医学科研(2006-11)

1、医学科研的基本程序与方法科学研究：提出问题和解决问题的过程当今世界三大项目 宇宙的探索 基本粒子 生命的奥秘人类的发展、社会的进步伴随着科学的发 展进步一、基本概念科学研究：提出问题和解决问题的过程如何提出问题1、观察与思考美国麻省工学院致谢皮罗： 水流漩涡地球自转1928弗莱明青霉素，英国斯特一、基本概念科学研究：提出问题和解决问题的过程如何提出问题2、继承发展创新苏联巴甫洛夫实验室体液调节一、基本概念1、任务性研究2、学科性研究学科中存在的基本理论 一、基本概念1、提出问题 原则：从大处着眼 小处着手从临床实际出发（做一个有心的人） 尚待改进、需要更新、出现的新问题、新线索、 新启示等从专

2、业知识出发 传统理论受到挑战的，文献上没有解决的，知识 的延伸与发展等二、基本程序（一）选题2、查阅文献他人研究过没有，结果是什么？应对文中的思路方法数据及结论一一推敲，仔细分析建立工作假说：依据科学事实，已知理论知识作出推想，即确立自己的研究方向，然后主动地，有计划地观察和实验，并在科研实践中不断补充修正自己的假说二、基本程序（一）选题3、选题的基本要求目的明确、具体、有的放矢解决什么问题及问题的解决范围二、基本程序（一）选题3、选题的基本要求根据已知理论建立科学假说例如：异丙酚有无镇痛作用？验证，机理与NMDA、GABA关系等切实可行，人力、财力、物力等的保证二、基本程序（一）选题4、选题

3、的种类调查研究性质的：流行病学 如麻醉后认知功能障碍，麻醉中的知晓等实验研究性质的 如药物的临床疗效与对动物病理模型的作用资料分析性质的：多属回顾性的研究二、基本程序（一）选题Thomas “我要做的是让我的愿望符合事实，而不是试图让事实与我的愿望调和。你们要像一个学生那样坐在事实面前，准备放弃一切先入之见，恭恭敬敬地照着大自然指的路走，否则，将一无所得。”二、基本程序（一）选题方法要有权威性，稳定、重复性好不要盲目追求方法学的先进性 高水平假说 + 高精尖手段=高水平 高水平假说 + 一般手段=高水平 低水平假说 + 高精尖手段= 一般水平 低水平假说 + 低水平手段=低水平二、基本程序（二

4、）选择可行的科学的研究方法在文献检索、假说建立、选择可行手段的基础上，经过严谨的构思可确立具体的科研题目，题目应包括受试对象与效果反应两部分 例如：异丙酚抗伤害作用与NMDA受体的关系（NMDA受体激动剂、拮抗剂对异丙酚抗伤害作 用的影响） 二、基本程序（三）立题题目命的越具体，说明研究者的思维越清楚一个题目最好解决一、两个问题，不要贪大求全，不要言过其实二、基本程序（三）立题1、受试因素受试因素：多是外加因素，例如：药物、手术方法、医疗技术、致病因素等。性别、年龄也可作为受试因素受试因素的数目及水平：观察某一药物的影响叫单因素设计多个药物的影响叫多因素设计三、实验设计（一）基本要素1、受试因

5、素一个药物不同剂量叫水平，单因素单水平比较少用多因素间的“相互作用”应设 甲药组、乙药组、甲乙药组及对照组因素的标准化：化学合成药：同一厂家，同一批号；中草药：种属、产地、采收季节、加工炮制三、实验设计（一）基本要素2、受试对象整体：人、动物、微生物离体：组织器官、细胞、血液、大小便等人 ：年龄、性别、病种、病情、病程以及有无夹杂症等动物：种属、品系、年龄、体重、性别、营养状况等受试对象应对受试因素敏感 例如：脑缺血沙土鼠；组胺豚鼠；垂体-肾上腺皮质大白鼠；呕吐猫整体和离体的结合三、实验设计（一）基本要素2、受试对象 标准化：动物（同一品系）；病例（标准化） 例数： 计数指标（质反应）少 计量

