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文档简介
1、一名词解释:(每题4 分,共24分) 1、基因家族2、mRNA选择性剪接3、RNA干涉技术4、基因定点诱变5、错义突变6、转基因技术二填空题(请将正确答案填在横线上,每空1分,共25分)1、原癌基因可通过_、_、_、_机制激活。获得启动子、增强子;基因易位;原癌基因扩增;点突变2、基因突变可引起遗传密码的改变,根据基因突变产生的遗传效应不同可分为:_、_、_、_人类基因组遗传标记有_、_、_。4、 基因是负责编码RNA或_所必需的全部核酸序列。它包括_、_、_三部分序列。5、 基因治疗的基本策略有:_、_、_、_、_。
2、6、PCR-SSCP分析是一种基于单链DNA构象差别的快速、敏感、有效地检测DNA _和_ 的方法。7、 _ 明显扩大了“自杀基因”的杀伤作用,大大放宽了对基因转移效率的限制,对于“自杀基因”分子化疗的发展具有重要意义。8、 基因诊断的主要技术有 _ 、_、 DNA序列测定、DNA芯片技术。三.单项选择题 (请在括号内填写正确答案,每题1分,共15分.)1、原核生物与真核生物基因组比较,以下哪项是原核生物的特点
3、: ( )A.基因密度高 B.无操纵子结构 C.有多基因家族和假基因 D.多复制起点2、在真核基因表达调控中, 能促进转录的速率。 &
4、#160; ( ) A. 操纵子 B. 增强子 C. 沉默子 D. TATA box3、基因编码序列中中丢失7个核苷酸产生的突变属于:
5、60; ( )A错义突变 B移码突变 C无义突变 D融合突变4、适合制备单链DNA的载体是: &
6、#160; ( )A.粘性质粒 B.M13噬菌体
7、60;C.逆转录病毒 D.腺病毒5、将特定的目的基因导入特定的细胞,通过定位重组,矫正原有的缺陷基因是: ( )A.基因置换 B.基因添加 C.基因干预 D.基因修饰6、逆转录病毒前病毒的结构具有的特点不包括:
8、60; ( )A. 有长末端重复序列LTR B. 由U3、R和U5三部分组成C.病毒有四个结构基因 DLTR中含有增强子、启动子及3加PolyA信号7、可用于分析基因转录水平的变化
9、的是 ( )A.RT-PCR
10、 B. PCR-SSCP C. Southern blot D.DNA测序8、反式作用因子的激活方式不包括:
11、60; ( )A、表达式调节 B.共价修饰 C. DNA成环 D. 蛋白质相互作用9、反义RNA 是指能与以下哪项互补配对的RNA分子:
12、; ( )A. cDNA B.编码链DNA C.反义链的DNA D. mRNA10、在基因治疗中常用的抑制基因表达的技术不包括: &
13、#160; ( )A. 反义RNA B.RNAi C.双链DNA D. 核酶 11、在大肠杆菌中表达真核细胞的目的基因时,下列描述正确的是:
14、0; ( )A.目的基因必须是cDNA B.目的基因必须是基因组DNAC.目的基因必须是mRNA D.必须保留目的基因5端非编码区12、以下哪项不是真核细胞转染的方法:
15、0; ( )A磷酸钙沉淀法 B电穿孔法 C脂质体介导法 D氯化钙转化法13、以下哪项不是基因诊断的特点
16、160; ( )A.高灵敏度 B.结果稳定 C.早期诊断
17、 D.依赖表型改变14、真核生物基因组与原核生物基因组比较,真核生物基因组具有: ( )A. 多顺反子结构 B. 衰减子 C. 基因是连续的 D.大量
18、的重复序列15、Southern 杂交的原理是根据基因序列合成探针,利用同源互补序列可以退火形成:( )A. 杂交双链DNA B. 杂交三链DNA C. 杂交双链DNA-RNA D. 杂交双链RNA四.问答题(五题,共36分。)1、 简述转座作用的遗传学效应(4分)2、 简
19、述真核生物基因组结构与功能特点(6分)3、 比较原核表达系统与真核表达系统各自优缺点(8分)4、 基因点突变的基因诊断方法及原理(不少于四种方法)(8分)5、 色氨酸操纵子结构与调控机制(10分) 一、 名词解释:1、基因家族:是指核苷酸序列或编码产物具有一定程度同源性的一组基因.2、mRNA的选择剪接:是指真核细胞基因表达所转录出的前体mRNA的剪接过程中,参加拼接的外显子可以不按其在基因组的线性分布次序拼接,内含子也可以不被切除而保留,即一个外显子或内含子是否出现在成熟的mRNA中是可以选择的。这种剪接称
