色谱分法引论ppt课件

1、分析化学分析化学第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论An Introduction to Chromatography1903/1906年年 迈克尔迈克尔茨维特茨维特(Michael Tswett) 华沙大华沙大学学 俄国的植物学家俄国的植物学家 植物的石油醚提取液在碳酸钙吸附剂填植物的石油醚提取液在碳酸钙吸附剂填充的玻璃管中分别出叶绿素及其他色充的玻璃管中分别出叶绿素及其他色素素 (1(1粗叶绿素粗叶绿素+ +石油醚石油醚 2 2 石油醚石油醚 流动相流动相 相对运动相对运动 固定相吸附剂固定相吸附剂CaCO3 CaCO3 胡萝卜素胡萝卜素 利用不同物质利用不同物质叶黄素叶黄素 在流动

2、相与固定相在流动相与固定相叶绿素叶绿素 作用时的行为差作用时的行为差异得到分别异得到分别( (吸附吸附) ) 3 3小刀割开，用醇溶出小刀割开，用醇溶出 吸附作用吸附作用1931年年 库恩库恩 奥地利化学家奥地利化学家 胡萝卜素植物色素分别胡萝卜素植物色素分别20世纪世纪30年代年代 离子交换色谱建立离子交换色谱建立1940年年 吸附色谱与电泳相结合吸附色谱与电泳相结合1941年年 分配色谱创建分配色谱创建1952年年 气相色谱法建立气相色谱法建立1968年年 高效液相色谱法建立高效液相色谱法建立1975年之后年之后 离子色谱、超临界流体色谱、高效毛细管电泳、场流动分级分别离子色谱、超临界流体

3、色谱、高效毛细管电泳、场流动分级分别 Tiselius, A.W.K. Martin, A.J.P. Synge, R.L.M. 1948年 Nobel 化学奖 1952年 Nobel 化学奖 吸附色谱与电泳 分配色谱19 1 概要及术语概要及术语 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际 塔板实际塔板实际 速率实际速率实际 总分别效能目的总分别效能目的 19 3 色谱的定性定量色谱的定性定量 第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论19 -1 概要及术语概要及术语气气 体体(气相色谱气相色谱 GC 液体液体(液相色谱液相色谱 LC 超临界流体

4、超临界流体 超临界流体超临界流体 色谱色谱SFC流动相流动相固定相固定相固定相固定相外形外形称号称号1、分类、分类 液 液固固固固固固键键合合吸吸附附剂剂吸吸附附剂剂键键合合交交换换柱柱柱柱柱柱柱柱柱柱柱柱柱柱柱柱平面平面 平面平面气液气液色谱色谱 气固气固色谱色谱 液液液液色谱色谱 薄层或薄层或纸色谱纸色谱 键合键合相色相色谱谱 尺寸尺寸排阻排阻色谱色谱 离子离子交换交换色谱色谱 超临界超临界流体流体 色谱色谱液固液固色谱色谱 多多孔孔第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 -1 概要及术语概要及术语2、平面色谱、平面色谱 薄层色谱薄层色谱 0.25mm 厚厚 纤维素，硅胶纤维素，

5、硅胶 玻板玻板 纸色谱纸色谱 滤纸滤纸 液液-液液 萃取为原理萃取为原理 组份在两相中反复分配组份在两相中反复分配 因毛细作用而上升因毛细作用而上升溶剂溶剂 溶质在水相中各种存在方式总浓溶质在水相中各种存在方式总浓度度 分配比分配比 k = c水水/c有有 溶质在有机相中各种存在方式总浓度溶质在有机相中各种存在方式总浓度第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 -1 概要及术语概要及术语2、平面色谱、平面色谱 固定相滤纸巳吸水固定相滤纸巳吸水20%20% 流动相上升前沿流动相上升前沿 比移值比移值 Rf1=Zx1 / Z Rf1=Zx1 / ZZ x2 Rf2=Zx2 / ZZ x2

6、Rf2=Zx2 / Z Zx2 Zx2 图中图中kx2kx2小小快快Rf2Rf2大大 x1 kx1 x1 kx1大大慢慢Rf1Rf1小小 分开分开 Zx1 Zx1 斑点位置斑点位置 Rf Rf 值值 定定性性 斑点用荧光、光度积分值斑点用荧光、光度积分值 定量定量 展开剂有机溶剂流动相展开剂有机溶剂流动相第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 -1 概要及术语概要及术语3、柱色谱、柱色谱1 1以以GLCGLC为例为例 Gas Gas 流动相流动相 高沸点有机化合物固定液高沸点有机化合物固定液 固定相固定相 化学隋性固体微粒担体化学隋性固体微粒担体 溶解溶解 挥发挥发 现代柱色谱后加现

