医学微生物学：第六章 细菌感染的检查方法和防治原则

1、细菌学诊断细菌学诊断 血清学诊断血清学诊断 细菌学诊断细菌学诊断标本的采集和送检六原则标本的采集和送检六原则1. 避免杂菌污染避免杂菌污染2. 不同期不同标本不同期不同标本3. 用抗生素以前用抗生素以前4. 采集病变明显部位采集病变明显部位6. 运送注意保存运送注意保存5. 标本必须新鲜标本必须新鲜标本采集和保存标本采集和保存n 根据病菌在患者不同病期的体内分布和排出部根据病菌在患者不同病期的体内分布和排出部位，采集不同标本。位，采集不同标本。肺结核患者肺结核患者痰液；痰液；脑膜炎患者脑膜炎患者脑脊液脑脊液/血液；血液；伤寒患者伤寒患者1-2周周血液，血液，2-3周周粪便。粪便。n 标本必须新

2、鲜，采集后尽快送检。标本必须新鲜，采集后尽快送检。送检过程低温或保温送检过程低温或保温致病菌的检验程序致病菌的检验程序 药物敏感试验药物敏感试验 直接涂片检查直接涂片检查 分离培养分离培养 生化试验生化试验 血清学试验血清学试验 动物试验动物试验明明确确诊诊断断初步诊断初步诊断基因诊断技术基因诊断技术(核酸杂交、核酸杂交、PCR、DNA chip)标本标本直接涂片检查直接涂片检查肺结核患者痰液肺结核患者痰液抗酸染色抗酸染色脑膜炎患者脑脊液脑膜炎患者脑脊液革兰染色革兰染色分离培养分离培养选择或鉴别培养基选择或鉴别培养基生长条件生长条件/菌落特征菌落特征/生化鉴定生化鉴定/血清学血清学生化实验生化

3、实验代谢产物代谢产物VITEK-AMS药敏试验药敏试验 MIC 最低抑菌浓度最低抑菌浓度Disk diffusion EtestTube dilution基因诊断技术基因诊断技术(核酸杂交、核酸杂交、PCR、DNA 芯片芯片)人工免疫人工免疫artificial immunization 采用人工方法将疫苗、类采用人工方法将疫苗、类毒素等或含有某种特异性毒素等或含有某种特异性抗体、细胞免疫制剂等接抗体、细胞免疫制剂等接种于人体，以增强宿主体种于人体，以增强宿主体的抗病能力的抗病能力授人予鱼，不如授人予渔主动免疫主动免疫 自然免疫 患病、隐性感染 人工免疫 疫苗、类毒素 被动免疫被动免疫 自然免

4、疫 初乳 人工免疫 抗毒素、丙球生物制品生物制品：人工免疫的免疫原、免疫血清、人工免疫的免疫原、免疫血清、细胞制剂及诊断制剂等生物性制剂细胞制剂及诊断制剂等生物性制剂 将疫苗或类毒素接种于人体，使机体产生获得性免疫力的一种防治微生物感染的措施。作用作用：预防选用免疫原性强的病原体，经人工大量培选用免疫原性强的病原体，经人工大量培养后，用理化方法杀死，但仍保留抗原性养后，用理化方法杀死，但仍保留抗原性而制成的生物制品而制成的生物制品 百日咳、伤寒、霍乱、钩端螺旋体病、斑百日咳、伤寒、霍乱、钩端螺旋体病、斑疹伤寒、疹伤寒、Q热、鼠疫等热、鼠疫等剂量大、不良反应、多次接种、只产生体剂量大、不良反应、

5、多次接种、只产生体液免疫液免疫 从自然界发掘，或通过人工培育筛选，或从自然界发掘，或通过人工培育筛选，或通过基因突变或重组，将病原体的毒力降通过基因突变或重组，将病原体的毒力降低到足以产生模拟自然发生隐性感染，诱低到足以产生模拟自然发生隐性感染，诱发理想的免疫应答而又不产生临床症状的发理想的免疫应答而又不产生临床症状的疫苗疫苗卡介苗卡介苗 (BCG)存在毒力回复、冷冻保存存在毒力回复、冷冻保存区别点区别点死疫苗死疫苗活疫苗活疫苗制剂特点制剂特点死，强毒株死，强毒株活减毒株活减毒株接种剂量接种剂量量较大，量较大，23次次量较小，量较小，1次次保存保存易保存，约易保存，约1年年不易保存不易保存免疫

