第一篇c1生物安全和医院感染

1、1. 概念：实验室生物安全、消毒、灭菌、无菌、概念：实验室生物安全、消毒、灭菌、无菌、无菌操作、医院感染无菌操作、医院感染2. 微生物的危险度的等级划分？实验室生物安全微生物的危险度的等级划分？实验室生物安全水平级别？水平级别？3. 避免或减少实验室相关感染发生的重要技术？避免或减少实验室相关感染发生的重要技术？4. 常用消毒灭菌技术有哪些？常用消毒灭菌技术有哪些？5. 医院感染的病原学特点及其监测。医院感染的病原学特点及其监测。 是指用以是指用以防止防止实验室发生实验室发生病原体病原体 或或毒素毒素 意外意外暴暴露及释放露及释放 的的原则原则、技术技术 及及实践实践。对所操作的病原微生物对所

2、操作的病原微生物危险程度进行评估危险程度进行评估采取保护措施采取保护措施减少危险因子暴露，防止减少危险因子暴露，防止实验室获得性感染实验室获得性感染的发生的发生生物安全工作的核心生物安全工作的核心 1. 微生物的危险等级划分微生物的危险等级划分 P8级别越高越危险级别越高越危险种类种类危害等级危害等级危害等级危害等级 III危害等级危害等级危害等级危害等级I病毒病毒185114219细菌细菌311901真菌真菌635寄生虫寄生虫12322. 其他因素：其他因素：宿主、感染量、抵抗力、防治效果宿主、感染量、抵抗力、防治效果等。等。人间传染病原微生物的分类人间传染病原微生物的分类 （类别越高越安全

3、类别越高越安全）第一类：能够引起人类或者动物非常第一类：能够引起人类或者动物非常严重疾病严重疾病的微生物，的微生物， 以及我国以及我国尚未发现尚未发现或者或者已经宣布消灭已经宣布消灭的微生物。的微生物。 第二类：能够引起人类或者动物第二类：能够引起人类或者动物严重疾病严重疾病，比较容易比较容易直接直接 或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传传 播播的微生物。的微生物。 第三类：第三类：能够引起能够引起人类或者动物人类或者动物疾病疾病，但一般情况对人、，但一般情况对人、 动物或者环境动物或者环境不构成严重危害不构成严重危害，传播风险有限传播风险有限，

4、实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效有效 治疗和预防治疗和预防措施的微生物。措施的微生物。 第四类：通常情况下第四类：通常情况下不会引起不会引起人类或者动物人类或者动物疾病疾病的微生物的微生物 n使用使用处理感染性物质处理感染性物质处理潜在空气传播的物质处理潜在空气传播的物质密封离心杯的装样、取样密封离心杯的装样、取样可能产生气溶胶的操作可能产生气溶胶的操作n分级分级分分I IIIIIII级级，共共6个型号个型号级别级别越高越安全越高越安全 原理原理 效果效果 操作范围操作范围I级级 保护操作者和环境保护操作者和环境 危险度危险度级级微生物微生物II

5、级级 保护操作者、环境保护操作者、环境 危险度危险度II III 级级微生物微生物 和和操作对象操作对象 III级级 保护度最高保护度最高 危险度危险度 级级微生物微生物I I级级级级级级实验服实验服 隔离衣隔离衣 连体防护服连体防护服 隔离衣穿戴方式隔离衣穿戴方式 正确佩戴和卸下外科口罩示意图正确佩戴和卸下外科口罩示意图 a 、安全镜、安全镜 b 、安全护目镜、安全护目镜不得戴眼镜防护装备离开实验室区域不得戴眼镜防护装备离开实验室区域 ！防护面罩防护面罩 手套手套避免化学和生物危害物质飞溅至头部避免化学和生物危害物质飞溅至头部( (头发头发) )要求：要求：工作人员在实验操作工作人员在实验操

