测定法（八、有机溶剂残留量测定法（p.129）用以检查药物在合成过程中引入的有害有机溶剂。用以检查药物在合成过程中引入的有害有机溶剂。中国药典（中国药典（2010年版）中，残留溶剂的控制种类年版

49、）中，残留溶剂的控制种类和限度与和限度与人用药品注册技术要求国际协调会人用药品注册技术要求国际协调会（ICH）一致。按有机溶剂毒性的程度分为四类：）一致。按有机溶剂毒性的程度分为四类：第一类第一类应该避免使用应该避免使用苯、四氯化碳、苯、四氯化碳、1,2-二氯乙烷、二氯乙烷、 1,1-二氯乙烯、二氯乙烯、1,1,1-三氯乙烷、三氯乙烷、第二类第二类应该限制使用应该限制使用乙腈、三氯甲烷、二氯甲烷、环己烷、四氢呋喃乙腈、三氯甲烷、二氯甲烷、环己烷、四氢呋喃1,4-二氧六环、吡啶、甲醇、甲苯、二甲苯等二氧六环、吡啶、甲醇、甲苯、二甲苯等 第三类第三类GMPGMP或者其他质控要求限制使用或者其他质控

50、要求限制使用乙酸、丙酮、正丁醇、乙酸丁酯、二甲亚砜、乙醇、乙酸、丙酮、正丁醇、乙酸丁酯、二甲亚砜、乙醇、乙酸乙酯、乙醚、甲酸乙酸、甲酸、正庚烷、丁酮、乙酸乙酯、乙醚、甲酸乙酸、甲酸、正庚烷、丁酮、乙酸甲酯、异丁醇、正丙醇、异丙醇等乙酸甲酯、异丁醇、正丙醇、异丙醇等 第四类第四类尚无足够毒理学资料尚无足够毒理学资料石油醚、三氯乙酸、三氟乙酸、甲基四氢呋喃等石油醚、三氯乙酸、三氟乙酸、甲基四氢呋喃等l中国药典对残留有机溶剂采用两种方法中国药典对残留有机溶剂采用两种方法测定测定第一法第一法-直接进样法直接进样法l内标法内标法RSD5 %（n=5）l外标法外标法- RSD10 %（n=5）第二法第二法

51、-顶空进样法顶空进样法l可免去样品萃取、浓集等步骤，并可避可免去样品萃取、浓集等步骤，并可避免非挥发性组分对色谱柱的污染，但要免非挥发性组分对色谱柱的污染，但要求待测物有足够的挥发性。求待测物有足够的挥发性。l顶空分析法（顶空分析法（head space chromatography）也称液上气相色谱分析，是指用气相色谱也称液上气相色谱分析，是指用气相色谱法来分析封闭系统中与液体或固体样品相法来分析封闭系统中与液体或固体样品相平衡的气体的一种方法。平衡的气体的一种方法。恒温水浴样品10-20ml玻璃瓶（具玻璃瓶（具有硅橡胶隔垫片盖）有硅橡胶隔垫片盖）1-2g固体或固体或1-5ml液液体（平衡体

52、（平衡30-60min）恒温水浴恒温水浴样品甲醇，乙醇，丙酮，二氯甲烷，乙酸乙酯，正丁醇甲醇，乙醇，丙酮，二氯甲烷，乙酸乙酯，正丁醇2022-5-1061特殊杂质检查方法（特殊杂质检查方法（P.105）一、色谱分析法一、色谱分析法vTLCTLC法法 杂质对照品法（杂质对照品法（A A） 供试品溶液自身稀释对照法（高低浓度法）（供试品溶液自身稀释对照法（高低浓度法）（B B） 对照物质法（对照物质法（C C） 不允许有杂质斑点（以方法灵敏度来控制杂质量）不允许有杂质斑点（以方法灵敏度来控制杂质量） 样样 对对 样样 对对 样样 对对A B C2022-5-1062vHPLCHPLC（GCGC）法

53、）法 (P.108) (P.108)内标法加校正因子测定法内标法加校正因子测定法有杂质对照品有杂质对照品校正因子测定液校正因子测定液= =杂质对照品内标杂质对照品内标样品测定液样品测定液= =样品同样量内标样品同样量内标分别进样，记录色谱图分别进样，记录色谱图校正因子校正因子F=AF=A内内/ /A A对对mm对对/ /mm内内mm杂杂= =F FA A杂杂/ A/ A内内mm内内杂质限量杂质限量%= %= mm杂杂/ /WW样样100%100%2022-5-1063F=(AF=(A内内/ /A A对对) )(m(m对对/ /mm内内) )mm杂杂= =F F(A(A杂杂/ A/ A内内) )

