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文档简介

1、1. 微生物:是一切体形微小单细胞或个体结构简单的多细胞,甚至没有细胞结构的低等生物的统称。2. 种(species):是一个基本分类单位;是一大群表型特征高度相似、亲缘关系极其接近,与同属内其他种有明显差别的菌株的总称。 3. 菌株(strain): 表示任何由一个独立分离的单细胞繁殖而成的纯种群体及其一切后代菌株强调的是遗传型纯的谱系4. 微生物分类:原核生物:真细菌(放线菌、支原体、立克次氏体、衣原体、蓝细菌)、古细菌真核生物:酵母菌、霉菌、原生动物、单细胞藻类非细胞结构生物:病毒、 亚病毒(类病毒、拟病毒、朊病毒)5. 观察细菌形态时,为什么要用染色法,常用的染色方法有几种?一般微生物

2、菌体小且无色透明,在光学显微镜下细胞体液及结构的折光率与其背景相差很小,因此用压法或悬滴法进行观察时,只能看到其大体形态和运动情况,若要在光学显微镜下观察其细致形态和主要结构,一般都需要对他们染色,从而借助颜色的反衬作用提高观察样品不同部位的反差。细菌染色法:活菌:用没蓝或TTC等做活菌染色 死菌:1 负染色(背景着色法)【荚膜染色】 2 正染色:简单染色法(形态)和鉴别染色法(结构)(革兰氏染色法、抗酸性染色法、芽孢染色法、)7. 原生质体:通过溶菌酶去除细胞壁或使用青霉素抑制细胞壁合成,而得到的仅有细胞膜包裹的圆球状渗透敏感细胞。8. 球状体:还残留着部分细胞壁的圆球状渗透敏感细胞9. L

3、型细菌:通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷菌株。10. 支原体:在长期进化过程中形成后适应自然生活条件的无细胞壁的原核生物11. 糖被:包被于某些细菌细胞壁外地一层厚度不定的胶状物质被称糖被12. 芽孢:某些细菌在某生长发育后期,在细胞,内形成一个圆形或椭圆形,厚壁 含水量极低 抗逆性极强的休眠体13. 伴孢晶体: 少数芽孢 杆菌在形成芽孢的同时,会在芽孢旁边形成一个菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体称伴胞晶体。14. 菌落:分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长繁殖带一定程度可以形成肉眼可见的,有一定形态结构的子细胞生长群体。15. 假丝酵母:有些酵母菌与其子代细胞在一起成为链状,称

4、为假丝酵母16. 芽殖:一个酵母能形成的芽数平均24个出芽方式:多边出芽、两端出芽、三边出芽、单边出芽17. 革兰氏染色的主要步骤和关键步骤各是什么,机理如何主要步骤: 方法:结晶紫初染碘液媒染乙醇脱色番红复染油镜观察关键步骤:脱色 脱色长短会影响菌体的鉴别 (假阳性和假阴性)机理: 初染时结晶紫透过细胞壁进入细胞,媒染所用的碘液与结晶紫反应生成不溶性的复合物,但这种复合物可以溶于乙醇。当用乙醇脱色时,G-中的复合物被洗去,但在G+中由于存在厚厚的肽聚糖,乙醇使肽聚糖脱水以致肽聚糖层空隙变小 复合物无法通过细胞壁而存在细胞中使细胞仍呈现紫色。番红复染将G-染成红色,G+的紫色覆盖红色仍呈现紫色

5、。18. 芽孢是如何形成的,其耐热机制是什么芽孢的形成分为7个阶段:DNA浓缩,束状染色质形成、隔膜的形成(前芽孢的双成隔膜)、前芽孢形成 细胞发生不对称分裂,小体积部分为前芽孢、 皮层形成、芽孢衣形成、芽孢合成完成、芽孢裂解 机制:芽孢衣对多价阳离子和水分的透性很差和皮层的离子强度很高,皮层有极高的渗透压,夺取核心部分的水分,造成皮层充分膨胀,核心部位生命物质高度失水,从而具有极高的耐热性19. 溶酶菌和青霉素的作用点溶菌酶作用细菌壁肽聚糖二塘的B-1-4糖苷键青霉素使细胞壁中肽聚糖的肽桥无法连接20. G-细菌LPS层功能,其稳定性与什么有关构成某些革兰氏阴性细菌致病物质内毒素的物质基础;

