蛋白质化学-生物化学

1、2 2 蛋白质化学蛋白质化学Chemistry of Protein2教学要求教学要求 掌握蛋白质基本组成单位掌握蛋白质基本组成单位-氨基酸的种类、基本结构氨基酸的种类、基本结构及主要特点；蛋白质的分子结构（特别是空间结构）；及主要特点；蛋白质的分子结构（特别是空间结构）；蛋白质分子结构与生物学功能的关系；蛋白质的主要蛋白质分子结构与生物学功能的关系；蛋白质的主要理化性质及其应用。理解各种氨基酸的结构；了解蛋理化性质及其应用。理解各种氨基酸的结构；了解蛋白质的分类。白质的分类。教学重点教学重点 氨基酸的结构、种类及主要理化性质；蛋白质的分子氨基酸的结构、种类及主要理化性质；蛋白质的分子结构；蛋

2、白质分子结构与生物学功能的关系；蛋白质结构；蛋白质分子结构与生物学功能的关系；蛋白质的主要理化性质。的主要理化性质。 3蛋白质的定义蛋白质的定义蛋白质蛋白质(Protein(Protein，pr)pr) ：由：由2020种种-氨基酸按照一定的氨基酸按照一定的顺序，通过肽键连接而成的、顺序，通过肽键连接而成的、具有特定立体结构的、具有特定立体结构的、有活性的有活性的生物大分子。生物大分子。蛋白质是一切生物体中普遍存在的。其种类繁多，各蛋白质是一切生物体中普遍存在的。其种类繁多，各具有一定的相对分子质量，复杂的分子结构和特定具有一定的相对分子质量，复杂的分子结构和特定的生物功能；是表达生物遗传性状

3、的一类主要物质。的生物功能；是表达生物遗传性状的一类主要物质。4 C H O N S（ 50%） （7%） （23%） （16%） （03%）Others: P、Cu、Fe、Zn、Mn、Co、Se、I 蛋白质氮元素的含量都相当接近，一般在蛋白质氮元素的含量都相当接近，一般在15%15%1717，平均为，平均为16 16。这是。这是凯氏定氮法凯氏定氮法测测定蛋白质含量的计算基础。定蛋白质含量的计算基础。 2.1 蛋白质的分类蛋白质的分类 蛋白质含量蛋白氮6 .25.1按分子的形状分类按分子的形状分类A.A.球状蛋白质球状蛋白质 外形接近球形或椭圆形，溶解性较好，能形成结晶，外形

4、接近球形或椭圆形，溶解性较好，能形成结晶，大多数蛋白质属于这一类。但肌动蛋白属于球状蛋大多数蛋白质属于这一类。但肌动蛋白属于球状蛋白却不溶于水。白却不溶于水。B.B.纤维状蛋白质纤维状蛋白质 分子类似纤维或细棒。它又可分为可溶性纤维状蛋分子类似纤维或细棒。它又可分为可溶性纤维状蛋白质和白质和 不溶性纤维状蛋白质。不溶性纤维状蛋白质。 不溶性纤维状蛋白质：大多数纤维状蛋白质属此类，不溶性纤维状蛋白质：大多数纤维状蛋白质属此类，如胶原蛋白、弹性蛋白、角蛋白、丝蛋白等。如胶原蛋白、弹性蛋白、角蛋白、丝蛋白等。 可溶性纤维状蛋白质：如肌球蛋白和血纤蛋白原可可溶性纤维状蛋白质：如肌球蛋白和血纤蛋白原可溶

5、于水。溶于水。62.1.2 2.1.2 按组成成分分类按组成成分分类A .单纯蛋白质单纯蛋白质单纯蛋白不含有非蛋白不含有非蛋白质部分质部分。这类蛋白质水解后的最终产物只有氨基酸。单纯蛋白质按其溶解性又可分为单纯蛋白质按其溶解性又可分为: :清蛋白、球蛋白、谷蛋白、醇溶蛋白精蛋白、组清蛋白、球蛋白、谷蛋白、醇溶蛋白精蛋白、组蛋白以及硬蛋白等蛋白以及硬蛋白等7B.B.结合蛋白质结合蛋白质结合蛋白是指由单纯蛋白和结合蛋白是指由单纯蛋白和非非蛋白成分蛋白成分结合而成的蛋白质。结合而成的蛋白质。 这些非蛋白成分包括糖、脂、核酸、色素等，又称这些非蛋白成分包括糖、脂、核酸、色素等，又称为辅基或配体。为辅基

6、或配体。 糖蛋白：如细胞膜中的糖蛋白等。糖蛋白：如细胞膜中的糖蛋白等。 脂蛋白：如血清脂蛋白：如血清 - -， - -脂蛋白等。脂蛋白等。 核蛋白：如细胞核中的核糖核蛋白等。核蛋白：如细胞核中的核糖核蛋白等。 色蛋白：如血红蛋白、叶绿蛋白和细胞色素等。色蛋白：如血红蛋白、叶绿蛋白和细胞色素等。8催化 蛋白质的一个最重要的生物学功能是作为有机体新陈代谢的催化剂酶酶。酶是蛋白质中最大的一类。调节 许多蛋白质具有调节其他蛋白质执行其生理功能的能力 ，这些蛋白质称为调节蛋白转运 功能是从一地到另一地转运特定的物质。贮存 这类蛋白质是氨基酸的聚合物，生物体必要时可利用蛋白质作为提供充足氮素的一种方式。2

7、.1.3 2.1.3 蛋白质的功能蛋白质的功能 9 运动运动 作为运动基础的收缩和游动蛋白具有共同的性质：它们都是丝状分子或丝状聚合体。 结构成分结构成分 蛋白质另一重要功能是建造和维持生物体的结构。 防御和进攻防御和进攻 免疫反应（免疫球蛋白） 异常功能异常功能1011122.2 蛋白质的组成单位蛋白质的组成单位氨基酸氨基酸 氨基酸氨基酸 （amino acidamino acid，aa aa 或或 AAAA）是蛋白质）是蛋白质水解的最终产物，是组成蛋白质的基本单位水解的最终产物，是组成蛋白质的基本单位（构件分子构件分子）。从各种生物体内发现的氨基酸）。从各种生物体内发现的氨基酸已有已有18

