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文档简介

1、动物疫病病原学复习资料一、概念题随机测序法:即不考虑方向性,随机对靶DNA进行测序,最后采用计算机拼装而得到完整的序列信息。转座子:在原核生物与真核生物基因组中存在着可从一个染色体位点转移到另一位点的一些DNA序列。(文献上有时形象地称其为是跳跃基因,jumpinggene)。定向测序法:是指特定地从目的片段的某一端开始测序,直至把靶片段测完。定向测序法包括引物测序法和定向缺失测序法。酵母人工染色体(Yeastartificialchromosomes简称YAQ,是一种能够克隆长达400Kb的DNA片段的载体,含有酵母细胞中必需的端粒、着丝点和复制起始序列。微生物基因组的注释:在微生物基因测序

2、的基础上,对其基本结构和部件进行认定,以进一步研究其功能。毒力岛:是指编码细菌毒力基因簇的分子量较大的染色体或质粒DNA片段。此概念是1990年由Hacker等在研究泌尿系统致病性E.coli编码毒力的两个相关基因而提出的。毒力岛又叫致病岛或毒力块、毒力盒(virulenceblocksorvirulencecassettes)等CpG结构:CpG结构是细菌DNA中胞喀咤鸟嗯吟二核甘酸结构。是DNA刺激机体产生较强免疫应答的结构,是抗核酸免疫的主要抗原。表位疫苗:通过确定抗原蛋白上的B细胞、TH细胞以及CTL细胞识别的表位,经人工合成,并与大分子载体连接,加入佐剂制成;也可通过基因工程技术表达

3、抗原蛋白表位多肽,或表达与大分子蛋白的融合蛋白制成。可做成多表位疫苗。基因工程重组活载体疫苗:基因工程重组活载体疫苗是用基因工程技未将保护性抗原基因(目的基因)转移到载体中使之表达的活疫苗。核酸疫苗:包才DNA疫苗和RNA疫苗,由编码能引起保护症壳症皮应的病原体抗原的基因片段和载体构建而成。其被导入机体的方式主要是直接肌肉注射,或用基因枪将带有基因的金粒子注入。抗独特型疫苗(anti-idiotypevaccines)是免疫调节网络学说发展到新阶段的产物。抗独特型抗体可以模拟抗原,刺激机体产生与抗原特异性抗体具有同等免疫效应的抗体,由此制成的疫苗称为抗独特型疫苗,又称内影像疫苗。隐蔽期(ecl

4、ipseperiod):病毒侵入易感细胞后在一个断短的的时间内,病毒完全消失,甚至在细胞内也找不到。该感染的病毒颗粒,直到新的病毒子出现为止。这一段时间称为病毒复制的隐蔽期。感染比(multiplicityofinfectionradio)指在一个系统中,感染病毒的细胞数与细胞总数之比。病毒受体:宿主基因组编码、控制表达的一组能与病毒相互识别和结合,以启动病毒感染的细胞膜表面的分子,其大多数蛋白质,亦可能为糖蛋白或磷脂。MicroRNA(miRNA是一类由内源基因编码的长度约为22个核甘酸的非编码单链RNA分子,它们在动植物中参与转录后基因表达调控。核酶:某些RNA分子也具有生物催化功能,被称

5、为Ribozyme。RNA干扰(RNAinterferenceRNAi):RNAi是与靶基因序列同源的双链RNA(dsRNA)所诱导的一种特异性基因沉默现象。它是真核生物中存在的一种抗病毒入侵、抑制转座子活动、调控基因表达的监控机制。免疫转印(immunoblotting)技术又称蛋白质印迹或Westernblotting,是一种将蛋白质凝胶电泳、膜转移电泳与抗原抗体反应相结合的新型免疫分析技术。类病毒(viroids)感染性RNA分子,独自具有功能,外面不包被任何蛋白外壳。拟病毒(virusoids)与此结构相同。但包被在植物病毒内。拟病毒本身不能复制,必须依赖病毒的帮助,这种拟病毒有时称为

6、卫星RNAs(satelliteRNAs)。盲传(blindpassage将取自经接种而末出现感染症状的宿主或细胞培养的材料,再接种于新的宿主或细胞培养,以提高病毒的毒力或效价。致细胞病变作用(Cytopathiceffect,CPB:病毒感染细胞培养引起的细胞显微表现的改变,如细胞聚集成团,肿大、圆缩、脱落、细胞融合形成多核细胞、细胞内出现包涵体(inclusionbody),乃至细胞裂解等。包涵体:病毒复制复合物、转录复合物、复制和装配中间体、核壳和毒粒经常累积在宿主细胞韵特定区;形成病毒工厂或包涵体结构,这些结构在细胞质和/或细胞核的定位反映了一种特定病毒的复制位点。质粒(plasmid