6、指标（量反应）多 一般大动物（狗、羊、猪、猴）510只 中等动物（兔、豚鼠）1020只 小动物（大、小鼠）1030只三、实验设计（一）基本要素2、受试对象临床观察：难治病症且疗效显著时（癌症）51例；急重症死亡率高的（如心衰、休克）3050例；慢性病（溃疡病、慢支）100500例；流行病学调查需千例三、实验设计（一）基本要素3、观察指标是鉴定的尺度，至关重要指标的性质计数指标：质反应 “阳性”“阴性”，“死和不死”回答，常 用%表示； 临床：治愈、好转、显效、无效计量指标：量反应含量、细胞数等三、实验设计（一）基本要素3、观察指标指标的数目：指标多少不反映科研水平的高低；要反映本质的东西，围绕

7、一个中心做文章例如：异丙酚抗伤害作用的机制（NMDA、GABA、Gly）如研究与NMDA的关系，可应用NMDA、非NMDA受体的激动剂、拮抗剂对Na+、K+流的影响如研究对GABA的影响，可应用GABAA、GABAB的受体的激动剂、拮抗剂对Cl-流的影响三、实验设计（一）基本要素3、观察指标指标的基本要求特异性：有本质的联系，“经典”、“高新尖”客观性：主观指标（人为判断）客观指标（仪器记录）精确性：正确性：能否如实地反映客观存在 精密性：数据的精密程度灵敏性：分光光度计（mol），），HPLC(pmol), 放射免疫（pmol,fmol） 注意消除干扰三、实验设计（一）基本要素 二十世纪初提

8、出：对照、随机、重复1981年，WHO在北京举行的生物医学研究方法学习班，提出4R：合理性（rational）、 代表性（representativeness)重复性（replication)、 随机化（randomization)三、实验设计（二）基本原则 1、对照 目的 消除或减少实验误差（排除非实验因素的影响） 消除生物变异误差 应用纯种、同窝动物 消除主观误差 同一步骤要求同一人完成 消除时辰误差 各组都应按ABCD、BCDA、 CDBA且同时进行三、实验设计（二）基本原则 1、对照 原则 宁可组内有差异，不得有组间差异；例如雌雄比例 消除心理因素的影响；例如：双盲、单盲 各组例数相等

9、 尤其是对照组不能少三、实验设计（二）基本原则 基本形式空白对照：不加任何措施，观察受试对象的自然变化实验对照：实验操作条件的对照组 如：生理盐水组、溶媒组、假手术组、安慰剂组有效（标准）对照：已知有效药物或标准品（方法）作对照配对对照： 同体：同一个体不同时期作对照或实验（交叉）或同体 左右两侧进行实验。异体：同窝动物、一卵双胎等三、实验设计（二）基本原则1、对照基本形式组间对照：误差较大历史对照与正常对照：应十分重视，必须在条件、背景、指标、技术方法相同的条件下，否则将得出错误结论潜在对照：不设对照组的对照，如死亡率100%的疾病三、实验设计（二）基本原则1、对照三、实验设计（二）基本原则

10、1、对照 有两个条件不同时，实验就不纯洁了 有三个条件不同时，这说明实验者不学无术目的：使组间趋于一致或均衡，使研究样本由总体中均衡的被抽取，同等机会被抽取，保证各种未知因素均等的分配到各组中。三、实验设计（二）基本原则2.随机随即数字 抓阄等（见统计学）分层随机 按非被试因素中的几个主要因素（性别、体重、病情等）先分为若干层，然后再按随机的原则将各个层次的动物分到各组中去。随即不是“万全”的，可以造成年龄性别等差异，需要调整（加入主观意志）临床研究样本量小，很难做到真正的随机化确保病人的安全近年来动物实验中主张配对研究创造一个临床研究更合理更实际的“分配”方案三、实验设计（二）基本原则2.随