8、0180多种，但参与蛋白质组成的常见氨基多种，但参与蛋白质组成的常见氨基酸只有酸只有2020种种，这，这2020种氨基酸称为常见氨基酸或种氨基酸称为常见氨基酸或基本氨基酸。基本氨基酸。13完全水解完全水解： 用浓酸、碱将蛋白质完全水解为氨基酸。用浓酸、碱将蛋白质完全水解为氨基酸。 酸水解酸水解：无消旋作用，产物为无消旋作用，产物为L-L-氨基酸。氨基酸。 碱水解碱水解：多数氨基酸被破坏，有消旋现象。多数氨基酸被破坏，有消旋现象。部分水解部分水解：一般用酶或稀酸在较温和条件下，将蛋白质分子切断，一般用酶或稀酸在较温和条件下，将蛋白质分子切断，产物为分子大小不等的肽段和氨基酸。产物为分子大小不等的

9、肽段和氨基酸。蛋白酶蛋白酶：胰蛋白酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶等。胰蛋白酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶等。142.2.1 氨基酸的结构通式氨基酸的结构通式氨基酸（氨基酸（amino acid, amino acid, 简写简写aa)aa)： 蛋白质的基本组成单位，是含氨基的羧酸。蛋白质的基本组成单位，是含氨基的羧酸。 天然蛋白质由天然蛋白质由2020种氨基酸组成。种氨基酸组成。-氨基酸中氨基酸中碳原子为不对称碳原子（除甘氨酸）。碳原子为不对称碳原子（除甘氨酸）。1）组成蛋白质的）组成蛋白质的aa都是都是-氨基酸氨基酸 （除脯氨酸（除脯氨酸 外）外） ；2）不同）不同aa仅仅R链不同；链不同；3）除甘氨酸外，

10、其余）除甘氨酸外，其余aa的的-碳原子均为不对称碳原子。碳原子均为不对称碳原子。15H甘氨酸甘氨酸CH3丙氨酸丙氨酸L-L-氨基酸的通式氨基酸的通式RC+NH3COO-H16构型：根据甘油醛构型确定D型和L型H2NCHCCH2OHOPhenylalanine (Phe, F)1.1.根据甘油醛原则确定构型根据甘油醛原则确定构型2.2.自然界的氨基酸有两种构型，构型和旋光方向自然界的氨基酸有两种构型，构型和旋光方向没有必然联系。没有必然联系。3.3.组成蛋白质的氨基酸都是组成蛋白质的氨基酸都是L L型，除甘氨酸外都有型，除甘氨酸外都有旋光性。旋光性。L LAAAA172.2.2 氨基酸的分类氨基

11、酸的分类二十种常见蛋白质氨基酸的分类、结构及三字符号二十种常见蛋白质氨基酸的分类、结构及三字符号18 - -氨基酸结构通式氨基酸结构通式 CCOOHHNH2RCOONH3CHR+非解离形式两性离子形式19从营养学角度分：从营养学角度分： 必需氨基酸和非必需氨基酸必需氨基酸和非必需氨基酸 这些体内需要而又不能自身合成，必须由食物供这些体内需要而又不能自身合成，必须由食物供应的氨基酸，称为应的氨基酸，称为营养必需氨基酸。营养必需氨基酸。 人体必需氨基酸有八种：人体必需氨基酸有八种： Met Trp Lys Val Ile Leu Phe Thr 半必需氮基酸：半必需氮基酸：组氨酸、精氨酸组氨酸、精

12、氨酸2.根据是否组成蛋白质来分：根据是否组成蛋白质来分： 蛋白质中常见氨基酸、蛋白质中稀有氨基酸和非蛋蛋白质中常见氨基酸、蛋白质中稀有氨基酸和非蛋白氨基酸。白氨基酸。3.据据R基团基团化学结构化学结构分类分类 ： 脂肪族脂肪族A A（1616种）种）; ;芳香族芳香族A (PheA (Phe、TyrTyr、Trp);Trp);杂环杂环 (His(His、Pro)Pro)204.按按R R基的极性性质可以分成基的极性性质可以分成2 2大类：大类：极性氨基酸极性氨基酸非极性氨基酸非极性氨基酸丙氨酸丙氨酸亮氨酸亮氨酸异亮氨酸异亮氨酸苯丙氨酸苯丙氨酸甲硫氨酸甲硫氨酸色氨酸色氨酸脯氨酸脯氨酸缬氨酸缬氨酸

13、丝氨酸丝氨酸苏氨酸苏氨酸半胱氨酸半胱氨酸酪氨酸酪氨酸天冬酰胺天冬酰胺谷氨酰胺谷氨酰胺甘氨酸甘氨酸天冬氨酸天冬氨酸谷氨酸谷氨酸赖氨酸赖氨酸组氨酸组氨酸精氨酸精氨酸氨基酸氨基酸不带电荷不带电荷带负电荷带负电荷带正电荷带正电荷21非极性非极性R R基氨基酸基氨基酸 这一组中共有这一组中共有9 9种氨基酸种氨基酸a.4a.4种带有脂肪烃侧链的氨基酸种带有脂肪烃侧链的氨基酸 丙氨酸（丙氨酸（AlaAla） 缬氨酸（缬氨酸（ValVal） 亮氨酸（亮氨酸（LeuLeu） 异亮氨酸（异亮氨酸（IleIle） 22H2NCHCCH3OHOAlanine(Ala, A)H2NCHCCHOHOCH3CH3Vali

14、ne(Val, V)丙氨酸丙氨酸缬氨酸缬氨酸23H2NCHCCH2OHOCHCH3CH3Leucine(Leu, L)H2NCHCCHOHOCH3CH2CH3Isoleucine (Ile, I)亮氨酸亮氨酸异亮氨酸异亮氨酸24b. 2b. 2种含芳香环氨基酸种含芳香环氨基酸 苯丙氨酸苯丙氨酸(Phe) (Phe) 色氨酸色氨酸(Trp)(Trp)c. c. 含硫氨基酸含硫氨基酸 甲硫氨酸（甲硫氨酸（MetMet）d. d. 亚氨基酸亚氨基酸 脯氨酸脯氨酸(Pro) (Pro) e. e. 侧链介于极性与非极性之间侧链介于极性与非极性之间 甘氨酸甘氨酸(Gly)(Gly)25H2NCHCCH2