6、起细菌自我保护作用.重要的抗原因子;是许多噬菌体吸附的受体。吸附Mg2+、Ca2+等阳离子以提高其在细胞表面浓度的作用。LPS层的稳定性与Ca2+有关,如果用EDTA等螯合剂去除Ca2+和降低离子键强度,就会使LPS解体。21. 如何通过实验方法确定细菌有无鞭毛从固体形态培养基上的菌落形态判断:该菌长出的菌落大,薄且不规则,边缘也不圆整,说明有鞭毛;反之,外形圆整,边缘光滑,厚度较大则说明无鞭毛。半固体琼脂穿刺培养:若穿刺线周围有呈浑浊的扩散区则说明有鞭毛。特殊鞭毛染色法:是染料沉积在鞭毛上,用光学显微镜观察加粗后的鞭毛。暗视野具滴法:根据其运动方法用光学显微镜判断其有无鞭毛。电子显微镜(最直

7、接的方法)22. 细菌、酵母菌、霉菌的菌落各有何特点,掌握这些知识有何实际意义细菌:较小,湿润,易被接种环挑起球菌形成隆起菌落,有鞭毛细菌常形成不规则菌落,具有荚膜的细菌菌落表面较透明,边缘光滑整齐,有芽孢的细菌菌落表面干燥皱着酵母菌菌落与细菌菌落相似但较大较厚,菌落表面湿润粘稠,易被挑起,多为乳白色霉菌:较大,质地疏松,外观干燥,不透明,呈现或紧或松的蛛网状绒毛状或棉絮状,菌落与培养基接触紧密不易挑取,菌落正反面及中心与边缘颜色常不一致不同微生物在特定培养上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定特征,可成为对该微生物鉴别分类的重要依据23. 比较细菌、酵母菌、霉菌细胞壁的特殊成分,设想他们的原生

8、质体的制备方法细胞壁成分的异同:细菌分为G+和G-,G+肽聚糖含量高,G-含量低;G+磷壁酸含量较高,而G-不含磷壁酸;G+类脂质一般无,而G-含量较高;G+不含蛋白质,G-含量较高。放线菌为G-,其细胞壁具有G-所具有的特点。酵母菌和霉菌为真菌,酵母菌的细胞壁外层为甘露聚糖,内层为葡聚糖;而霉菌的细胞壁成分为几丁质、蛋白质、葡聚糖。原生质体制备方法:G+菌原生质体获得:青霉素、溶菌酶 。 G-菌原生质体获得:EDTA鳌合剂处理,溶菌酶。 放线菌原生质体获得:青霉素、溶菌酶。霉菌原生质体获得:纤维素酶。酵母菌原生质体获得:蜗牛消化酶。24. 比较原核生物和真核生物的异同真核生物有核膜包被,原核

9、生物没有。真核生物有线粒体、叶绿体、高尔基体、核糖体等,原核生物只有核糖体。原核生物细胞较小,而真核生物较大。原核生物细胞壁多为肽聚糖而真核生物为纤维素。原核生物细胞质不流动 真核生物流动26. 真菌孢子的类型分为无性孢子和有性孢子,有性孢子(卵孢子,接合孢子,子囊孢子,担孢子),无性孢子(孢囊孢子,分生孢子,节孢子,厚壁孢子)其中,担孢子节孢子厚壁孢子分生孢子为外省,其他为内生27. 试比较营养物质进入微生物细胞的几种方式的基本特点自由扩散:又浓度高的地方向浓度低的地方扩散,不需要载体和ATP协助扩散:不受浓度的限制,需要载体不需要ATP主动运输:不受浓度的限制,需要载体和ATP内吞外排:通

10、过细胞膜的流动性而运输大分子物质28. 什么是培养基?用于固体培养基的凝固剂有几种。为什么说琼脂的最好的凝固剂。培养自养微生物常用什么做凝固剂,为什么?定义:由人工配制的、适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物用的营养基质(混合养料)。用于固体培养基的凝固剂有:琼脂、明胶、硅胶不能不为微生物分解;不因消毒灭菌被破坏,在为生物生长温度内保持固态,凝固点温度不能太低,对微生物无害,透明度好,粘着力强。培养自养微生物常用明胶,因为明胶不含有机物29. 微生物在培养基中,pH为什么会发生改变,如何保持培养基中pH的相对稳定?微生物在生长繁殖和积累代谢产物过程中,培养基PH会发生如下变化:1.如微生物在

11、含糖基质上生长,会产酸而使PH下降2.微生物在分解蛋白质和氧基酸时,会产NH3而使PH上升。3.以(NH4)2SO4作N源,会过剩SO42-,而使PH下降。4.分解李永阳离子化合物如:NaNO3,会过剩Na而使PH上升。 为了维持培养基PH值得相对恒定,常常在培养基中加入缓冲液物质如磷酸盐,碳酸盐,以缓和PH变化的剧烈。或加酸加碱30. 微生物的营养类型分几种,主要划分依据是什么?1光能无机自养型(光能自养型) 能以CO2为唯一或主要碳源; 进行光合作用获取生长所需要的能量;以无机物如H2、H2S、S、H2O等作为供氢体或电子供体,使CO2还原为细胞物质; 2光能有机异养型(光能异养型) 不能

