糖类、蛋白质、脂肪的鉴定

1、 还原糖还原糖 + 斐林试剂斐林试剂 砖红色沉淀砖红色沉淀加热加热先混合再加入糖中先混合再加入糖中（ NaOH +CuSO4）蛋白质蛋白质 + 双缩脲试剂双缩脲试剂 紫色紫色先加先加NaOH 液于样液中，摇匀液于样液中，摇匀再加再加CuSO4 液于样液中液于样液中检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 1.实验原理 斐林试剂斐林试剂苏丹苏丹橘黄色橘黄色红色红色砖红色沉淀砖红色沉淀紫色紫色苏丹苏丹 双缩脲试剂双缩脲试剂鉴定物质鉴定物质试剂试剂实验现象实验现象还原性糖还原性糖脂肪脂肪蛋白质蛋白质淀粉淀粉 碘碘 蓝色蓝色 必修必修1 1第第18181919页页生物组织中

2、可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定l实验原理实验原理比较项比较项目目试剂及成试剂及成分分原理原理溶液浓度溶液浓度方法方法加热加热与否与否结结果果可溶还可溶还原糖的原糖的鉴定鉴定斐林试剂斐林试剂NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4砖砖红红色色沉沉淀淀蛋白质蛋白质的鉴定的鉴定双缩脲试双缩脲试剂剂NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4溶溶液液呈呈紫紫色色4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同？、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同？新配制的新配制的Cu(OH)2溶液与加溶液与加入的葡萄入的葡萄糖，在加糖，在加热条件下热条件下生成砖红生成砖红色的色的Cu2O

3、在碱性环境下的Cu2+,与类似于双缩脲结构缩脲结构的肽键发的肽键发生反应生生反应生成紫色终成紫色终合物合物NaOH浓度为浓度为0.1g/mLCuS04浓度为浓度为0.05g/mLNaOH浓度为浓度为0.1g/mLCuS04浓度为浓度为0.01g/mL先把先把NaOH溶液和溶液和CuSO4溶液溶液混合混合，而后而后立即使立即使用用。先先加入加入Na0H1mL，然，然后后再加再加CuS044滴，摇匀。滴，摇匀。(不能过量不能过量)水浴水浴加热加热不不需需要要5、实验的材料的选择和处理有什么要求？、实验的材料的选择和处理有什么要求？材料的选择材料的选择材料的处理材料的处理还原性糖的鉴定还原性糖的鉴定

4、脂肪的鉴定脂肪的鉴定含糖高，颜色为含糖高，颜色为白色的植物组织，白色的植物组织，如苹果和梨如苹果和梨富含脂肪的种子富含脂肪的种子，如花生，如花生浸泡浸泡34小时小时/蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定富含蛋白质的富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清黄豆或鸡蛋清黄豆需浸泡黄豆需浸泡1-2天，天，鸡蛋清要先稀释鸡蛋清要先稀释淀粉的鉴定淀粉的鉴定马铃薯马铃薯/选材：含糖量较高的选材：含糖量较高的白色或近于白色的植物组织白色或近于白色的植物组织(排除色素对排除色素对显色的干扰显色的干扰)，苹果、梨最好，苹果、梨最好 。 l实验流程实验流程(步骤步骤)1.可溶性还原糖可溶性还原糖 制备组织样液：制备组织样液：制浆：去皮、切块

5、、研磨，制浆：去皮、切块、研磨，过滤：（用单层纱布）过滤：（用单层纱布）取液：取液：（mL）显色反应显色反应 现象：现象： (用前混匀用前混匀)5065.C水浴水浴加热加热2min还原糖的检测和观察：还原糖的检测和观察：还原糖的检测结果还原糖的检测结果2.脂肪的鉴定脂肪的鉴定 取材：花生种子（浸泡取材：花生种子（浸泡h），去皮，将子叶削成薄片），去皮，将子叶削成薄片 制片：制片：选取最薄的薄片移至载玻片中央选取最薄的薄片移至载玻片中央在薄片上滴加在薄片上滴加苏丹苏丹(或苏丹或苏丹) 染液染液2 3滴，滴，染色染色min滴加体积分数为滴加体积分数为50%的酒精的酒精溶液溶液12滴，洗滴，洗去浮色