15、OHOHNN+HHistidine(His, H)H2NCHCCH2OHOHNTyptophane (Trp, W )苯丙氨酸苯丙氨酸色氨酸色氨酸26甲硫氨酸（蛋氨酸）甲硫氨酸（蛋氨酸）H2NCHCCH2OHOCH2SCH3M ethionine(M et, M )27HNCOHOProline(Pro, P)脯氨酸脯氨酸H2NCHCHOHOGlycine (Gly,G)甘氨酸甘氨酸28极性但不带电荷的R基氨基酸 这一组中有6种氨基酸a.侧链的极性是由于它们的羟基造成的 苏氨酸苏氨酸 (Thr)(Thr) 丝氨酸丝氨酸 (Ser)(Ser) 酪氨酸酪氨酸 (Tyr)(Tyr)b.R基极性是它们

16、的酰胺基引起的 天冬酰胺天冬酰胺 (AsnAsn) 谷氨酰胺谷氨酰胺 (GlnGln)c.由于含有巯基的缘故 半胱氨酸半胱氨酸 (Cys)(Cys)29H2NCHCCH2OHOOHSerine(Ser, S)丝氨酸丝氨酸H2NCHCCH2OHOOHTyrosine(Tyr, Y)酪氨酸酪氨酸H2NCHCCHOHOOHCH3Threonine (The, T)苏氨酸苏氨酸30H2NCHCCH2OHOCH2CNH2OG lutam ine (G ln, Q )天门冬酰胺天门冬酰胺谷氨酰胺谷氨酰胺H2NCHCCH2OHOCNH2OAsparagine (Asn, N)31H2NCHCCH2OHOSH

17、Cysteine(Cys, C)半胱氨酸半胱氨酸32带负电荷的R基氨基酸 这一类的是两种酸性氨基酸 天冬氨酸天冬氨酸 (Asp)(Asp) 谷氨酸谷氨酸 (Glu)(Glu) 33H2NCHCCH2OHOCO-OAspartate(Asp, D)H2NCHCCH2OHOCH2CO-OGlutamate (Glu, E)天门冬氨酸天门冬氨酸谷氨酸谷氨酸34带正电荷的R基氨基酸 这一类氨基酸在pH=7时携带净正电荷，又叫碱性氨基酸 赖氨酸赖氨酸(Lys)(Lys)：除-氨基外，在脂肪链的 位置上还有一个氨基 精氨酸精氨酸(Arg):(Arg): 含有一个带正电荷的胍基 组氨酸组氨酸(His):(H

18、is): 有一个咪唑基 35C HN H3+C O O-R C HN H3+C O O-RH2NCHCCH2OHOCH2CH2NHCNH2NH2+Arginine(Arg, R)H2NCHCCH2OHOCH2CH2CH2NH3+ Lysine(Lys, K)精氨酸精氨酸赖氨酸赖氨酸组氨酸组氨酸36不常见的蛋白质氨基酸不常见的蛋白质氨基酸 NHHOCOOH4-羟基脯氨酸H2NCH2CHCH2CH2CHCOOHOHNH25-羟基赖氨酸NH2CH3NHCH2CHCH2CH2CHCOOH6-N-甲基赖氨酸HOIICH2CHCOOHNH23,5-二碘酪氨酸 37 非蛋白质氨基酸非蛋白质氨基酸：存在于生物

19、体内，但不组成蛋白质存在于生物体内，但不组成蛋白质 的呈游离或结合态的氨基酸，约的呈游离或结合态的氨基酸，约150150种，具有多种生理种，具有多种生理功能。功能。（1 1） L-L- -氨基酸的衍生物氨基酸的衍生物 L- L-瓜氨酸和瓜氨酸和L-L-鸟氨酸是合成精氨酸的中间产物。鸟氨酸是合成精氨酸的中间产物。（2 2）D-D- -氨基酸氨基酸 D-Ala D-Ala存在于肽聚糖中，存在于肽聚糖中，D-PheD-Phe是短杆菌肽是短杆菌肽S S的组分。的组分。（3 3）、-氨基酸氨基酸 -Ala -Ala是泛酸的前体，是泛酸的前体，-氨基丁酸是传递神经冲动氨基丁酸是传递神经冲动的化学介质。的化

20、学介质。 382.2.3 2.2.3 氨基酸的性质氨基酸的性质 氨基酸在结晶形态或在水溶液中，并不是以游离的羧基或氨基形式存在，而是离解成两性离子。在两性离子中，氨基是以质子化(-NH3+)形式存在，羧基是以离解状态(-COO-)存在。 在不同的pH条件下，两性离子的状态也随之发生变化。2) 2) 氨基酸的两性解离和等电点氨基酸的两性解离和等电点1)1)一般物理性质一般物理性质无色晶体；高熔点；溶解于水。39pH=pI+OH-pHpI+H+OH-+H+pHpI带电荷为零带电荷为零 带电荷为正带电荷为正带电荷为负带电荷为负CHNH2COO-R CHNH2COO-RCH COOHRNH3+CH C

21、OOHRNH3+完全质子化完全质子化完全去质子化完全去质子化两性离子两性离子(pK 1)(pK 2)不同不同pHpH时氨基酸以不同的离子化形式存在！时氨基酸以不同的离子化形式存在！ 40 氨基酸是两性电解质，其解离程度取决于所处溶液的酸氨基酸是两性电解质，其解离程度取决于所处溶液的酸碱度。碱度。 等电点等电点(isoelectric point, pI):(isoelectric point, pI): 在某一在某一pHpH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性，的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性，在电在电场中既不

22、向阳极也不向阴极移动。场中既不向阳极也不向阴极移动。此时溶液的此时溶液的pHpH值值称称为为该氨基酸的等电点。该氨基酸的等电点。41等电点的计算等电点的计算R-R+R 由上式可知解离常数：由上式可知解离常数：K1=RH+ R+K2=RR-H+ 42R+= RH+ R K2K1R-= H+ RH+ K1=R K2H+ K1 K2 =H+ 2由此可知： 已知在pI时， R+= R-，整理可得：43两边取负对数：两边取负对数： -lg H+ 2 = - lg K1 - lg K2 -lg H+ = pH - lg K1 = pK1 - lg K2 = pK2 2 pH = pK1 + pK2令令 p

