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文档简介

1、WORD格式主要目的:为了测定样品中的MDA 含量,作为机体内脂质过氧化的程度的一个指标。主要原理:测定原理为过氧化脂质降解产物中的丙二醛可与硫代巴比妥酸 ( TBA )缩合,形成红色产物,在 532 nm 波长下有最大吸收峰 100 。用酶标仪在 532 nm 处测定吸光度( OD 值),计算样品浓度。因底物为硫代巴比妥酸,所以此法称为 TBA 法。专业资料整理实验室签章一、试剂 无水乙醇(分析纯) 硫代巴比妥酸 冰醋酸 双蒸水丙二醛( MDA )测定试剂盒(南京建成生物研究所)二、仪器设备 96 孔酶标板 UV-Vis 可见多功能酶标仪旋涡混匀器水浴锅移液枪及相应量程枪头三、实验方法根据试

2、剂盒说明书具体操作步骤如下:1. 向标准管 0.1 mL 标准品,空白管加入 0.1 mL 无水乙醇,测试管和对照管加入稀释后的血清或组织上清液0.1 mL,然后各管中再分别加入0.1 mL 试剂一,摇动几下试管架晃匀,向各管中分别加入3 mL 的试剂二和 1ml 的试剂三,同时只向对照管中加入50%冰醋酸 1 mL。2.旋涡混匀器混匀,试管口用保险薄膜扎紧,用针头刺一小孔,95水浴40 分钟,取出后流水冷却,然后4000 转/分,1cm 光径,双蒸水调零,测定各管吸光度值。3. 血清中 MDA 含量计算公式测定 OD值 对照 OD值MDA 含量( nmol/mL )-标品浓度 样本前稀释倍数标准 OD值 空白 OD值-组织中 MDA 含量计算公式测定 OD值 对照 OD值MDA 含量( nmol/mgprot)-标品浓度 样品蛋白浓度标准 OD值 空白 OD值-(mgprot/mL)Lu T C, Ko Y Z, Huang H W, et al. Analgesic and anti-inflammatory activities of aqueous extract from Glycine tomentella root in miceJ. Journal

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