人类性染色质标本制作

1、人类性染色质标本的制人类性染色质标本的制作与观察作与观察 实验目的实验目的一、了解一、了解X染色质的不同检测方法及意义。染色质的不同检测方法及意义。二、掌握二、掌握X染色质的形态特点。染色质的形态特点。三、初步掌握显微镜下三、初步掌握显微镜下X染色质的识别方法染色质的识别方法实验原理实验原理人类性染色质人类性染色质（sex chromatin boby）是在间期）是在间期细胞核中染色体的异染色质部分显示出来的一种细胞核中染色体的异染色质部分显示出来的一种特殊结构，其包括特殊结构，其包括X染色质和染色质和Y染色质。染色质。Lyon假说假说：英国遗传学家：英国遗传学家Mary Lyon 在在196

2、1年年首先提出了上述首先提出了上述X染色体失活假说，即染色体失活假说，即Lyon假说假说其要点是：雌性哺乳动物细胞内只有一条其要点是：雌性哺乳动物细胞内只有一条X染染色体有活性，另一条失活并固缩，后者在间期细色体有活性，另一条失活并固缩，后者在间期细胞表现为性染色质；失活发生在胚胎的早期；胞表现为性染色质；失活发生在胚胎的早期；失活是随机的，即失活的失活是随机的，即失活的X染色体既可来自父染色体既可来自父亲也可来自母亲，但一个细胞某条亲也可来自母亲，但一个细胞某条X旦失活，旦失活，由该细胞繁衍而来的子细胞都具有同一条失活的由该细胞繁衍而来的子细胞都具有同一条失活的X染色体。染色体。 剂量补偿效

3、应剂量补偿效应：使细胞核中具有两份或两份以上基因：使细胞核中具有两份或两份以上基因的个体和只有一份基因的个体出现相同表型的遗传效的个体和只有一份基因的个体出现相同表型的遗传效应。应。 对于性染色体来讲，包括人类在内的哺乳动物雌对于性染色体来讲，包括人类在内的哺乳动物雌性个体的每一体细胞中有两条性个体的每一体细胞中有两条X染色体，所以在染色体，所以在X染色染色体上的基因剂量有两份，而雄性个体只有一条体上的基因剂量有两份，而雄性个体只有一条 X染色染色体，基因剂量只有一份。剂量补偿效应使体，基因剂量只有一份。剂量补偿效应使 X连锁性状连锁性状的表现在雌雄个体之间并无不同。的表现在雌雄个体之间并无不

4、同。1932年美国遗传年美国遗传学家学家H.J.马勒首先在果蝇中发现了这种效应，并把它马勒首先在果蝇中发现了这种效应，并把它看作是维持雌雄两性生物基因表达的一致所特有的一看作是维持雌雄两性生物基因表达的一致所特有的一种遗传效应。种遗传效应。 器材器材：染色缸，显微镜，载玻片，镊子，滴管，：染色缸，显微镜，载玻片，镊子，滴管，擦镜纸等。擦镜纸等。 试剂试剂：乙醇，甲醇，冰乙酸，流堇染料，乙醚，：乙醇，甲醇，冰乙酸，流堇染料，乙醚，香柏油，甲醇冰乙醇固定液等。香柏油，甲醇冰乙醇固定液等。 材料材料：带有毛囊的发根。：带有毛囊的发根。 实验材料实验材料 实验步骤实验步骤1、取材取材 取取2 3根头发

5、，要带有完整的毛囊组织。根头发，要带有完整的毛囊组织。2、软化与涂片软化与涂片 加加1滴滴40%醋酸软化毛囊，醋酸软化毛囊，5 10min后，刮下毛囊，弃发干，涂片后，刮下毛囊，弃发干，涂片1cm2大小，烘大小，烘干。干。3、固定固定 加固定液加固定液2 3滴，晾干。滴，晾干。4、水解水解 放入放入5N HCL中中10min，自来水冲洗，自来水冲洗2min，稍干后染色。稍干后染色。5、染色染色 加入数滴流堇染液，染色加入数滴流堇染液，染色10 15min冲洗，晾干。冲洗，晾干。6、观察计数观察计数 在显微镜下观察并计数。在显微镜下观察并计数。注意事项注意事项1、染料要现用现配。、染料要现用现配。2、要正确使用显微镜，避免损伤显微镜。、要正确使用显微镜，避免损伤显微镜。3、计数时要注意避开干扰因