23、I为等电点时的为等电点时的pH，则则 pI = （ pK1 +pK2）Gly：pI = （2 .4 + 9.6) = 5.9744氨基酸等电点的确定：氨基酸等电点的确定：根据根据pK值（该基团在此值（该基团在此pH一半解离）计算：一半解离）计算：等电点等于两性离子两侧等电点等于两性离子两侧pK值的算术平均数。值的算术平均数。pI = pK1+pK22或（或（ pI = ）pK2+pK3245 酸性氨基酸、碱性氨基酸的酸性氨基酸、碱性氨基酸的pI计算：计算： a、先写出其解离公式；先写出其解离公式； b、后取兼性离子两侧基团的后取兼性离子两侧基团的pK值的平均值。值的平均值。 46酸性氨基酸，以

24、酸性氨基酸，以Asp为例：为例：472.2.含有两个羧基的氨基酸是：含有两个羧基的氨基酸是：A.A.丝氨酸丝氨酸 B.B.酪氨酸酪氨酸 C.C.谷氨酸谷氨酸 D.D.赖氨酸赖氨酸 E.E.苏氨酸苏氨酸1.1.测某一生物样品含氮量为测某一生物样品含氮量为g g，则该样品中所含蛋白质则该样品中所含蛋白质为为A.18g B.24g C.10.25g D.64g E.25g A.18g B.24g C.10.25g D.64g E.25g 3.3.组成蛋白质的组成蛋白质的2020种氨基酸中除一个外，其它氨基酸上的种氨基酸中除一个外，其它氨基酸上的位碳原子均是不对称原子，它是：位碳原子均是不对称原子，它

25、是：A.Ala B.Ile C.Pro D.Gly E.HisA.Ala B.Ile C.Pro D.Gly E.His4.4.组成蛋白质的氨基酸种类不同是在于：组成蛋白质的氨基酸种类不同是在于：A.A.羧基位置不同羧基位置不同 B.B.氨基位置不同氨基位置不同 C.RC.R基种类不同基种类不同D.D.氨基酸的旋光性不同氨基酸的旋光性不同 E.E.氨基酸的组成元素不同氨基酸的组成元素不同 485.5.在在2020种氨基酸中，酸性氨基酸有种氨基酸中，酸性氨基酸有 和和 2 2种，种，具有羟基的氨基酸是具有羟基的氨基酸是 和和 ，能形成二，能形成二硫键的氨基酸是硫键的氨基酸是 。6.6.组成蛋白质

26、的组成蛋白质的2020种氨基酸中，含有咪唑环的氨基酸种氨基酸中，含有咪唑环的氨基酸是是 ，含硫的氨基酸有，含硫的氨基酸有 和和 。 7.7.下列哪种氨基酸属于亚氨基酸？下列哪种氨基酸属于亚氨基酸？ A A丝氨酸丝氨酸 B B脯氨酸脯氨酸 C C亮氨酸亮氨酸 D D组氨酸组氨酸 8.8.两性离子两性离子 指在同一氨基酸分子上含有等量的正负两种电荷，又称指在同一氨基酸分子上含有等量的正负两种电荷，又称兼性离子或偶极离子。兼性离子或偶极离子。 493）紫外吸收性质）紫外吸收性质 只有芳香族氨基酸有紫外吸收能力，因其含有苯环只有芳香族氨基酸有紫外吸收能力，因其含有苯环共轭双键的共轭双键的R R侧链。侧

27、链。 酪氨酸酪氨酸 ( (Tyr) Tyr) max max ：270nm270nm 苯丙氨酸苯丙氨酸( (Phe) Phe) maxmax ：259nm259nm 色氨酸色氨酸 ( (Try) Try) maxmax ：279nm279nm 所以，测样品所以，测样品280280nmnm处的光吸收值，可知溶液中蛋白处的光吸收值，可知溶液中蛋白质浓度。此法快速简便。质浓度。此法快速简便。504 4） 氨基酸的化学反应氨基酸的化学反应 C O O HCHH2NR51（1 1）与亚硝酸反应）与亚硝酸反应 在室温下亚硝酸能与含游离-氨基氨基的氨基酸起反应，定量地放出氮气，氨基酸被氧化成羟酸(注：含亚氨

28、基的脯氨酸则不能与亚硝酸反应)。RCH COOHNH2+ HNO2RCHCOOHOH+ H2O + N2 52（2 2）与）与2 2，4-4-二硝基氟苯的反应二硝基氟苯的反应 (Sanger反应） 在弱碱性溶液中，氨基酸的- 氨基很容易与2，4-二硝基氟苯（DNFB）作用，生成稳定的黄色2，4-二硝基苯基氨基酸（简写为DNP-氨基酸）。 53+DNFB（dinitrofiuorobenzene）氨基酸氨基酸弱碱中弱碱中DNP-AA(黄色黄色)（sanger反应）反应）+ HF54（3 3）与异硫氰酸苯酯反应）与异硫氰酸苯酯反应 （Edman反应）反应） 在弱碱性条件下，氨基酸中的-氨基还可以与

29、异硫氰酸苯酯（PITC）反应，产生相应的苯氨基硫甲酰氨基酸（PTC-氨基酸）。在无水酸中，PTC-氨基酸即环化为苯硫乙内酰脲（PTH），后者在酸中极稳定。 这个反应首先被Edman用于鉴定多肽或蛋白质的N-末端氨基酸。55+PITC弱碱中弱碱中(400 C)苯硫乙内酰脲苯硫乙内酰脲(PTH-AA)(PTH-AA)(无水氢氟酸中无水氢氟酸中)H+苯氨基硫甲酰氨基酸苯氨基硫甲酰氨基酸（PTC-PTC-氨基酸）氨基酸）（Edman反应）反应）56（4 4）与丹磺酰氯反应（）与丹磺酰氯反应（DNSDNS） 丹磺酰氯是二甲氨基萘磺酰氯的简称+HCI57 （5 5）与茚三酮反应）与茚三酮反应 茚三酮在弱酸

30、性溶液中与-氨基酸共热，氨基酸被氧化成醛、CO2和NH3，最后茚三酮与反应产物氨和还原茚三酮发生作用，生成蓝紫色化合物。 两个亚氨基酸脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应形成黄色化合物。HNCOHO脯氨酸ProOH羟58NH3CO2 RCHO+还原性茚三酮还原性茚三酮+(弱酸弱酸)加热加热3H20氨基酸与茚三酮反应氨基酸与茚三酮反应水合性茚三酮水合性茚三酮+ 2NH3 +水合性茚三酮水合性茚三酮还原性茚三酮还原性茚三酮蓝紫色化合物蓝紫色化合物59(6)与甲醛反应：氨基酸的甲醛滴定法与甲醛反应：氨基酸的甲醛滴定法OH中和滴定中和滴定60 反应特点反应特点A. 为为- NH2的反应的反应B. 在常温，中性