12、以CO2为主要或唯一的碳源;以有机物作为供氢体,利用光能将CO2还原为细胞物质;在生长时大多数需要外源的生长因子; 3化能无机自养型(化能自养型) 生长所需要的能量来自无机物氧化过程中放出的化学能;以CO2或碳酸盐作为唯一或主要碳源进行生长时,利用H2、H2S、Fe2+、NH3或NO2-等无机物作为电子供体使CO2还原成细胞物质。4.化能有机异养型(化能异养型)碳源是有机物,有机物作为电子传体所用能源为化学能 31. 天然培养基:含化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物32. 组合培养基:由化学成分完全了解的物质配制而成33. 选择培养基:根据某种或某一类群微生物的特殊营养需要或对某化合

13、物的敏感性不同而设计出来的培养基34. 鉴别培养基:在普通培养基中加入能与某代谢产物发生反应的指示剂或化学药品,而产生某种明显的变化35. 简述微生物的营养要素,在配制培养基时,一般选择哪些物质?微生物的营养物质要素有五类:碳源,氮源,无机盐,生长因子和水在实验室一般用牛肉膏蛋白胨培养细菌 一般用麦芽汁培养基培养酵母菌 一般用高氏一号合成培养基放线菌 一般用查氏合成培养基培养霉菌36. 现有的微生物保藏方法分几类,保藏原理各是什么?低温保存:菌种管置于4C冰箱保存定时传代;原理:低温下微生物代谢强度明显下降石蜡油低温保存:橡胶塞风口或覆盖石蜡油;原理:降低微生物的代谢水平液氮超低温保存法:菌种

14、置于保护剂中预冻后保存在液氮超低温冰箱内(-196C,50年);原理:微生物处于冷冻状态代谢作用停止(是用于各种微生物)干燥保存法:将菌种置于土壤 滤纸 细沙 硅胶等干燥材料上保存;原理:微生物处于干燥状态下生命活动处于休眠状态(适用于保存放线菌,芽孢菌和其他真菌保存)真空冷冻干燥法:加油保护剂的菌悬液在冻结状态下予以真空保存;原理:微生物处于干燥缺氧及低温状态下生命活动处于休眠37. 一般来说,严格的无菌操作是一切微生物学工作的基本要求,但在分离与培养极端嗜盐菌时,常在没有点酒精灯的普通试验台上倾倒培养平板,在日常生活中直接打开皿盖观察和挑取菌落,而其研究结果并没有因此受到影响,这是为什么?

15、培养极端嗜盐菌的培养平板需要添加很高浓度的氯化钠,实验室环境中的一般微生物都不能在这种选择培养基上生长,因此在实验过程中即使不采用无菌操作技术,实验结果仍不会受到影响38. 如果希望从环境中分离得到厌氧固氮菌,该如何设计实验?(1)根据选择分离的原理设计不含氮的培养基,在这种培养基上生长的细菌,其氮素应来自固氮作用。(2)将环境样品(例如土样)稀释涂布到选择平板上,放置于厌氧罐中。对厌氧罐采用物理、化学方法除去氧气,保留氮气。培养后在平板上生长出来的细菌应是厌氧固氮菌或兼性厌氧固氮菌。(3)挑取一定数量的菌落,对应点种到两块缺氮的选择平板上,分别放置于厌氧罐内、外保温培养。在厌氧罐内外均能生长

16、的为兼性厌氧固氮菌,而在厌氧罐外的平板上不能生长,在厌氧罐内的平板上生长的即为可能的厌氧固氮菌。39. 与促进扩散相比,微生物通过主动运输吸收营养物质的优点是什么?在于可以逆浓度运输营养物质。通过促进扩散将营养物质运输进入细胞,需要环境中营养物质浓度高于胞内,而在自然界中生长的微生物所处环境中的营养物质含量往往很低,在这种情况下促进扩散难以发挥作用。主动运输则可以逆浓度运输,将环境中较低浓度营养物质运输进入胞内,保证微生物正常生长繁殖。40. 以伊红美蓝(EMB)培养基为例,分析鉴别培养基的作用原理。鉴别性培养基是在培养基中加入能与某菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从肉眼就能将其与其他外