54、 mm内内对照对照样品样品主成分峰主成分峰2022-5-1064外标法外标法有杂质对照品且进样量能精确控制有杂质对照品且进样量能精确控制mm杂杂= = A A杂杂/ A/ A对对mm对对杂质限量杂质限量%= %= mm杂杂/ /WW样样100%100%杂质对照品杂质对照品样品样品2022-5-1065不不加校正因子的加校正因子的主成分自身对照法主成分自身对照法A杂总杂总/A自自C自自/取样取样100%=杂质杂质%样品测定液样品测定液 1 2 3A杂总杂总=A1A2A3自身对照液自身对照液（1%）加校正因子的加校正因子的主成分自身对照法主成分自身对照法略（略（p.108p.108）2022-5-

55、1066峰面积归一化法峰面积归一化法A杂总杂总/A总总100%=杂杂% A总总=A杂杂1A杂杂2A样样 杂杂1 杂杂2 样样2022-5-1067二、光谱分析法二、光谱分析法（一）、（一）、紫外分光光度法紫外分光光度法利用杂质与药物在紫外利用杂质与药物在紫外区的吸收差异，选用适当波长进行测定。区的吸收差异，选用适当波长进行测定。 例例 1 地蒽酚中二羟基蒽醌的检查，后者的氯地蒽酚中二羟基蒽醌的检查，后者的氯仿溶液在仿溶液在432nm处有最大吸收（处有最大吸收（E=495），而），而样品在该波长处几无吸收。故规定样品在该波长处几无吸收。故规定0.01%的样的样品液在品液在432nm处吸收度不得过

56、处吸收度不得过0.12。例例 2 2 苯丙醇中苯丙酮的检查，前者由后者还原苯丙醇中苯丙酮的检查，前者由后者还原制得。两者吸收峰重叠，但苯丙醇的制得。两者吸收峰重叠，但苯丙醇的A247nm/A258nm 比值（比值（R R）与苯丙酮的含量成直）与苯丙酮的含量成直线关系，控制该比值即可限制苯丙酮的量线关系，控制该比值即可限制苯丙酮的量(%)(%)。247 258 nm苯丙醇苯丙醇苯丙酮苯丙酮R%0.790.5v红外分光光度法红外分光光度法主要用于药物中低效或无效主要用于药物中低效或无效晶型的检查。一些多晶型药物的晶型结构不同，晶型的检查。一些多晶型药物的晶型结构不同，导致红外光谱图中某些特征带的频

57、率、峰形和强导致红外光谱图中某些特征带的频率、峰形和强度出现显著差异，因此可用度出现显著差异，因此可用IRIR光谱法检查低效或光谱法检查低效或无效晶型。无效晶型。 例例 甲苯咪唑中甲苯咪唑中A A晶型的检查晶型的检查 晶型晶型 640 640cmcm-1-1 662cm 662cm-1-1 A A型（无效）型（无效） 强强 弱弱 C C型型 弱弱 强强当样品中含有当样品中含有A A晶型时，两波长处吸收度比值发生晶型时，两波长处吸收度比值发生变化。变化。l 中国药典方法：中国药典方法：l样品样品2525mgmg和含和含10%10%A A晶型对照品晶型对照品2525mgmg，同同法操作。法操作。记

58、录记录620-620-803803cmcm范围的范围的IRIR图谱，图谱，l计算两波数处吸收度比计算两波数处吸收度比值值R=DR=D640640/D/D662662lR R样样R R对对，则样品中，则样品中A A晶晶型含量在型含量在10%10%以下以下662640v原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法由待检元素灯发出的由待检元素灯发出的特征谱线通过供试品蒸气时，被蒸气中待检元特征谱线通过供试品蒸气时，被蒸气中待检元素的基态原子所吸收，测定辐射光强度减弱的素的基态原子所吸收，测定辐射光强度减弱的程度，求出供试品中待检元素含量，其遵守一程度，求出供试品中待检元素含量，其遵守一般分光光度法的吸收定律。般分光光度法的吸收定律。 本法含量测定方法有：本法含量测定方法有： 标准曲线法，标准加入法标准曲线法，标准加入法三、化学分析法三、化学分析法 酸碱性差异酸碱性差异（p.116） 规定消耗滴定剂的体积规定消耗滴定剂的体积 pH值法值法 指示剂法指示剂法 例例 己酸羟孕酮的己酸羟孕酮的“酸度酸度”检查：取检查：取0.2g，加中，加中性乙醇溶解，溴麝香草酚蓝为指示剂，用性乙醇溶解，溴麝香草酚蓝为指示剂，用0.02mol/L氢氧化钠滴定液滴定至显微蓝色，氢氧化钠滴定液滴定至显微蓝色，消耗氢氧化钠不得过消耗氢氧化钠不得过0.50ml。 （本法主要检查正己酐、对甲苯磺酸，