31、条件，甲醛与在常温，中性条件，甲醛与- NH2很快反应，生很快反应，生成羟甲基衍生物，释放氢离子。成羟甲基衍生物，释放氢离子。 应用：氨基酸定量分析应用：氨基酸定量分析甲醛滴定法（间接滴定）甲醛滴定法（间接滴定）A.直接滴定，终点直接滴定，终点pH过高（过高（12），没有适当指示剂。），没有适当指示剂。B.与甲醛反应，滴定终点在与甲醛反应，滴定终点在9左右，可用酚酞作指示左右，可用酚酞作指示剂。剂。C.释放一个氢离子，相当于一个氨基（摩尔比释放一个氢离子，相当于一个氨基（摩尔比1：1）D.简单快速，一般用于测定蛋白质的水解速度。简单快速，一般用于测定蛋白质的水解速度。61肽肽： 一个氨基酸的一

32、个氨基酸的-羧基和另一个氨基酸的羧基和另一个氨基酸的-氨氨基脱水缩合而成的化合物。基脱水缩合而成的化合物。肽键肽键：氨基酸之间脱水后形成的键称肽键（酰胺键）。：氨基酸之间脱水后形成的键称肽键（酰胺键）。 肽链写法肽链写法：游离：游离-氨基在左，游离氨基在左，游离-羧基在右，氨羧基在右，氨基酸之间用基酸之间用“- -”表示肽键。表示肽键。 H H2 2N-N-丝氨酸丝氨酸- -亮氨酸亮氨酸- -苯丙氨酸苯丙氨酸- -COOHCOOHSer-Leu-PheSer-Leu-Phe（S-L-FS-L-F）2.3.1 2.3.1 肽肽( (peptide)peptide)和肽键和肽键( (peptide

33、 bend)peptide bend)2.3 肽肽62肽键和肽的结构如图所示丝氨酰 甘氨酰 酪氨酰 丙氨酰 亮氨酸631）肽键的结构特点：）肽键的结构特点：肽键中的肽键中的C-N键具有部分双键性质，不能自由旋转。键具有部分双键性质，不能自由旋转。所以连接在肽键两端的基团处于一个平面上，这个平所以连接在肽键两端的基团处于一个平面上，这个平面称为面称为肽平面肽平面。在大多数情况下，相邻肽平面以反式。在大多数情况下，相邻肽平面以反式结构存在。结构存在。641 1）肽键具高度稳定性；）肽键具高度稳定性；2 2）具双键性质，不能自由转动；）具双键性质，不能自由转动；3 3）肽单元呈平面化和刚性性质；）肽

34、单元呈平面化和刚性性质；4 4）C=OC=O与与NHNH反式排列。反式排列。 65酰胺平面与酰胺平面与-碳原子的二面角（碳原子的二面角（ 和和 ） 二面角二面角两相邻酰胺平面之间，能以共同两相邻酰胺平面之间，能以共同的的CC为定点而旋转，绕为定点而旋转，绕C-NC-N键键旋转的角度称旋转的角度称角，绕角，绕C-CC-C键旋键旋转的角度称转的角度称角。角。和和称作二称作二面角，亦称构象角。面角，亦称构象角。662）相关名词）相关名词肽平面：参与肽键的肽平面：参与肽键的6个原子被约束于一个平面上，与此相应个原子被约束于一个平面上，与此相应的的-C-CO-NH-C-则称为肽平面。则称为肽平面。多肽主

35、链：在多肽链中由肽键连接的各氨基酸残基形成的长多肽主链：在多肽链中由肽键连接的各氨基酸残基形成的长链骨架链骨架(C-CO-NH-C.)为多肽链的主链。为多肽链的主链。或：肽链的骨干是由肽单元重复排列而成长链，或：肽链的骨干是由肽单元重复排列而成长链，称为主链。称为主链。 多肽侧链：在多肽链中的各氨基酸残基所连接的侧链基团多肽侧链：在多肽链中的各氨基酸残基所连接的侧链基团为多肽侧链。或：氨基酸残基的为多肽侧链。或：氨基酸残基的R-基连在主链上基连在主链上成为侧链。成为侧链。 说明：说明：各种不同的肽链主链都是一样的，但侧链（各种不同的肽链主链都是一样的，但侧链（R-基）基）的顺序即氨基酸的顺序各

36、不相同的顺序即氨基酸的顺序各不相同 。67 2.3.2 2.3.2 肽的理化性质肽的理化性质类似于氨基酸性质类似于氨基酸性质）旋光性）旋光性）两性解离及等电点）两性解离及等电点）化学反应）化学反应 双缩脲反应：含有两个或两个以上肽键的化合物双缩脲反应：含有两个或两个以上肽键的化合物与碱与碱性硫酸铜作用，生成蓝紫色的复合物，肽键越多颜性硫酸铜作用，生成蓝紫色的复合物，肽键越多颜色越深，受蛋白质特异性影响小，可用于肽和蛋白色越深，受蛋白质特异性影响小，可用于肽和蛋白质定量测定及测定蛋白质水解程度。质定量测定及测定蛋白质水解程度。682.3.3 天然存在的活性肽天然存在的活性肽在生物体中，多肽最重要

37、的存在形式是作为蛋白在生物体中，多肽最重要的存在形式是作为蛋白质的亚单位。质的亚单位。有许多分子量比较小的多肽以游离状态存在，这有许多分子量比较小的多肽以游离状态存在，这类多肽通常都具有特殊的生理功能，常称为类多肽通常都具有特殊的生理功能，常称为活性肽活性肽。如：如：脑啡肽；激素类多肽；抗生素类多肽；谷胱甘脑啡肽；激素类多肽；抗生素类多肽；谷胱甘肽；蛇毒多肽肽；蛇毒多肽等。等。69 谷胱甘肽谷胱甘肽(glutathione, GSH)-70GSH过氧过氧化物酶化物酶H2O2 2GSH 2H2O GSSG GSH还原酶还原酶NADPH+H+ NADP+ 谷胱甘肽在体内参与氧化还原过程，作为某些氧