17、形相似的菌落区分。EMB培养基中大肠杆菌,因其强烈分解乳糖而产生大量的混合酸,菌体带H+,故可染上酸性染料伊红,又因伊红与美蓝结合,使菌落呈深紫色。从菌落表面反光还可看到绿色金属闪光。而产酸弱的菌株的菌落呈棕色。不发酵乳酸的菌落无色透明。41. 以大肠杆菌烯醇丙酮磷酸-磷酸糖转移酶系统(PTS)为例解释基团转位。大肠杆菌PTs由5种蛋白质(酶I、酶a、酶b、酶c及热稳定蛋白质Hn)组成,酶a、酶b、酶c 3个亚基构成酶。酶I和HPr为非特异性细胞质蛋白,酶a也是细胞质蛋白,亲水性酶b与位于细胞膜上的疏水性酶c相结合。酶将一个葡萄糖运输进入胞内,磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)上的磷酸基团逐步通过酶I

18、和HPr的磷酸化和去磷酸化作用,最终在酶的作用下转移到葡萄糖,这样葡萄糖在通过PTs进入细胞后加上了一个磷酸基团。42. 某学生利用酪素培养基(见表4-13)平板筛选产胞外蛋白酶细菌,在酪素培养基平板上发现有许多菌的菌落周围有蛋白酶水解圈,是否能仅凭蛋白水解圈与菌落直径比大,就断定该菌株产胞外蛋白酶的能力就大。而将其选择为高产蛋白酶的菌种?为什么?不能。因为,(1)不同微生物的营养需求、最适生长温度等生长条件有差别,在同一平板上相同条件下的生长及生理状况不同;(2)不同微生物所产蛋白酶的性质(如最适催化反应温度、pH、对底物酪素的降解能力等)不同;(3)该学生所采用的是一种定性及初步定量的方法

19、,应进一步针对获得的几株菌分别进行培养基及培养条件优化,并在分析这些菌株所产蛋白酶性质的基础上利用摇瓶发酵实验确定蛋白酶高产菌株。 43. 如果要从环境中分离能利用苯作为碳源和能源的微生物纯培养物,你如何设计实验?(1)从苯含量较高的环境中采集土样或水样;(2)配制培养基,制备平板,一种仅以苯作为惟一碳源(A),另一种不含任何碳源作为对照(B);(3)将样品适当稀释(十倍稀释法),涂布A平板;(4)将平板置于适当温度条件下培养,观察是否有菌落产生;(5)将A平板上的菌落编号并分别转接至B平板,置于相同温度条件下培养(在B平板上生长的菌落是可利用空气中C02的自养型微生物);(6)挑取在A平板上

20、生长而不在B平板上生长的菌落,在一个新的A平板上划线、培养,获得单菌落,初步确定为可利用苯作为碳源和能源的微生物纯培养物;(7)将初步确定的目标菌株转接至以苯作为惟一碳源的液体培养基中进行摇瓶发酵实验,利用相应化学分析方法定量分析该菌株分解利用苯的情况。 44. 胃八叠球菌和运动发酵蛋白菌产生乙醇的方式有什么不同?糖酵解:最著名和研究最彻底的糖酵解形式是双磷酸已糖降解途径。另一途径是脱氧酮糖酸途径)运动发酵单胞菌是唯一一种通过脱氧酮糖酸葡萄糖酵解途径(ED)将葡萄糖和果糖转化为乙醇的细菌。 胃八叠球菌和肠杆菌在厌氧条件下也可通过EMP途径进行乙醇发酵。45. 光合细菌分几类,细菌的光合作用与绿

21、色植物的光合作用之间有什么不同?根据光合细菌所含光合色素和电子供体的不同而分为产氧光合细菌(蓝细菌、原绿菌)和不产氧光合细菌(紫色细菌和绿色细菌)。46. 一酵母突变株的糖酵解途径中,从乙醛到乙醇的路径被阻断,它不能在无氧条件下的葡萄糖平板上生长,但可在有氧条件下的葡萄糖平板上存活。试解释这一现象。从乙醛到乙醇的路径被阻断,仅仅阻断的是无氧呼吸的最后一步,即糖酵解过程中产生的NADPH中的氢将乙醛还原为乙醇。 但是在有氧的情况下,糖酵解过程中产生的氢将不再用于把乙醛还原为乙醇,而是直接运送到线粒体中进行氧化产生水,即不经过从乙醛到乙醇的这一阶段,因此可以在有氧条件下的葡萄糖平板上存活。47.

