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文档简介
1、经典遗传开放式实验经典遗传开放式实验果蝇诱变果蝇诱变时间:三月份五月份四人一组自在设计并协作完成厦门大学生命科学学院遗传与分子生物学实验课果蝇诱变实验设计果蝇诱变实验设计l实验目的:采用物理法、化学法、生物法等多种实验手段,使果蝇发生诱发突变,经过其遗传景象找出突变的规律和特点。学会自主设计实验,培育独立思索和团队协作精神,模拟科研训练。实验资料:实验资料:l黑腹果蝇(Drosophila )物理诱变剂的种类物理诱变剂的种类l典型的物理诱变剂是不同种类的射线,常见的有X射线,r射线和中子,此外还有紫外线和射线。lX射线是种波长为1000100埃的电离射线,是最早的诱变射线。lr射线是一种波长更
2、短的电离射线,其波长0.11埃,60CO和CS是目前运用最广的r射线源。l中子是不带电粒子,在加速器或核反响堆中得到能量范围极广的中子。252Cf自发裂变中子源可运用诱发突变。l射线是电子或正电子的射线束,由32P和35S等放射性同位素直接发生的。透过植物组织才干弱,但电离密度大。当同位素溶液进入组织和细胞后作为内照射而产生诱变作用。参考资料参考资料诱变机理诱变机理lX射线和r射线都是能量较高的电磁波,能引起物质的电离。当物体的某些较易受辐射敏感的部位遭到射线的撞击时,而发生离子化,可以引起DNA链断裂,当修复时不能恢复到原状就会出现突变。假设射线击中染色体那么能够导致断裂,在修复时能够呵斥缺
3、失、反复、倒位和易位等染色体畸变。中子不带电,但当与生物体内的原子核撞击后,使原子核变换产生r射线等能量交换,从而影响DNA和染色体的改动。参考资料参考资料诱变方法诱变方法l普通采用r圃,以60CO源为中心种植多种处置资料,并按资料资料与60CO源中心间隔和照射时间来控制照射剂量。这种r圃对于诱变育种的运用不是非常适宜的,但作为植物对辐照的效应以及辐射生物学等实际研讨是非常有意义的。普通设设置较小的60CO室进展处置。除了处置植株或植株的部分,也可以处置种子以及花粉。处置花粉的优点是产生突变不至于构成嵌合体,但花粉的存活时间短暂不易进展处置。目前,这个问题似乎可以处理。根据赵永亮2019年花粉
4、离体培育结果阐明,玉米新颖花粉可在常温下储存在液体石蜡油中2.5小时,而对其花粉活力没有影响。参考资料参考资料化学诱变剂种类化学诱变剂种类l早在1948年,Gustafsson等曾用芥子气处置大麦获得突变体。1967年Nilan用硫酸二乙酯处置大麦种子育成了矮秆、高产种类Luther。以后化学诱变剂的以及和运用就逐渐开展起来。目前较公认的最有效和运用较多的是烷化剂和叠氮化物两类。烷化剂中仍以甲基磺酸乙酯(EMS)、硫酸二乙酯(DES)和乙烯亚胺(EI)等类型的化合物运用较多,叠氮化合物那么以叠氮化钠(NaN3 )研讨和运用较多。参考资料参考资料化学诱变剂诱变机理化学诱变剂诱变机理l烷化剂l 指
5、具有烷化功能的化合物,带有一个或多个活性烷基,该烷基转移到一个电子密度较高的分子上,可置换碱基中的氧原子,碱基被烷化后,DNA在复制时会导致配对错误,产生突变。l叠氮化钠l 一种动植物的呼吸抑制剂,可使复制中的DNA的碱基发生交换,从而导致突变体的发生,是目前诱变率高而平安的一种诱变剂。参考资料参考资料化学诱变剂的处置方法化学诱变剂的处置方法l利用化学诱变剂处置种子较为普遍,其方法是直接把种子浸泡在含有化学试剂的溶液中,可以诱发各类体细胞突变。普通来说,玉米种子的处置效果较差,由于成熟的玉米籽粒胚中具有分开的、已定型的雄花和雌穗原基细胞,并且在突变发生过程中容易产生细胞间的竞争,使突变细胞遭到
6、抑制或消亡,被排斥在生殖过程之外。参考资料参考资料化学诱变剂的处置方法化学诱变剂的处置方法l用含有化学药剂的石蜡油处置玉米花粉是目前知的最有效的方法。以EMS为例,详细的处置方法步骤如下:用EMS与轻质石蜡油混合,制备成浓度为0.1-0.2%EMS处置液;在适当的时间,搜集玉米新颖花粉,在一个带盖的瓶中,把花粉与EMS处置液混合;最后用一把小号毛刷,把被处置花粉涂到选好的雌穗花丝上。参考资料参考资料化学诱变剂的特点有:化学诱变剂的特点有:l诱发突变率较高,而染色体畸变较少,并且诱变范围广。l对处置资料损伤轻,有的化学诱变剂只限于DNA的某些特定部位发生变异。l大部分有效的化学诱变剂较物理诱变剂的生物损伤大,容易引起生活力和可育性下降。参考资料参考资料诱变育种的普通步骤l处置资料的选择l诱变剂量的选择l用60CO-r射线辐照自交系时,剂量为-190Gy,辐
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