38、化还谷胱甘肽在体内参与氧化还原过程，作为某些氧化还原酶的辅因子，作用是保护巯基酶，或防止过氧化物原酶的辅因子，作用是保护巯基酶，或防止过氧化物积累。积累。71抗生素类多肽抗生素类多肽短杆菌肽短杆菌肽S 72 体内许多激素属寡肽或多肽体内许多激素属寡肽或多肽激素类多肽激素类多肽73CysTyrILeGlnAsnCysProLeuGly NH2SS牛催产素CysTyrGlnAsnCysProSSPheArgGly NH2牛加压素均为均为9肽，第肽，第3位和第位和第8位氨基酸不同。位氨基酸不同。催产催产素素使子宫和乳腺平滑使子宫和乳腺平滑肌收缩，具有催产和肌收缩，具有催产和促使乳腺排乳作用。促使乳腺

39、排乳作用。加压素加压素促进血管平滑促进血管平滑肌收缩，升高血压，肌收缩，升高血压，减少排尿。减少排尿。肽类的营养价值高于游离氨基酸和完整蛋白质，其原因有以下几个方面： 一般来说，小分子肽的抗原性要比大的多肽或原型蛋白质的抗原性低； 与转运游离氨基酸相比，机体转运小分子肽通过小肠壁的速度更快； 肽类的渗透压比游离氨基酸低，因此可提高小分子肽的吸收效率，减少渗透问题； 1. 小分子肽还具有良好的感官/味觉效应。 74752.4 蛋白质的结构蛋白质的结构构型构型（configuration）：一个有机分子中各个原子特一个有机分子中各个原子特有的固定的空间排列。这种排列不经过共价键的断裂有的固定的空间

40、排列。这种排列不经过共价键的断裂和重新形成是不会改变的。构型的改变往往使分子的和重新形成是不会改变的。构型的改变往往使分子的光学活性发生变化。光学活性发生变化。指在立体异构体中原子或取代基团在空间的取向。指在立体异构体中原子或取代基团在空间的取向。构象（构象（conformation）：指这些原子或取代基团在单指这些原子或取代基团在单键旋转时可能形成的不同的立体异构体。键旋转时可能形成的不同的立体异构体。蛋白质的构象：蛋白质的构象：指蛋白质特有的空间结构。指蛋白质特有的空间结构。蛋白质的空间结构：蛋白质的空间结构：是指蛋白质分子中所有原子在三是指蛋白质分子中所有原子在三维空间的排列分布和肽链的

41、走向。维空间的排列分布和肽链的走向。76蛋白质结构的组织层次蛋白质结构的组织层次蛋白质的结构层次蛋白质的结构层次一级结构一级结构空间结构空间结构二级结构二级结构三级结构三级结构四级结构四级结构超二级结构超二级结构结构域结构域77 定义定义 1969年，国际纯化学与应用化学委员会（IUPAC） 规定： 蛋白质的一级结构指蛋白质多肽蛋白质的一级结构指蛋白质多肽链链中氨基酸的排列顺中氨基酸的排列顺序，包括二硫键的位置。序，包括二硫键的位置。 在基因编码的蛋白质中，这种序列是由mRNA中的核苷酸序列决定的。一级结构中包含的共价键（covalent bonds）主要指肽键（peptide bond）和二

42、硫键（disulfide bond）。一级结构的意义意义2.4.1 2.4.1 蛋白质的一级结构（化学结构）蛋白质的一级结构（化学结构）78N-端端N-端端C-端端C-端端 牛胰岛素的一级结构牛胰岛素的一级结构7980蛋白质分子的多肽链按一定方式折叠、盘绕或组装成特蛋白质分子的多肽链按一定方式折叠、盘绕或组装成特有的空间结构，亦称有的空间结构，亦称高级结构高级结构。蛋白质的高级结构即。蛋白质的高级结构即蛋白质的构象。蛋白质的构象。目前已知，一个蛋白质的多肽链在生物体内只有一种或目前已知，一个蛋白质的多肽链在生物体内只有一种或很少几种构象，且相当稳定，这种构象称为天然构象很少几种构象，且相当稳定

43、，这种构象称为天然构象，此时蛋白质具有生物活性。，此时蛋白质具有生物活性。2.4.2 2.4.2 蛋白质的空间结构蛋白质的空间结构81肽链的主链可看成是由被肽链的主链可看成是由被C 隔开的许多平面组成的。隔开的许多平面组成的。N端C端事实上，一个天然蛋白质多态链在一定条件下只有一种或很少事实上，一个天然蛋白质多态链在一定条件下只有一种或很少几种构象，而且相当稳定。几种构象，而且相当稳定。82化学键化学键共价键共价键次级键次级键肽键肽键二硫键二硫键氢键氢键疏水键疏水键盐键盐键范德华力范德华力一级结构一级结构二、三、四级结构二、三、四级结构三、四级结构三、四级结构蛋白质分子中的共价键与次级键蛋白质

44、分子中的共价键与次级键8384 （1 1）蛋白质的二级结构）蛋白质的二级结构蛋白质的二级结构（蛋白质的二级结构（secondary structuresecondary structure）指肽链指肽链主链不同区段通过自身的相互作用，形成氢键，沿某主链不同区段通过自身的相互作用，形成氢键，沿某一主轴盘旋折叠而形成的局部空间结构一主轴盘旋折叠而形成的局部空间结构。 是蛋白质结构的构象单元，它只涉及肽链主链的构象是蛋白质结构的构象单元，它只涉及肽链主链的构象及链内或链间形成的氢键。及链内或链间形成的氢键。 85绝大多数天然蛋白质绝大多数天然蛋白质都是都是右手螺旋。右手螺旋。每隔每隔3.6个氨基酸残

45、基个氨基酸残基螺旋上升一圈；每圈间螺旋上升一圈；每圈间距距0.54nm，即每个氨基，即每个氨基酸残基沿螺旋中心轴上酸残基沿螺旋中心轴上升升0.15nm，旋转，旋转100。-螺旋结构的主要特点：螺旋结构的主要特点：1)-1)-螺旋螺旋(-helix)(-helix)86每个氨基酸残基的每个氨基酸残基的N-N-H H都与前面第四个残基都与前面第四个残基C=OC=O形成形成氢键氢键。 87螺旋体中所有氨基酸残螺旋体中所有氨基酸残基侧链都伸向外侧；链中基侧链都伸向外侧；链中的全部的全部C=OC=O和和N-HN-H几乎都平几乎都平行于螺旋轴行于螺旋轴, ,氢键几乎平行氢键几乎平行于中心轴。于中心轴。88

