第三章 紫外-可见光谱法2

1、湖南中医药高等专科学校湖南中医药高等专科学校药学系药物化学教研室药学系药物化学教研室 蒋梅香蒋梅香123紫外紫外-可见分光光度法理论基础可见分光光度法理论基础紫外紫外可见分光光度计可见分光光度计 实用分析技术实用分析技术1.1.下列四个电磁辐射区域中能量最大的是下列四个电磁辐射区域中能量最大的是( )( ) A. A.红外区红外区 B.B.可见光区可见光区 C. C.紫外光区紫外光区 D.XD.X射线区射线区 2.2.紫外吸收光谱谱图又称紫外吸收曲线紫外吸收光谱谱图又称紫外吸收曲线, ,是以是以( ( ) )为横坐为横坐标；以（）为纵坐标。标；以（）为纵坐标。 3.3.分子中价电子的跃迁类型有

2、分子中价电子的跃迁类型有( ( ) )， ( ( ) )， ( ( ) )， ( ( ) )；不饱和基团常见的跃迁类型为；不饱和基团常见的跃迁类型为( ( ) )，含杂原，含杂原子的不饱和基团常见的跃迁类型为子的不饱和基团常见的跃迁类型为( ( ) )。4.4.化合物共轭结构延长，吸收峰会向化合物共轭结构延长，吸收峰会向( ( ) )方向移动。方向移动。复习题复习题 5.5.按照朗伯按照朗伯- -比尔定律，浓度比尔定律，浓度C C和吸光度和吸光度A A之间的关系应该之间的关系应该是一条通过原点的直线，实际上容易发生线性偏离，导致是一条通过原点的直线，实际上容易发生线性偏离，导致偏离的原因有（偏

3、离的原因有（ ）和（）和（ ）两大因素。）两大因素。 复习题复习题一、仪器主要部件一、仪器主要部件UV-VISUV-VIS仪示意图仪示意图第二节第二节 紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计0.570.57光源光源单色器单色器吸收池吸收池检测器检测器信号处理及显示信号处理及显示光源光源第二节第二节 紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计光源光源：发射强度足够、均匀、稳定、连续的复合光。：发射强度足够、均匀、稳定、连续的复合光。 可见光区：可见光区：钨灯，卤钨灯钨灯，卤钨灯(3201000nm) 紫外区：紫外区：氢灯，氘灯氢灯，氘灯(150400nm) 氙灯氙灯：(200800nm) 紫

4、外、可见光区均可用作光源紫外、可见光区均可用作光源 氙灯氙灯氢灯氢灯钨灯钨灯光源光源光源光源第二节第二节 紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计单色器单色器入射狭缝入射狭缝准直透镜准直透镜棱镜棱镜聚焦透镜聚焦透镜出射狭缝出射狭缝白光白光红红紫紫1 12 2800 600 500400将光源发出的连续光谱分解为将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。单色光的装置。光栅：光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等等宽度等间距间距条痕条痕(600、1200、2400条条/mm )。M1M2出出射射狭狭缝缝光屏光屏透透镜镜平面透平面透射光栅射光栅光栅衍射示意图光栅衍

5、射示意图原理原理：利用光通过光栅时发生利用光通过光栅时发生衍射和干涉现象而分光。衍射和干涉现象而分光。波长范围宽波长范围宽, , 色散均匀色散均匀, ,分辨性能好分辨性能好, , 使用方便使用方便 第二节第二节 紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计吸收池吸收池又称比色皿：用于盛放样品溶液的器皿。又称比色皿：用于盛放样品溶液的器皿。 光学玻璃池：可见光区；光学玻璃池：可见光区；石英池：紫外区、可见光区；石英池：紫外区、可见光区；第二节第二节 紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计吸收池吸收池吸收池的正确拿放、清洗、在仪器中的放置位置吸收池的正确拿放、清洗、在仪器中的放置位置请观察视频：

6、比色皿的注意事项。请观察视频：比色皿的注意事项。光电管光电管光电倍增管光电倍增管检测器检测器又称探测器：利用光电效应，将光能信号转换成电又称探测器：利用光电效应，将光能信号转换成电信号的元件。信号的元件。 光电管、光电倍增管光电管、光电倍增管测量光电流的读数装置。测量光电流的读数装置。检流计：检流计：数字显示：数字显示：数字数字(显示显示)打印：打印：72型型722型型756型型信号处理与显示器信号处理与显示器0.575光源光源单色器单色器吸收池吸收池检测器检测器显示显示简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，

7、要求光源和检测器具有很高的般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。稳定性。二、类型与工作原理二、类型与工作原理第二节第二节 紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计1.1.单光束分光光度计单光束分光光度计第二节第二节 紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计二、类型与工作原理二、类型与工作原理1.1.单光束分光光度计单光束分光光度计第二节第二节 紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计二、类型与工作原理二、类型与工作原理1.1.单光束分光光度计单光束分光光度计第二节第二节 紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计二、类型与工作原理二、类型与工作原理1.1.单光束分光光

8、度计单光束分光光度计二、类型与工作原理二、类型与工作原理光源光源单色器单色器吸收池吸收池检测器检测器光束分裂器光束分裂器自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵 敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂， 价格较高。价格较高。2.2.双光束分光光度计双光束分光光度计光路光路1光路光路2第二节第二节 紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计2.2.双光束分光光度计双光束分光光度计二、类型与工作原理二、类型与工作原理第二节第二节 紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计

9、2.2.双光束分光光度计双光束分光光度计二、类型与工作原理二、类型与工作原理第二节第二节 紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计二、类型与原理二、类型与原理2.2.双光束分光光度计双光束分光光度计三、分光光度计的操作步骤三、分光光度计的操作步骤观看观看722722型分光光度计的操作演示视频，学习型分光光度计的操作演示视频，学习紫外紫外- -可见分光光度计的使用；可见分光光度计的使用；第二节第二节 紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计三、分光光度计的操作步骤三、分光光度计的操作步骤1.1.接通电源，仪器预热接通电源，仪器预热3030分钟。分钟。2.2.调节波长至测定所需波长值。调节波长

10、至测定所需波长值。3.3.“0 0”点校正：点校正：按按“功能键功能键”切换至切换至“T T模式模式”，打开试样室盖，转动打开试样室盖，转动“调调0%0%键键”，显示器上显示，显示器上显示“0.000.00”。4.4.调调“100%100%”：“T T模式模式”，打开试样室盖，将参比，打开试样室盖，将参比（空白）样品放入样品架，拉动样品架拉杆使其进（空白）样品放入样品架，拉动样品架拉杆使其进入光路，转动入光路，转动“调调100%100%键键”，显示器上显示，显示器上显示“100.0100.0”。5.5.清洗吸收池，准备样品。清洗吸收池，准备样品。6.6.测定样品吸光度测定样品吸光度A A：按按“功能键功能键”切换至切换至“A A模模式式”，将样品放入样品架置于光路中，测，将样品放入样品架置于光路中，测A A，记录。，记录。 6.6.分光光度法种类很多，但分光光度计都是由下列主要部分光光度法种类很多，但分光光度计都是由下列主要部件组成的：件组成的：. .（ ）. .（ ）. .（ ）. .（ ） . .（ ） 7.7.紫外紫外- -可见分光光度计提供可见光的光源有（可见分光光度计提供可见