22、论述不同微生物在不同条件下丙酮酸的去向厌氧性微生物:丙酮酸可以生成乳酸或乙醇。好氧性微生物:丙酮酸继续氧化分解为水及二氧化碳。48. 化能异养微生物的生物氧化中,糖酵解有几条主要途径?EMP途径:两个阶段:耗能阶段 产能阶段 HMP途径:单磷酸已糖途径ED途径:可不依赖EMP和HMP的途径TCA途径:柠檬酸循环49. 糖酵解形成的丙酮酸代谢有几种主要类型,各有哪些类型的微生物参与?EMP-原核生物 酵母菌 HM-大多数好氧兼性厌氧微生物 ED-广泛在于革兰氏阴性菌 磷酸解酮酶途径 50. 细菌的乙醇发酵有几种类型,与酵母菌的一型乙醇发酵相比有什么特点?1.以运动发酵单细胞菌和厌氧菌发酵单细胞

23、ED途径-乙醇 2、厌氧菌(胃八叠球菌 肠杆菌) EMP途径-乙醇 酵母菌的一型:无氧条件,经EMP途径产物为乙酸特点:还原途径多种多样 ED途径不依赖EMP HM 而独立存在,是EMP途径的替代 51. 微生物的能量转换有几种类型氧化磷酸化:物质在生物氧化过程中形成的NADH和FADH2可通过传递系统将电子传递给氧或其他氧化型物质,这个过程偶联着ATP的合成,这种产生ATPDE方式为底物水平磷酸化:物质在生物氧化过程中,常生成一些含有高能键的化合物 而这些化合物课直接和ATP或GTP的合成,这种产生ATP的方式为底物水平磷酸化光合磷酸化:光能转变为化学能的过程中,当1个叶绿素分子吸收光量子时

24、,叶绿素被激活,导致叶绿素释放1个电子而被氧化,释放出的电子在电子传递系统中逐步释放能量52. 呼吸链:由一系列氧化还原不同的氢传递组成的一组链状传递顺序53. 循环光合磷酸化:在光能的驱动下通过电子的循环式传递完成磷酸化产能反应。54. 非循环光合磷酸化:高等植物和蓝细菌与其光合细菌不同,他们可以裂解水,以提供细胞合成的还原能力55. 氧化磷酸化:物质在生物氧化过程中形成的NADH和FADH2可通过传递系统将电子传递给氧或其他氧化型物质,这个过程偶联着ATP的合成,这种产生ATP的方式为56. 底物水平磷酸化:物质在生物氧化过程中,常生成一些含有高能键的化合物 而这些化合物课直接和ATP或G

25、TP的合成,这种产生ATP的方式为底物水平磷酸化57. 发酵:微生物细胞将有机物氧化释放后电子直接交给底物本身未完全氧化的某种中间产物,同时释放能量并产生各种不同的代谢物58. 糖酵解:生物体内葡萄糖被降解为丙酮酸的过程59. 有氧呼吸:是以分子氧作为最终电子受体的氧化过程60. 无氧呼吸:以外源无机氧化物中的氧作为最终电子受体的氧化作用61. 酶活性调节:是指一定数量的酶,通过其分子构象或分子结构的改变来调节其催化反应的速率。62. 酶合成调节:指通过调节酶分子的合成量来调节其催化反应的速率63. 次级代谢:是指微生物在一定生长时期,以初级代谢产物为前提,合成一些对微生物的生命活动无明确功能

26、的物质的过程。64. 次级代谢产物:是指微生物在一定生长时期,以初级代谢产物为前提,合成一些对微生物的生命活动无明确功能的物质,这一过程的产物,即为次级代谢产物。65. 化能自养细节中,硝酸细菌是如何获得其生命活动所需APT和还原力【H】的?ATP:通过还原态NH3和NO-2经硝酸细菌氧化产生的。还原力H:通过耗ATP的无机氢的逆呼吸传递而产生。66. 分支代谢途径中存在哪些主要的反馈抑制类型?1、同工酶反馈抑制 2、协同反馈抑制 3、积累反馈抑制 4、顺序反馈抑制67. 试分析影响微生物生长的主要因素及它们影响微生物生长繁殖的机制。1、营养物质:营养不足导致微生物生长所需要的能量、碳源、氮源

27、、无机盐等成分2、水:微生物在生化过程中,对培养基的水活度aw有一定要求aw过高或低于要求aw都会影响培养基的渗透压度而影响微生物生长3、温度:影响酶的活性 影响细胞质膜的流动性 影响物质的溶解度 4、PH:PH通过影响细胞质膜的特性,膜结构的温度性和物质的溶解性或电离性来影响营养物质的吸收,从而影响微生物的生长速率 5、氧:不同类型的菌对的需求不同68. 控制微生物生长繁殖的主要方法及原理有哪些?物理方法:高温灭菌,引起蛋白质、核酸等大部分变性,失活 过滤除菌法,用一定孔径滤膜过滤 干燥,引起胞内蛋白质性和盐类浓度的提高,抑制微生物生长 辐射作用,降低蛋白质和核酸打的活性化学方法:抗微生物剂