7、)是一种独立于染色体外,能进行自主复制的遗传单位。滚卡复制:线性单链DNA,如腺相关病毒,鼠微小病毒等以ssDNA为模板,通过形成末端发夹的回文结构进行自我引发,称作滚卡复制。滚环复制:亲代双链DNA的一条链在DNA复制起点处被切开,其5端游离出来。这样,DNA聚合酶出便可以将脱氧核糖核甘酸聚合在3-OH端。当复制向前进行时,亲代DNA上被切断的5端继续游离下来,并且很快被单链结合蛋白所结合。因为5端从环上向下解链的同时伴有环状双链DNA环绕其轴不断的旋转,而且以3-OH端为引物的DNA生长链则不断地以另一条环状DNA链为模板向前延伸,因而称为滚环复制。转录水平的基因沉默(Transcript

8、ionalGeneSilencing,TGS)是指转基因在细胞核内RNA合成受到了阻止而导致基因沉默。质粒的不亲和性(plasmidincompatibility:有时也称为不相容性,是指在没有选择压力的情况下,两种亲缘关系密切的不同质粒,不能够在同一个寄主细胞系中稳定地共存的现象。在细胞的增殖过程中,其中必有一种会被逐渐地排斥(稀释)掉。这样的两种质粒称为不亲和质粒三、简答题(每题10分)1、简述病毒受体的性质。病毒受体分子并非为病毒感染特异性单独表达的,它们可能是细胞的特定受体,亦可能是特殊受体之外的膜蛋白分子。(1)病毒受体数量的有限性。(2)病毒受体细胞表面分布的不均匀性;(3)病毒受

9、体的特异性。A、细胞的种系特异性;决定了病毒的宿主范围。B、组织特异性;决定了病毒的组织嗜性G病毒特异性;不同种类的病毒,具有不同的病毒受体。同种不同型的病毒,甚至同型病毒不同毒株亦可能有不同的病毒受体。2、什么是基因缺失疫苗并简要叙述其优点:是用基因工程技术将强毒株毒力相关基因切除构建的活疫苗,该类疫苗安全性好、不易返祖;其免疫接种与强毒感染相似,机体可对病毒的多种抗原产生免疫应答;免疫力坚实,免疫期长,尤其是适于局部接种,诱导产生黏膜免疫力,因而是较理想的疫苗。3、噬菌体的噬菌斑测定操作步骤。一定量的经系列稀释的噬菌体悬液分别与高浓度的敏感细菌,以及半固体营养琼脂均匀混合后,涂布在已铺有较

10、高浓度营养琼脂的平板上,经过孵育培养,在延伸成片的细菌菌苔上出现分散的单个噬菌斑。4、滚环复制的特点:(1)共价延伸;(2)模板链和新合成的链分开;(3)不需RNA引物,在正链3OH上延伸;(4)只有一个复制叉;(5)形成多联体;5、动物病毒进入细胞的方式有那些?1、移位一些无包膜的二十面体病毒进入细胞的方式。在受体介导下发生,机制尚不明确。2.内吞作用3、病毒包膜与细胞质膜融合在生理pH条件下,病毒包膜糖蛋白中的融合肽介导病毒包膜与细胞质膜融合,病毒进入细胞。4、以抗体依赖的增强作用方式进入病毒与病毒特异性抗体结合,所形成的病毒-抗体复合物可通过与细胞表面的免疫球蛋白受体的结合进入细胞。6、

11、简述质粒的特性。1 .自主复制2 .可传递性3 .不相容性质粒的不亲和性:两种亲缘关系密切的不同质粒,不能够在同一个寄主细胞系中稳定地共存的现象。4 .产生宿主的某些生物学特性四、论述题(每题15分)1、作为载体的理想质粒的条件是:1 .能自主复制,有独立的复制起点;2 .具有一种或多种限制酶的单一切割位点,若在此位点中插入外源性基因片段,不影响本身的复制功能;3 .在基因组中有1-2个筛选标记;4 .相对分子量小,拷贝多,易操作;5 .易导入细胞;6 .具有安全性,重组质粒不易扩散至实验室外。2、转基因植物疫苗的优缺点:优势:植物细胞具有全能性。上游生产成本较低,而能直接食用的植物疫苗不需特殊贮存条件,同时还可省去下游的加工开支。植物具有完整的真核细胞表达系统。表达的产物无毒性、安全可靠。用转基因植物生产疫苗较简单、方便、易

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