11、机目的：消除非处理因素所造成的偏差样本量越大，重复次数越多，越能反映客观真实规律。但不得无原则地追求大样本；应用统计学的方法（依据标准差）使样本量减到最小限度；一般生物学差异在15%左右指标的重复性，稳定性要好，化学分析的误差一般在5%左右三、实验设计（二）基本原则3、重复 1、单组比较自身对照设计：测基础值后，给药测实验值（如测痛阈）交叉设计：第一次用A药处理第一组，B药处理第二组，间隔一段时间，用B药处理第一组，A药处理第二组（如生物利用度测定） 2、组间比较两组或多组比较：常用，对比鲜明、设计简单、应用广泛缺点：抽样误差大三、实验设计（三）常见的方法 三、实验设计（三）常见的方法3、配对

12、设计以年龄、性别、体重、窝别相同的动物配成对子，每对中的一个分别分配到对照组和实验组中优点：受试对象均衡4、正交设计 多因素多水平设计，高效、快速和经济三、实验设计（三）常见的方法5、序贯设计 循环逐个地进行，一旦达到所规定的标准，即可停止，做出结论，适用于短时间获得结果的研究。 如LD50的测定：某药可按0.60.7的组间比例配成56个左右的不同浓度：实验中可首选一个浓度，如动物不死，换一只动物，提高一个浓度，如动物还是不死，再另取一只动物，再提高一个浓度后动物死亡，另取一只动物降一个浓度给药这样循环地进行，来回4次即可判断。四、科研工作的实施（一）观察立题与设计付诸实践的保证客观、认真、仔

13、细、准确，注意发现相似事物中的微小差异，即有相同点、不同点（抑制、过度兴奋的抑制；青霉素的发现）四、科研工作的实施（一）观察直观：以人的感觉直接感知对象，带有主观成分；借助仪器的客观记录培养疑而多思的思想方法，系统的观察、及时捕捉值得追踪的线索，不断修改其假说和设计原始资料妥善保存是研究工作最后进行理论概括的物质基础和前提。巴甫洛夫：“观察、观察、再观察”四、科研工作的实施（二）实验1、预备实验目的：熟悉实验设备，掌握操作方法， 做到标准化，探索科学假说的方向熟悉方法、条件先获得一些资料和数据，供制定和修改设计作参考验证科研构思和假说有无可能成立做好此项工作，下一步仅是扩大样本量四、科研工作的

14、实施（二）实验 四、科研工作的实施（二）实验2、正式实验通过预备实验，调整实验设计、进行的大批实验实验方法一定要稳定、重复性好、否则可导致错误的结论四、科研工作的实施（三）资料整理和统计分析1、资料的系统化 对原始资料的整理和归纳，按分组情况进行资料统一2、统计方法的选择 t检验、方差分析、卡方检验、秩和分析3、资料的取舍 没有违反实验设计要求和实验条件的资料不准舍弃 记录不确切、有遗漏无法改正的可舍弃四、科研工作的实施（三）资料整理和统计分析3、资料的取舍过大、过小的资料可按以下方法舍弃某组10个样本，其中有一个样本的值过大或过小，可先将这一样本放在一边，计算其余9个样本的均值标准差。再将过

15、大（小）的样本和上述均值求差的绝对值，该差值是上述标准差的3倍以上，此过大（小）的样本可以舍弃，否则不得舍弃原则：尊重实验结果 不能修改结果 四、科研工作的实施（四）结果判断根据统计学的结果服从客观事实，不能强求实验事实去服从主观愿望和假说不能漫无边际地推论五、论文撰写有鲜明的论点、充分的论据、说理性强的论证过程；不要凭主观想象加以推测，不要离题太远，围绕论点去讨论重新命题：客观、完整、合理地反映全文的核心与特点内容：前言、材料与方法、结果、讨论、结论、参考文献全文可一气呵成，修改可三思而行五、论文撰写1.图表自明题名、注脚、三线式、照片选择相似部位、放大倍数相同等2.有效数字测量仪表的最小分值后再估读一位