6、去浮色(多余的苏丹多余的苏丹 )吸去余液，滴吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片临时装片显微观察：显微观察： 先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察现象：现象：有被染成有被染成橘黄色橘黄色(或红色或红色)的脂肪微粒的脂肪微粒脂肪微粒脂肪微粒脂肪的检测结果脂肪的检测结果3.蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定 选材与制备选材与制备组织样液：组织样液：黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液）黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液）黄豆浸泡黄豆浸泡 去皮去皮切片切片研磨研磨过滤过滤滤液滤液 显色反应显色反应现象：现象：无色无色紫色或紫红

7、色紫色或紫红色(创设碱性条件创设碱性条件)(提供提供Cu2+)蛋白质的检测结果蛋白质的检测结果蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定-双缩脲试剂双缩脲试剂鸡蛋清溶液鸡蛋清溶液 NaOH 溶液溶液滴加滴加CuSO2 溶液溶液, 每次滴加均需摇匀每次滴加均需摇匀结果显示结果显示: 紫色紫色1.你的预测与实验结果是否一致？2.小组间交流实验结果。你有什么发现？3.全班共检测了多少种生物材料？这些生物 材料中有机化合物的种类、含量一样吗？ 这对我们选择食物有什么启发？讨论讨论4.淀粉的鉴定淀粉的鉴定取材：马铃薯匀浆取材：马铃薯匀浆检测：检测：碘液碘液2滴滴现象：现象： 摇匀后变成蓝色摇匀后变成蓝色问题探讨问题探讨:

8、1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出一部分样液？一部分样液？作对照作对照2、使用双缩脲试剂时为什么、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加液只能加34滴而不能滴而不能过量？过量？ 过量的双缩脲试剂过量的双缩脲试剂B B会与试剂会与试剂A A反应，使溶液呈蓝色，反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。而掩盖生成的紫色。3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？ 时间太长，时间太长，Cu(OH)Cu(OH)2 2悬浊液就沉淀在试管底部而悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。无法参与反应。l深化深化1、（山东

9、）从细胞腊上提取了某种成分，用非酶法处理、（山东）从细胞腊上提取了某种成分，用非酶法处理后，加入双缩脲剂出现紫色；若加入斐林试剂或班氏试剂后，加入双缩脲剂出现紫色；若加入斐林试剂或班氏试剂并加热，出现砖红色。该成分是：并加热，出现砖红色。该成分是：A 糖脂糖脂 B 磷脂磷脂 C 糖蛋白糖蛋白 D 脂蛋白脂蛋白 C练习练习解析：用双缩脲试剂处理该物质会产生紫色反应，说明其含蛋白质；加入斐林或班氏试剂在加热条件下会产生砖红沉淀，说明该成分含糖。即该成分含蛋白质又含糖，由此判断该成分为糖蛋白。2、(2011.广东广东)生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定

10、实验中，以下操作错误的是机物的鉴定实验中，以下操作错误的是( )A、可溶性还原糖的鉴定，可用酒精灯直接加热产生砖红、可溶性还原糖的鉴定，可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀色沉淀B、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜C、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用A 3、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国，引起世人注目。、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国，引起世人注目。鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，肯定不需要用到的鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，肯定不需要用到的化学试剂是化学试剂是(

11、 ) A.斐林试剂斐林试剂 B. 红墨水红墨水C.双缩脲试剂双缩脲试剂 D.苏丹苏丹染液染液 B 各种可供实验的材料各种可供实验的材料梨梨 黄桃黄桃 胡萝卜胡萝卜 黄豆黄豆 花生种子花生种子 小麦种子小麦种子 其中适合于鉴定其中适合于鉴定可溶性还原糖可溶性还原糖的是的是 ，理由是，理由是梨的组织细胞梨的组织细胞 ，你打算用什么试剂鉴定你打算用什么试剂鉴定? 。 小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪，这是小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪，这是因为因为 ，你打，你打算用什么试剂鉴定算用什么试剂鉴定? . 例例 做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时，需要根据实验需要选择不同的白质的鉴定实验时，需要根据实验需要选择不同的实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题：实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题：梨梨 颜色为白色，并且糖含量较高颜色为白色，并且糖含量较高 斐林试剂斐林试剂脂肪含量不如花生高，也不容易做切片脂肪含量不如花生高，也不容易做切片 用苏丹用苏丹或苏丹或苏丹试剂试剂小麦种子中糖类化合物小麦