46、* * R为为Gly时，由于时，由于Ca上有上有2个氢，使个氢，使Ca-C、Ca-N的转动的转动的自由度很大，即刚性很小，所以使螺旋的稳定性大的自由度很大，即刚性很小，所以使螺旋的稳定性大大降低。大降低。R基大基大(如如Ile)也不易形成也不易形成-螺旋。螺旋。* * -螺旋遇到螺旋遇到Pro就会被中断而拐弯，因为脯氨酸是亚就会被中断而拐弯，因为脯氨酸是亚氨基酸且有刚性的环状结构。氨基酸且有刚性的环状结构。 * * 带带相同电荷的氨基酸残基相同电荷的氨基酸残基连续出现在肽链上时，螺旋连续出现在肽链上时，螺旋的稳定性降低。的稳定性降低。侧链在侧链在 -螺旋结构的影响：螺旋结构的影响：* * R

47、R基较小基较小, ,且不带电荷的氨基酸利于且不带电荷的氨基酸利于-螺旋的形成螺旋的形成, ,如如多聚丙氨酸在多聚丙氨酸在pH7pH7的水溶液中自发卷曲成的水溶液中自发卷曲成-螺旋。螺旋。892)-2)-折叠折叠(-pleated sheet) -折叠是由两条或多条伸展的多肽链靠氢键联结折叠是由两条或多条伸展的多肽链靠氢键联结而成的锯齿状片状结构。而成的锯齿状片状结构。在在 - -折叠中，折叠中， - -碳原子总是处于折叠的角上，氨基碳原子总是处于折叠的角上，氨基酸的酸的R R基团处于折叠的棱角上并与棱角垂直，两个氨基基团处于折叠的棱角上并与棱角垂直，两个氨基酸之间的轴心距为酸之间的轴心距为0.

48、350.35nm nm 。0.7nm90 - -折叠结构的氢键主要是由两条肽链之间形成的；折叠结构的氢键主要是由两条肽链之间形成的；也可以在同一肽链的不同部分之间形成。几乎所有肽键也可以在同一肽链的不同部分之间形成。几乎所有肽键都参与链内氢键的交联，氢键与链的长轴接近垂直。都参与链内氢键的交联，氢键与链的长轴接近垂直。 - -折叠有两种类型。一种为平行式，即所有肽链的折叠有两种类型。一种为平行式，即所有肽链的N-N-端都在同一边。另一种为反平行式，即相邻两条肽端都在同一边。另一种为反平行式，即相邻两条肽链的方向相反。后者更为稳定。链的方向相反。后者更为稳定。91923) -转角（转角（-tur

49、n） 也称也称-回折，存在于球状蛋白中。其特点是肽回折，存在于球状蛋白中。其特点是肽链回折链回折180180，使得氨基酸残基的，使得氨基酸残基的C=OC=O与第四个残基的与第四个残基的N-HN-H形成氢键。第二个氨基酸通常是形成氢键。第二个氨基酸通常是propro。 -转角都在蛋白质分子的表面，多数为亲水氨基转角都在蛋白质分子的表面，多数为亲水氨基酸组成。酸组成。93944)无规则卷曲（无规则卷曲（non-regular coil） 又称自由卷曲，是指没有一定规律的松散肽链又称自由卷曲，是指没有一定规律的松散肽链结构，但是其结构是明确而稳定的，常常构成酶的结构，但是其结构是明确而稳定的，常常构

50、成酶的功能部位。功能部位。 无规卷曲常出现在无规卷曲常出现在a-a-螺旋与螺旋与a-a-螺旋、螺旋、a-a-螺螺旋与旋与- -折叠、折叠、 - -折叠与折叠与- -折叠之间。它是折叠之间。它是形成蛋白质三级结构所必需的。形成蛋白质三级结构所必需的。95无规则卷曲无规则卷曲96 1 1. .下列哪一项不是蛋白质下列哪一项不是蛋白质-螺旋结构的特点？螺旋结构的特点？ A A天然蛋白质多为右手螺旋天然蛋白质多为右手螺旋 B B肽链平面充分伸展肽链平面充分伸展 C C每隔每隔3.63.6个氨基酸螺旋上升一圈。个氨基酸螺旋上升一圈。 D D每个氨基酸残基上升高度为每个氨基酸残基上升高度为0.150.15

51、nm.nm. 2.2.关于关于-折叠片的叙述，下列哪项是错误的？折叠片的叙述，下列哪项是错误的？ A A-折叠片的肽链处于曲折的伸展状态折叠片的肽链处于曲折的伸展状态 B B - -折叠片的结构是借助于链内氢键稳定的折叠片的结构是借助于链内氢键稳定的 C C有的有的-折叠片结构都是通过几段肽链平行排列而形折叠片结构都是通过几段肽链平行排列而形成的成的 D D氨基酸之间的轴距为氨基酸之间的轴距为0.350.35nmnm97（3）超二级结构和结构域）超二级结构和结构域1 1）超二级结构超二级结构概念：指蛋白质中相邻的二级结构单位（-螺旋或-折叠或-转角）组合在一起，形成有规则的、在空间上能够辨认的

52、二级结构组合体。超二级结构的基本类型： 、 、98超二级结构类型超二级结构类型 99 2）结构域）结构域(domains)概念：多肽链在超二级结构基础上进一步绕概念：多肽链在超二级结构基础上进一步绕曲折叠而成的紧密的相对独立的三维实体曲折叠而成的紧密的相对独立的三维实体称结构域。具有部分生物学功能。称结构域。具有部分生物学功能。Wetlaufer于于1973年根据对蛋白质结构及折叠机制的年根据对蛋白质结构及折叠机制的研究结果提出了结构域的概念。研究结果提出了结构域的概念。 100101结构域结构域1结构域结构域2 -折叠折叠 -转角转角二硫键二硫键 -螺旋螺旋卵溶菌酶的三级结构中的两个结构域卵