28、:一类是能够杀死微生物的如消毒剂,另一类抑制微生物生长的防腐剂 抗生素:抑制细胞壁的合成,破坏细胞膜功能,抑制蛋白质合成,干扰核酸代谢69. 细菌耐药性机制是哪些?如何避免抗药性的产生? 耐药性机制:1、细胞膜的透性改变,阻止药物进入细胞;2、合成了修饰抗生素的酶,使其失活;3、药物作用的靶改变,对抗生素不敏感;4、抗性菌株发生遗传变异。措施:1、第一次使用药物剂量要足;2、避免在一个时期或长期多次使用同种抗生素;3、不同抗生素混合使用;4、对现有抗生素进行改造;5、筛选新的更有效的抗生素。70. 试举例说明日常生活中采用的防腐、消毒和灭菌的方法及原理。1) 煮沸消毒法 a) 将水加热至100

29、,煮沸15min30min。(加1%Na2CO3或2-5%石炭酸杀菌效果好)2) 巴斯德消毒法(Pasteurization):a) 62.930min处理牛奶 b) 71.615s处理牛奶3) 超高温灭菌法(Ultrapasteurization): a) 140(135150 )左右2-6s,急剧冷却至75. 4) 间歇灭菌法:5) 80-100蒸煮15-60min,冷却后搁置室温(28-37)下过夜,并重复三遍以上。原理:6) 冷藏法:5,微生物斜面菌种放置冷藏箱中可保存数周至数月而不衰竭死亡;食品保鲜7) 冷冻法:食品工业中采用-10左右的冷冻温度较长时间地保藏食品;冷冻法也可用作菌种

30、保藏,但所需温度更低,如-80低温冰箱、或-78干冰、或-80液氮中冷冻保存。原理:低温是通过降低酶反应速度使微生物生长受到抑制。71. 生长:微生物细胞吸收营养物质,进行新陈代谢,当同化作用大于异化作用时,生命个体的重量和体积不断增大的过程。繁殖:生长到一定阶段后,通过特定方式产生新的生命个体,是有机体数量增加的生物学过程。72. 灭菌:指利用某种方法杀死物体中包括芽孢在内的所有微生物的一种措施。73. 消毒:利用某种方法杀死或灭活物质或物体中所有病原微生物的一种措施。74. 防腐:是在某些化学物质或物理因子作用下,防止或抑制微生物生长的一种措施。75. 化疗:是指利用具有选择性的化学物质如

31、磺胺、抗生素等对生物体内部被微生物感染的组织或病变细胞进行治疗,以杀死组织内的病原微生物或病变细胞,但对机体本身无毒性或毒性很小的治疗措施。76. 同步生长及其获得方式。同步生长:一个细胞群体中各个细胞都处于同一生长阶段,在同一时间进行分裂的状态。获得方式:1、机械法:密度梯度离心法、过滤离心法、硝酸纤维滤膜法。2环境条件有道法:温度、培养基成分、光照获得方式:1、诱导法:、化学诱导;b、物理诱导;2、筛选法:a、过滤法;b、区带密度梯度法;c、膜洗脱法。77. 什么是微生物的典型生长曲线?各期的主要特点,研究的意义。生长曲线:以时间为横坐标,以菌数为纵坐标,根据不同培养时间里细菌数量的变化可

32、以作出一条反映细菌在整个培养期间细菌数的变化规律曲线。1、迟缓期:特点:1、比生长速率常数=0;2、细胞形态变大或增长;3、细胞内RNA特别是rRNA含量增高;4、合成代谢活跃,易产生诱导酶;5、对外界不良条件敏感。意义:1、在发酵工业上需设法尽量缩短迟缓期;2、在食品工业上,尽量在此期进行消毒或灭菌。2、对数期:特点:1、比生长速率常数最大,而代时最短;2、细胞平衡生长,菌体生长、形态、生理特征等比较一致;3、代谢最旺盛;4、细胞对理化因素较敏感。意义:1、增值噬菌体的最适菌龄,生产上用作接种的最佳菌龄;2、食品工业上,尽量防止有害微生物进入此期;3、发酵工业上,尽量延长该期,达到较高的菌体

33、密度;4、是生理代谢及遗传研究或进行染色、形态观察等的良好材料。3、稳定期:特点:1、新增殖的细胞数与老细胞的死亡数几乎相等,培养物中的细胞数达到最高值;2、细胞分裂速率下降,形成积累内含物,产芽孢的细菌开始产芽孢;3、开始合成次生代谢产物。意义:1、发酵生产形成的重要时期;2、稳定期细胞数目及产物积累达到最高。4、衰亡期:特点:1、细胞死亡数增加,群体中的菌数目急剧下降,出现次生长;2、细胞内颗粒更加明显,细胞出现多形态,畸形或衰退形,芽孢开始释放;3、产生自溶的菌,生长曲线表现为向下跌落的趋势。78. 什么叫连续培养?比较恒浊器和恒化器的特点。连续培养:是在微生物的整个培养期间,通过一定的