20、mRNA选择剪接。3、RNA干涉技术是指由短的双链RNA诱导的同源RNA降解的过程,可使基因的表达受到抑制。它是在基因的转录后水平抑制基因表达的一种研究基因功能的方法。4、基因定点诱变:指将基因的某一个或某些位点进行人工替换或删除的过程,称为基因定点诱变.5、错义突变:指DNA分子中碱基的取代,经转录产生的mRNA后,相应密码子发生改变,编码另一种氨基酸,使蛋白质中的氨基酸组成和排列顺序发生改变。转基因技术是指将外源基因导入受精卵细胞或胚胎干细胞中,通过外源基因与细胞染色体DNA之间随机重组的发生而将外源基因插入到受体细胞染色体DNA上的过程。二填空题:每空1分,共25分1、
21、60; 2、 同义突变;错义突变;无义突变;移码突变3、 限制性片段长度多态性;微卫星序列;单核苷酸多态性4、 一条多肽链;编码序列;两侧的侧翼序列;插
22、入序列5、 基因添加(增补); 基因干预; 基因置换 ;导入自杀基因; 基因修饰6、 点突变;DNA多态性7、 旁观者效应8、 &
23、#160; 核酸分子杂交;PCR技术三.单项选择题 (每题1分,共15分.)1-5(ABBBA) 6-10( CACDC) 11-15( ADDDA)四、问答题一、简述转座作用的遗传学效应(4分)1、转座引起插入突变(1分) 当插入序列或转座子插入某个基因的操纵序列前时,可引起操纵子后的结构基因表达失活。2、转座可产生新基因(1分) 如果转座子上带有
24、某些抗药性基因,它一方面会造成靶位点DNA突变,同时会使该位点产生抗药性。3、转座可出现染色体畸变发生(1分) 当转座发生在宿主DNA原有位点时,往往导致转座子两个拷贝之间的同源重组,引起DNA的缺失或倒位。4、转座可以引起生物进化(1分) 由于转座作用,使一些原来在染色体上相距甚远的基因组合到一起,构建成一个操纵子或表达单元,也可能产生上些具有新的生物学功能的基因和新的蛋白质分子。二、真核生物基因组结构与功能特点(6分
25、):每点1分1、每一种真核生物都有一定的染色体数目,除了配子为单倍体外,体细胞一般为双倍体。而原核生物为单倍体。2、真核基因组远远大于原核生物基因组,结构复杂,基因数多。具有多个复制起始点。3、真核生物基因组DNA与蛋白质结合形成染色体,储存于核内。4、真核生物中含有大量的重复序列。5、真核生物基因组内非编码序列占90%以上。基因组中非编码序列所占比例是真核生物与细菌、病毒的重要区别,且在一定程度上也是生物进化的标尺。6、真核基因是断裂基因,即编码序列被非编码序列分隔开。比较原核表达系统与真核表达系统各自优缺点(8分)(2分)1 遗传背景清楚,易于遗传操作; 2
26、蛋白表达水平高; 3 生长快, 培养条件要求较低;原核系统缺陷:(2分) 没有真核转录后加工的功能,不能进行mRNA的剪接,所以只能表达cDNA而不能表达真核的基因组基因; 没有真核翻译后加工的功能,表达产生的蛋白质,不能进行糖基化、磷酸化等修饰,难以形成正确的二硫键配对和空间构像折叠,因而产生的蛋白质常没有足够的生物学活性; 表达的蛋白质经常是不溶的,会在细菌内聚集成包涵体(inclusiion body),尤其当表达目的蛋白量超过细菌体总蛋白量10%时,就很容易形成包涵
27、体。利用真核细胞作宿主表达系统的优点是:(2分) 真核细胞能够识别和除去外源基因中的内含子,剪接加工形成成熟的mRNA。 真核细胞将表达的蛋白糖基化,而大肠杆菌表达的蛋白是没有糖基化的,糖基化对某些表达蛋白的免疫原性影响很大。真核细胞作宿主表达系统尚存在以下几个问题:(2分) 选择标记及选择系统只有少数几个; 转化效率低,一般只有10-610-4; 外源基因转移并整合到细胞染色体DNA上带有一定的自发性和盲目性,整合的拷贝数和位置都还不能控制; 细胞培养及细胞的挑选要求比较高,手续繁琐费时。此外,细胞大量培养还有不少问题,而且成本较高,利用培养细胞方式大量生产某些表达蛋白,从工艺到成本都要很好地考虑。基因点突变的基因诊断方法及原理(不少于四种方法)(8分):每点2分采用PCR产物的限制性片段长度多态性分析PCRRFLP就是利用PCR技术先将包含待测位点的
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