6、作时应佩带防护帽时应佩带防护帽 无纺布制成的一次性简易防护无纺布制成的一次性简易防护帽帽鞋套使用方法示意图鞋套使用方法示意图BSL-2实验室要穿鞋套或靴套实验室要穿鞋套或靴套如何穿戴个人防护装备如何穿戴个人防护装备 如何脱个人防护装备如何脱个人防护装备 实验室实验室 实验室实验室 实验室实验室 危害危害 安全安全 分级分级 类型类型 操作操作 等级等级 设施设施 BSL-1 基础教学基础教学/研究研究 GMT 级级 不需要不需要BSL-2 诊断诊断/研究研究 GMT+生物危生物危 级级 BSC+个人个人 害标志害标志 防护装备防护装备BSL-3 特殊的诊断特殊的诊断 BSL2+特殊防特殊防 级

7、级 BSC和和/或或 /研究研究 护服护服+进入制度进入制度 实验室工实验室工 +定向气流定向气流 作的设备作的设备 BSL-4 危险病原体危险病原体 BSL3+气锁入口气锁入口 级级 BSC 研究研究 +出口淋浴出口淋浴+污染污染 穿正压服穿正压服 物品的特殊处理物品的特殊处理 过滤空气过滤空气 *GMT：微生物学操作技术规范：微生物学操作技术规范n实验室操作技术实验室操作技术感染性或潜在感染性物质的规范操作感染性或潜在感染性物质的规范操作常用设备的使用常用设备的使用血液和其他体液的标准预防措施血液和其他体液的标准预防措施n暴露的处理暴露的处理 n感染性废弃物的处理感染性废弃物的处理n感染性

8、物质的运输感染性物质的运输是避免和减少是避免和减少实验室获得性实验室获得性感染的发生的感染的发生的重要技术重要技术1. 感染性或潜在感染性物质的操作感染性或潜在感染性物质的操作n样本的采集（第二章样本的采集（第二章 详述）详述）n样本的运送（样本的运送（P12 六）六）n感染性物质冻干管的开启和储存感染性物质冻干管的开启和储存在在BSC内打开；开前消毒；废弃物处理；护手护眼内打开；开前消毒；废弃物处理；护手护眼n血清分离血清分离护手护眼；动作轻柔，避免飞溅和产生气溶胶护手护眼；动作轻柔，避免飞溅和产生气溶胶n朊粒朊粒使用专用、一次性装备和制品；使用专用、一次性装备和制品；BSC内操作；废弃内操

9、作；废弃物高压灭菌物高压灭菌+焚烧焚烧2. 常用设备的使用常用设备的使用n防止样本渗漏防止样本渗漏n个人防护及卫生个人防护及卫生n在在BSC内处理样本和操作内处理样本和操作n规范实验室操作规范实验室操作(SOP)n消毒：工作环境、台面、仪器设备、废弃物、个人等消毒：工作环境、台面、仪器设备、废弃物、个人等n医务人员职业暴露：医务人员职业暴露：是指医务人员在从事诊疗、是指医务人员在从事诊疗、护理活动过程中接触有毒、有害物质，或传染病护理活动过程中接触有毒、有害物质，或传染病病原体，从而损害健康或危及生命的一种情况。病原体，从而损害健康或危及生命的一种情况。n又分感染性职业暴露，放射性职业暴露，化

10、学性又分感染性职业暴露，放射性职业暴露，化学性（如消毒剂、某些化学药品）职业暴露，及其他（如消毒剂、某些化学药品）职业暴露，及其他职业暴露职业暴露n暴露的处理：暴露的处理：P11 15点n感染性废弃物：感染性废弃物：指丢弃的感染性或潜在感染性物品指丢弃的感染性或潜在感染性物品n处理原则处理原则在实验室内清除污染后丢弃在实验室内清除污染后丢弃经适当包裹运送到专门的地方处理经适当包裹运送到专门的地方处理碎玻璃、针头等锐器置于防穿容器中再处理碎玻璃、针头等锐器置于防穿容器中再处理对丢弃者、公众、环境不造成危害或潜在危害的其对丢弃者、公众、环境不造成危害或潜在危害的其他处理方法他处理方法n清除污染的方