53、溶菌酶的三级结构中的两个结构域102 结构域有时也称功能域，功能域是指有功能的部分。功能域可以是一个结构域，也可以是两个或两个以上的结构域组成。 从动力学的角度耒看从动力学的角度耒看，一条长的多肽链先折叠成几个相对独立的区域，再缔合成三级结构要比直接折叠成三级结构更合理。 从功能的角度耒看从功能的角度耒看，酶蛋白的活性中心往往位于结构域之间，因为连接各个结构域的常常是一条松散的肽链，使结构域在空间上摆动比较自由，容易形成适合底物结合的空间。103（4）蛋白质三级结构）蛋白质三级结构概念：指蛋白质多肽链上所有原子在三维空间的分布。概念：指蛋白质多肽链上所有原子在三维空间的分布。较小蛋白质分子：较

54、小蛋白质分子：多为单结构域，即三级结构；多为单结构域，即三级结构；较大蛋白质分子：较大蛋白质分子：由由2或或2个以上结构域结合成三级结构。个以上结构域结合成三级结构。在三级结构中，在三级结构中，具有极性侧链基团的具有极性侧链基团的AAAA残基几残基几乎全部在分子的表面乎全部在分子的表面, ,而非极性残基则被埋于而非极性残基则被埋于分子内部分子内部, ,不与水接触不与水接触. .而形成疏水的核心。而形成疏水的核心。104三级结构的特征：三级结构的特征： 含多种二级结构元件；含多种二级结构元件； 有明显的折叠层次；是紧密的球状或椭球状实体；有明显的折叠层次；是紧密的球状或椭球状实体； 分子表面有一

55、空穴分子表面有一空穴( (活性部位活性部位),),可结合配体；可结合配体； 亲水侧链暴露在分子表面，疏水侧链埋藏在分子内部。亲水侧链暴露在分子表面，疏水侧链埋藏在分子内部。实例实例：肌红蛋白肌红蛋白105肌红蛋白三级结构肌红蛋白三级结构106 肌红蛋白肌红蛋白是是19571957年由年由John Kendrew John Kendrew 用用X X射线晶射线晶体分析法测定的有三维结构的第一个蛋白质。体分析法测定的有三维结构的第一个蛋白质。 功能：功能：哺乳动物肌肉中储存氧并运输氧。 典型的球形蛋白质，高度折叠成紧密结构，疏水氨基典型的球形蛋白质，高度折叠成紧密结构，疏水氨基酸残基大部分埋藏在分

56、子内部，极性残基在表面。肌红酸残基大部分埋藏在分子内部，极性残基在表面。肌红蛋白中有蛋白中有8 8条条-螺旋。由多肽的折叠形成的疏水空隙内螺旋。由多肽的折叠形成的疏水空隙内是是血红素辅基血红素辅基，通过肽链上的，通过肽链上的HisHis残基与肌红蛋白分子残基与肌红蛋白分子内部相连，它对肌红蛋白的生物活性是必需的（与内部相连，它对肌红蛋白的生物活性是必需的（与O O2 2结结合）。合）。107（5）蛋白质的四级结构）蛋白质的四级结构 四级结构四级结构是指由两个或两个以上具有三级结构的多肽是指由两个或两个以上具有三级结构的多肽链通过非共价键聚合而成的特定构象的蛋白质分子。链通过非共价键聚合而成的特

57、定构象的蛋白质分子。其中每条其中每条具有三级结构的具有三级结构的多肽链称为多肽链称为亚基。亚基。 通常通常亚基亚基只有一条多肽链，但有的只有一条多肽链，但有的亚基由两条或多条亚基由两条或多条多肽链组成多肽链组成，这些多肽链间多以，这些多肽链间多以二硫键二硫键相连，亚基相连，亚基单独存在时无生物学活性。单独存在时无生物学活性。 亚基是指一条多肽链或以共价链连接在一起的几条亚基是指一条多肽链或以共价链连接在一起的几条多肽链组成的蛋白质分子的最小共价结构单位。多肽链组成的蛋白质分子的最小共价结构单位。 一般来说具有四级结构的蛋白属于寡聚蛋白。一般来说具有四级结构的蛋白属于寡聚蛋白。1) 定义定义10

58、8有多个亚基；有多个亚基；稳定性主要靠亚基间的稳定性主要靠亚基间的非共价键非共价键维持；维持；亚基单独存在时无生物活性或活性很小，亚基单独存在时无生物活性或活性很小， 只有通过亚基相互聚合成四级结构后，蛋只有通过亚基相互聚合成四级结构后，蛋 白质才具有完整的生物活性；白质才具有完整的生物活性； 亚基间具有亚基间具有协同性协同性和和别构效应别构效应。 2 2）蛋白质四级结构的特点）蛋白质四级结构的特点1093）血红蛋白的结构与功能血红蛋白的结构与功能血红蛋白的结构特点：血红蛋白的结构特点：a.a.是四个亚基的寡聚蛋白，是四个亚基的寡聚蛋白，574574个个AAAA残基，分子量为残基，分子量为65

59、00065000。b.b.是由相同的两条是由相同的两条 链和两条链和两条 链组成四聚体链组成四聚体 2 2 2 2c.c. 链由链由141AA141AA残基组成，残基组成， 链由链由146AA146AA残基组成。残基组成。 四条肽链的三级结构与肌红蛋白相似，各自内部有四条肽链的三级结构与肌红蛋白相似，各自内部有一个血红素辅基。一个血红素辅基。血红蛋白的功能：血红蛋白的功能： 存在于动物血液的红细胞中，具有运输存在于动物血液的红细胞中，具有运输O O2 2和和COCO2 2的功的功能；血红蛋白还能和能；血红蛋白还能和H H+ +结合，从而可以维持体内结合，从而可以维持体内pHpH。110111

60、一氧化碳（一氧化碳（COCO）也能与血红素）也能与血红素FeFe原子结原子结合。由于合。由于COCO与血红素的结合能力是与血红素的结合能力是O O2 2的的200200倍，因此，人体吸入少量的倍，因此，人体吸入少量的COCO即可完全抑即可完全抑制肌红蛋白或血红蛋白与制肌红蛋白或血红蛋白与O O2 2的结合，从而的结合，从而造成缺氧死亡。造成缺氧死亡。 急救方法是尽快将病人转移到富含急救方法是尽快将病人转移到富含O O2 2的的环境中（如新鲜空气、纯氧气或高压氧环境中（如新鲜空气、纯氧气或高压氧气），使与血红素结合的气），使与血红素结合的COCO被被O O2 2置换出来。置换出来。 112 2.