34、方式是微生物能以恒定的比生长速率生长并能持持生长下去的一种培养方法。恒化器特点:维持营养成分亚适量,使其成为生长限制因子,菌体生长速率恒定且低于最高密度,产量低于最高菌体产量。 恒浊器特点:基质过量,以最高速率生长,并在允许范围内控制菌体密度。 装置控制对象培养基培养基流速生长速率产物应用范围恒浊器菌体密度(内控制)无限制生长因子不恒定最高大量菌体或与菌体形成相平行的产物生产为主恒化器培养基流速(外控制)有限制生长因子恒定低于最高不同生长速率的菌体实验室为主79. 什么叫最适生长温度?对同一微生物的生长速度、生长量、代谢速度、各代谢产物累积的影响是否相同?研究这一问题有何实践意义?最适生长温度

35、:指微生物繁殖最快的温度。 不同。 意义:1、微生物工业生产上,为其提供温度参考;2、灭菌时,提供温度对其的影响。80. 从对分子氧的要求看,微生物可分为几种类型?各有何特点?好氧菌:1专性好氧菌:特点:通过呼吸链以分子氧作为最终受体,有SOD超氧化物歧化酶和H2O2酶。微好氧菌:特点:在低氧分压下正常生长通过呼吸链以分子氧作为最终氢受体,有SOD酶和H2O2酶。 厌氧菌:1耐氧厌氧菌:特点:分子氧对它无毒害,不具呼吸链,靠发酵供能,有SOD酶,过氧化物酶,无过氧化氢酶。2专性厌氧菌:特点:分子氧对它有毒害,通过发酵、无氧呼吸、循环光合磷酸化或甲烷发酵供能,无SOD酶,无H2O2酶。兼性厌氧菌

36、:特点:有氧或无氧均可生长,有氧时,呼吸产能。无氧时,发酵或无氧呼吸产能,含有SOD酶和H2O2酶。81. 氧对厌氧菌的毒害机制是什么?过氧化氢酶、各氧化物酶、SOD各催化什么反应?氧对厌氧菌的毒害机理:(SOD学说)严格厌氧微生物不是被氧所杀,而是因无法解除氧代谢产物的毒性而死亡,而氧还原为水时,可形成有毒的中间产物(氧二负离子),氧二负离子为活性氧兼分子和离子的性质,可破坏膜和生物大分子,对微生物造成毒害或致死厌氧菌中因无SOD酶,而无法消除氧二负离子。82. 在发酵生产过程中,是否要求整个培养过程都保持同样的温度、通气量和pH?为什么。不要求,因为在发酵的各个阶段对温度,通气量和PH的要

37、求不一样。83. 在微生物培养中,引起pH改变的原因有哪些?在实践中如何保证微生物处于较稳定和合适的pH环境中?原因:微生物生长过程中营养物质的利用和代谢产物的生成与积累,如大肠杆菌能产生有机酸使pH下降。 稳定方式:内源调节:在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸盐;调节培养基的碳氮比。 外源调节:按实际需要不断向发酵液流加酸或碱液实际中长时间稳定pH是不可能的,只能一定时间延长稳定,方法可以是“连续培养法”84. 加压蒸汽灭菌时,影响灭菌效果的因素有哪些?1.同培养基的性质有关:1酸碱性:酸性易灭菌2糖.蛋白质.脂质:增加热炕,不易灭菌3盐浓度2细胞的干湿程度:干细胞抗性增强,不易灭菌85.

38、 抗代谢药物和抗生素的作用机制各是什么?抗代谢药物:利用生长因子的结构类似物干扰抗体的正常代谢,达到抑制微生物生长的目的。抗生素作用机制:通过抑制细菌细胞壁合成,破坏细胞质膜,作用于呼吸链以干扰氧化磷酸化,抑制蛋白质和核酸合成等方式来抑制微生物的生长或杀死微生物。86. 病毒粒子: 成熟的巨头侵染力的单个病毒,对称病毒颗粒87. 包涵体:感染病毒的宿主细胞内,出现在光学显微镜下可见的大小形态数量不等的小体88. 噬菌斑:在宿主细菌的菌苔上,噬菌体使菌体表面裂解形成的空斑89. 类病毒:一种不具有蛋白质外壳仅由一个裸露的大约由350个核苷酸组成的单链环状RNA病原体90. 朊病毒:是一类能侵染动