11、法清除污染的方法高压蒸汽灭菌器（首选）、焚烧等高压蒸汽灭菌器（首选）、焚烧等n遵循国内外相关规定遵循国内外相关规定人间传染的病原微生物名录人间传染的病原微生物名录高致病性病原微生物菌高致病性病原微生物菌( (毒毒) )种或样本运输管理规定种或样本运输管理规定病原微生物实验室生物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例危险物品航空安全运输技术细则危险物品航空安全运输技术细则n三层包装三层包装内层容器：装载标本；密闭、防水、防渗漏；贴标签内层容器：装载标本；密闭、防水、防渗漏；贴标签第二层包装：吸水性材料第二层包装：吸水性材料第三层包装：免受物理损坏第三层包装：免受物理损坏符合防水、防破损、防

12、外泄、耐高温、耐高压符合防水、防破损、防外泄、耐高温、耐高压 消毒消毒(disinfection) ：杀灭物体上杀灭物体上病原微生物病原微生物 的方法的方法 （只杀灭（只杀灭繁殖体，不包括芽胞和非病原体）繁殖体，不包括芽胞和非病原体）消毒剂消毒剂(disinfectant)：用以消毒的药品或化学物质用以消毒的药品或化学物质灭菌灭菌(sterilization) ：杀灭物体上杀灭物体上所有的微生物所有的微生物 的方法的方法 （包括病原体包括病原体 和非病原体的繁殖体和芽胞）和非病原体的繁殖体和芽胞）防腐防腐(antisepsis) ：防止或防止或抑制微生物生长繁殖抑制微生物生长繁殖的方法的方法。

13、无菌无菌(asepsis) ：物体上或容器内物体上或容器内无活菌存在无活菌存在的意思。的意思。是防止微生物进入机体或其他物品的是防止微生物进入机体或其他物品的操作操作 技术技术。 根据传播病原体、发生感染的危险性，分三类根据传播病原体、发生感染的危险性，分三类n高度危险类：高度危险类：进入正常无菌部位的物品进入正常无菌部位的物品必需灭菌必需灭菌n中度危险类：中度危险类：接触黏膜、不完整皮肤的物品接触黏膜、不完整皮肤的物品高水平消毒高水平消毒n低度危险类：低度危险类：接触完整皮肤的物品接触完整皮肤的物品低效消毒剂消毒低效消毒剂消毒 热力灭菌法热力灭菌法辐射杀菌法辐射杀菌法 滤过除菌法滤过除菌法超

14、声波杀菌法超声波杀菌法干燥和低温抑菌法干燥和低温抑菌法33 种类种类 方法（仪器温度时间）方法（仪器温度时间） 用途用途 焚烧焚烧 焚烧炉燃烧焚烧炉燃烧 废弃污染物、尸体等废弃污染物、尸体等 灼烧灼烧 用火焰烧灼用火焰烧灼 接种环、试管口等接种环、试管口等 干烤干烤 干烤箱干烤箱,160170 ,2h 玻璃器皿、粉剂药物等玻璃器皿、粉剂药物等 巴氏消毒法巴氏消毒法 6070多多，30s30min 牛奶、酒类等牛奶、酒类等 煮沸法煮沸法 100 ，510min 注射器、食具、饮水等注射器、食具、饮水等 (+NaHCO3 105 防生锈防生锈) 流通蒸汽法流通蒸汽法 100 ，30min 同上同上

