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文档简介

1、2013307341叶苹苹根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物，再用这种荧光抗体（或抗原）作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素，利用荧光显微镜观察标本，荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光（黄绿色或桔红色），可以看见荧光所在的细胞或组织，从而确定抗原或抗体的性质、定位，以及利用定量技术测定含量。1)FITC：黄色结晶粉末，吸收光：490495nm，发射光：520530nm，明亮的黄绿色荧光。2)RB200：橘红色粉末，吸收光570nm，发射光595600nm，橘红色荧光。3)TRITC：紫红色粉末，吸

2、收550nm，发射光620nm，橙红色荧光。4）镧系：Eu、Tb5)PE：吸收光490560nm，发射光595nm，红色荧光。6）其它：酶作用后产生荧光物质。直接免疫荧光法间接免疫荧光法将病毒接到敏感细胞上进行增殖复制，待病价最高的时候进行间接荧光免疫实验用于分毒时，确定有无病毒的存在测抗体优点：特异性高、敏感性高、速度快缺点：非特异性染色注意事项： 1、每次试验应设阳性和阴性对照 2、应注意荧光抗体的质量 3、标本应避光保存1、病毒吸附：5%cpv同步接毒，3d2、丙酮固定：80%丙酮，4 ,1h3、洗涤：用 PBS 洗涤3遍 3min4、加入一抗：加入抗 CPV 阳性血清（1：100倍稀释），200L/孔，37湿盒中作用 3h5、洗涤6、加入二抗：加入 FITC 标记羊抗鼠 IgG 二抗（1:300倍稀释）50L，37闭光作用 1h；7、洗涤8

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