6、效果免疫效果较低，较低，维持数月维持数月2年年较高，较高，维持维持35年甚至更长年甚至更长不含病原体核酸，仅含能诱发宿主产生中不含病原体核酸，仅含能诱发宿主产生中和抗体的微生物蛋白或表面抗原的疫苗和抗体的微生物蛋白或表面抗原的疫苗非重组的亚单位疫苗非重组的亚单位疫苗 是由单个蛋白或寡糖组成的疫苗，是由单个蛋白或寡糖组成的疫苗，采用化学方法将这些免疫原物质予以抽取、纯化。例如，采用化学方法将这些免疫原物质予以抽取、纯化。例如，肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌的荚膜多糖肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌的荚膜多糖基因重组亚单位疫苗基因重组亚单位疫苗 是将病原体保护性抗原基因克隆至是将病原

7、体保护性抗原基因克隆至载体质粒，在合适的表达系统载体质粒，在合适的表达系统(如大肠埃希菌、毕氏酵母如大肠埃希菌、毕氏酵母菌菌)中获得高效表达，将免疫原分离纯化而制成的疫苗中获得高效表达，将免疫原分离纯化而制成的疫苗 又称又称DNA疫苗疫苗(DNA vaccine)或基因疫苗或基因疫苗(gene vaccine)，是指将病原体保护性抗，是指将病原体保护性抗原基因片段克隆到真核表达质粒上，然后原基因片段克隆到真核表达质粒上，然后直接导入宿主体内，以持续表达目的免疫直接导入宿主体内，以持续表达目的免疫原，进而诱发保护性体液免疫和细胞免疫原，进而诱发保护性体液免疫和细胞免疫的新型疫苗的新型疫苗安全问题

8、安全问题 (artificial passive immunity) 注射含有特异性抗体的免疫血清或纯化免疫球蛋注射含有特异性抗体的免疫血清或纯化免疫球蛋白抗体，或细胞因子等免疫制剂，使机体即刻获得特白抗体，或细胞因子等免疫制剂，使机体即刻获得特异性免疫，作用及时。异性免疫，作用及时。作用作用：治疗，紧急预防：治疗，紧急预防主要生物制品主要生物制品 抗毒素抗毒素 毒素马免疫球蛋白抗毒素制剂毒素马免疫球蛋白抗毒素制剂 抗菌免疫血清抗菌免疫血清 细菌动物血清细菌动物血清 丙种球蛋白丙种球蛋白(麻疹、甲肝、脊髓灰质炎麻疹、甲肝、脊髓灰质炎) 直接提取脐带血或人血清直接提取脐带血或人血清 细胞因子制剂

9、细胞因子制剂 抗病毒的抗病毒的TF、干扰素、干扰素、IL2区别要点区别要点人工主动免疫人工主动免疫人工被动免疫人工被动免疫免疫物质免疫物质抗原抗原抗体或细胞因子等抗体或细胞因子等免疫出现时间免疫出现时间 慢，慢，24周周快，立即快，立即免疫维持时间免疫维持时间 长，数年长，数年数月数月 短，短，23周周主要用途主要用途预防预防治疗或紧急预防治疗或紧急预防抗菌药物杀菌机制抗菌药物杀菌机制1.阻碍细胞壁的形成阻碍细胞壁的形成 -内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素 2.抑制蛋白质的合成抑制蛋白质的合成 氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类 3.抑制核酸的合成抑制核酸的合成 喹诺酮类、利福霉素类、磺胺类喹诺酮类、利福霉素类、磺胺类 4.影响细胞膜的功能影响细胞膜的功能 多粘菌多粘菌素素细菌耐药原理细菌耐药原理。2016年年5月月17日下午日下午6-8节节 (601教室教室)微微生生物与人类健康物与人类健康抗生素与人类健康抗生素与人类健康掌握掌握 人工主动免疫和人工被动免疫的原理与主要生物制品人工主动免疫和人工被动免疫的原理与主要生物制品 标本采集和送检的原则标本采集和送检的原则 人工免疫与生物制品定义人工免疫与生物