15、 间歇蒸汽法间歇蒸汽法 流通蒸汽流通蒸汽80 3d 3次次 含糖含糖/血清血清/鸡蛋培养基等鸡蛋培养基等 高压蒸汽灭高压蒸汽灭 高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器 耐高温耐湿耐压物品耐高温耐湿耐压物品 灭菌法灭菌法 1.05kg/cm2/103kPa/ (注射器注射器/手术器械手术器械/培养培养 121.3，2030min 基基/NS/敷料敷料/手术衣等手术衣等) 热力消毒灭菌法热力消毒灭菌法 湿湿热热 34紫外线和电离辐射紫外线和电离辐射q波长波长200-300nm（265266nm最强）；最强）；q作用于作用于DNA，导致细菌变异和死亡；导致细菌变异和死亡；q穿透力弱穿透力弱适于适于物品表面物品

16、表面和和空气消毒空气消毒q电离辐射：电离辐射：q高速电子、高速电子、X射线、射线、射线；射线；q细胞中水分子被电离成具有氧化剂与还原剂作用的游离细胞中水分子被电离成具有氧化剂与还原剂作用的游离基（基（H+和和OH），破坏细菌的核酸、酶和蛋白质），破坏细菌的核酸、酶和蛋白质q适用于塑料适用于塑料注射器注射器、导管导管、手套手套等不耐热的物品。等不耐热的物品。n用机械阻留方法除去液体或空气中细菌用机械阻留方法除去液体或空气中细菌n常用蔡氏、玻璃、薄膜滤菌器；常用蔡氏、玻璃、薄膜滤菌器；n适用于不耐热也不能用化学方法消毒的适用于不耐热也不能用化学方法消毒的液体液体或或空气空气；（如：内毒素、血清、酶

17、、抗生素等）（如：内毒素、血清、酶、抗生素等） n使细菌脱水、菌体蛋白变性和盐类浓缩，妨碍其代谢、使细菌脱水、菌体蛋白变性和盐类浓缩，妨碍其代谢、生长、繁殖。生长、繁殖。n适用于适用于保存食物、药物、试剂、菌种保存食物、药物、试剂、菌种等等是目前保存菌种的最好方法。是目前保存菌种的最好方法。 （1 1）消毒剂的性质、浓度和作用时间）消毒剂的性质、浓度和作用时间（2 2）微生物的种类和数量）微生物的种类和数量（3 3）温度和酸碱度）温度和酸碱度（4 4）环境中化学拮抗物质的存在）环境中化学拮抗物质的存在n消毒灭菌过程控制消毒灭菌过程控制物理或化学监测法物理或化学监测法n浓度测定浓度测定消毒剂的消

18、毒效果消毒剂的消毒效果n化学指示卡化学指示卡/指示胶带指示胶带高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器n自消毒灭菌中分离微生物自消毒灭菌中分离微生物 指示菌指示菌嗜热脂肪芽孢杆菌嗜热脂肪芽孢杆菌(ATCC7953)高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法枯草杆菌芽孢黑色变种枯草杆菌芽孢黑色变种(ATCC9372)紫外线法紫外线法监测消毒灭菌过程优于自消毒灭菌物品中分离微生物监测消毒灭菌过程优于自消毒灭菌物品中分离微生物概念概念医院感染医院感染(hospital infection )/医院获得性感染医院获得性感染(hospital acquired infection) 是指是指在医院在医院中中各人群各人群所所获得获得的感染。的感染。外源性感染外源性感染内源性感染内源性感染主要是住院病人主要是住院病人和医务工作者和医务工作者无明确潜伏期无明确潜伏期:入院后入院后48h后获得的后获得的感染；有明确潜伏期感染；有明确潜伏期:自入院起超过平均潜伏期自入院起超过平均潜伏期后或出院后在平均潜伏期内）后或出院后在平均潜伏期内）一、医院感染的病原体一、医院感染的病原体n院感常见微生物的特点院感常见微生物的特点主要为主要为机会致病微生物机会致病微生物常具有常具有耐药性耐药性常发生常发生种类的变迁种类的变迁n院感常见的微生物院感常见的微生物 细菌：细菌：多重耐药细菌分离率升高多重耐药细菌分离率升高 病