39、物并在宿主细胞内复制的小分子无免疫性的疏水蛋白质91. 卫星病毒:卫星病毒是存在于自然界中的一种绝对缺损病毒,其形态结构和抗原性都与辅助病毒不同,其基因组与辅助病毒的基因组也很少有同源性。92. 温和噬菌体:吸附并侵入细胞后,噬菌体的DNA整合在宿主的染色体组上,并可长期随宿主DNA的复制而同步复制93. 溶源菌 可稳定遗传,即溶源菌的子细胞一般也是溶原性的。 自发裂解(10-5)和诱发裂解具有抗同原噬菌体感染的“免疫性”溶源性细菌的复愈获得新的生理特性(溶源性转变)局限性转导94. 逆转病毒: 一类含有逆转录酶的单股正链RNA病毒 一类含有逆转录酶的单股正病链毒95. 病毒的对称体制有几种,

40、举例说明。螺旋对称的病毒(杆状) 烟草花叶病毒 二十面体对称病毒粒子(球状) 腺病毒 复合对称的病毒粒子(蝌蚪状) 大肠杆菌T4噬菌体 尾噬菌体97. 什么叫一步生长曲线,分为几期。一步生长曲线:定量描述烈性噬菌体增殖规律的实验曲线称作一步生长曲线或一级生长曲线。潜伏期 从噬菌体吸附细菌细胞至细菌细胞释放出新的噬菌体的最短时间。又可分为隐晦期和胞内累积期。裂解期 从被感染的第一个细胞裂解至最后一个细胞裂解完毕所经历的时间。平稳期 指被感染的宿主已全部裂解,溶液中噬菌体数达到最高点后的时期。 裂解量 每个被感染的细菌释放新的噬菌体的平均数 98. 简述烈性噬菌体的生活史。吸附侵入增殖成熟裂解10

41、0. 病毒区别于其他生物的特点是什么?根据你的理解,病毒应如何定义?1)形体极其微小,在电镜下才可以观察 。2)不具有细胞结构,具有一般化学大分子的特征3)在离体条件下,能以无生命的生物大分子状态存在4)每一种病毒只含一种核酸,DNA或RNA5)不能进行独立的代谢作用。6)只能利用活细胞进行自身的繁殖定义:一类没有细胞结构但有遗传复制等生命特征,主要有核酸和蛋白质组分的大分子生物101. 病毒壳结构有哪几种对称形式?毒粒的主要结构类型有哪些?(1)螺旋对称壳体(蛋白质亚基有规律地沿着中心轴(核酸)呈螺旋排列,进而形成高度有序、对称的稳定结构),二十面体对称壳体(构成对称结构壳体的第二种方式是蛋

42、白质亚基围绕具立方对称的正多面体的角或边排列,进而形成一个封闭的蛋白质的鞘),双对称结构(若以一定数目的亚基排列成具有一定表面积的立方对称实体,以二十面体容积为最大,能包装更多的病毒核酸)。 (2)裸露的二十面体毒粒,裸露的螺旋毒粒,有包膜的二十面体毒粒和有包膜的螺旋毒粒。102. 病毒复制循环可分为那几个阶段?各个阶段的主要过程如何?答:1、吸附 病毒表面蛋白与细菌受体的特异性结合,导致病毒附着于细胞表面,这是启动病毒感染的第一步。2、侵入:以注射方式将噬菌体核酸注入细胞。3、增殖:病毒核酸侵入细胞内 宿主细胞的代谢发生改变 病毒利用宿主的生物合成机构和场所,使病毒核酸表达和复制,产生大量的

43、病毒蛋白质和核酸。4、装配:(噬菌体)装配过程包括4个完全独立的亚装配途径:无尾丝的尾部装配,头部的装配,尾部与头部自发结合,单独装配的尾丝与前已装配好的颗粒相连。5、释放:大多数噬菌体都是以裂解的形式释放103. 病毒的非增值性感染有哪几类?引起病毒非增值性感染的原因是什么?流产感染,限制性感染和潜伏染。由于病毒或宿主细胞的原因,导致病毒感染的不完全循环,不产生有感染性的病毒子代。104. 噬菌体是如何感染宿主细胞的?叙述它与宿主细胞间的相互关系。1、吸附宿主细胞 2、侵入和脱壳 3、生物合成遗传物质和蛋白质 4、遗传物质和蛋白质的组装 5、释放子代病毒 它与宿主细胞是寄生关系105. 亚病毒有哪几类?各自有何特点?卫星病毒:卫星病毒是一类基因组缺损、需要依赖辅助病毒,基因才能复制和表达,才能完成增殖的亚病毒,不单独存在,常伴随着其他病

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