7、代柱色谱后加GasGas带带 A A 检测器检测器组分组分A L A L 可记录到柱后组分浓度可记录到柱后组分浓度 转换成的电信号强度转换成的电信号强度第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 -1 概要及术语概要及术语3、柱色谱、柱色谱2色谱图色谱图 随时间随时间 t 记录色谱流出曲线，即色谱图记录色谱流出曲线，即色谱图I tR W t0 tR h W h/2 0.607h o Wb t 进样进样 空气空气 组分组分1 组分组分2 惰性物质惰性物质 第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 -1 概要及术语概要及术语3、柱色谱、柱色谱3术语术语基线基线 ot死时间死时间 t0

8、 柱出口处流动相柱出口处流动相的体积流速的体积流速 死体积死体积 V0=t0F0 通常用校正体积通常用校正体积流速流速保管时间保管时间 tR 即柱温暖大气压即柱温暖大气压的载气流速的载气流速 保管体积保管体积 VR=tRF0 校正保管体积校正保管体积 VR0=tRFC调整保管时间调整保管时间 tR= tR t0 柱柱内平均体积流速内平均体积流速 调整保管体积调整保管体积 VR= VR V0 = tR F0 净保管体积净保管体积 VR0 =tR FC 第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 -1 概要及术语概要及术语3、柱色谱、柱色谱 3术语术语 柱内平均体积流速柱内平均体积流速 FC

9、 ?可用皂膜流量计在柱后测得流速可用皂膜流量计在柱后测得流速F视体积流速进展视体积流速进展 饱和水蒸气压校正饱和水蒸气压校正 P0 - PW / P0 柱温校正柱温校正 Tc / Tr 压力校正因子压力校正因子 j=(3 /2 ) (Pi/P0)2-1 / (Pi/P0)3-1 F 室室 温暖大气压力下载气流速温暖大气压力下载气流速 FC = FP0 - PW / P0 Tc / Tr j F0 柱柱 温暖大气压温暖大气压力下载气流速力下载气流速对分配色谱：对分配色谱： 分配系数分配系数kdkd= Cs/CmCs-单位体积固定相中组分的质量单位体积固定相中组分的质量Cm-单位体积流动相中组分的

10、质量单位体积流动相中组分的质量对吸附色谱对吸附色谱 吸附平衡常数吸附平衡常数kaka= Cs/CmCs-每克固定相中吸附组分的质量每克固定相中吸附组分的质量Cm-每毫升流动相中组分的质量每毫升流动相中组分的质量第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 -1 概要及术语概要及术语3、柱色谱、柱色谱 3术语术语分配容量容量因子，分配比分配容量容量因子，分配比k=ns/nm=(CsVs)/(CmVm)=kVs/Vm=k/第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 -1 概要及术语概要及术语3、柱色谱、柱色谱 3术语术语ns, nm-分别为组分在固定相和流动相中的量；分别为组分在固定相和

11、流动相中的量；Vs，Vm-分别为固定相和流动相的体积；分别为固定相和流动相的体积；-相比相比 第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 -1 概要及术语概要及术语3、柱色谱、柱色谱 3术语术语色谱峰宽区域宽度色谱峰宽区域宽度 半峰宽度半峰宽度 W 1/2 = 22ln2 =2.354 峰底宽峰底宽 Wb = 4 拐点处峰宽拐点处峰宽 W = 2 第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 -1 概要及术语概要及术语3、柱色谱、柱色谱4 4色谱图的信息色谱图的信息 a. a. 色谱峰个数色谱峰个数 判别试样中所含组判别试样中所含组分的最少数分的最少数 b. b. 色谱保管值色谱保管

12、值 定性定性 c. c. 色谱峰面积或峰高色谱峰面积或峰高 定量定量 A = K A = K C C d. d. 保管值与区域宽度保管值与区域宽度 评价柱分别评价柱分别效能根据效能根据 e. e. 两峰间距两峰间距 评价两组分能否分别评价两组分能否分别 第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 -1 概要及术语概要及术语3、柱色谱、柱色谱 4色谱图的信息色谱图的信息 上面色谱图由实验得到，是实验现实上面色谱图由实验得到，是实验现实但但 1为什么出这样的峰？为什么不是其为什么出这样的峰？为什么不是其它外形？色谱过程究竟如何？它外形？色谱过程究竟如何？ 2获得色谱图的详细安装？获得色谱图的

13、详细安装？ 怎样才干获取最好的色谱信号？怎样才干获取最好的色谱信号？ 3如何解释图、详细如何定性？定量？如何解释图、详细如何定性？定量？ 有何特点。有何特点。第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际1 塔板实际以气液分配色谱作阐明塔板实际以气液分配色谱作阐明 1想象想象 Martin 比较为蒸馏塔比较为蒸馏塔 0 1 2 3 4 5 6 气相气相G H 体积体积V 载气载气 液相液相L 一个塔板、板高一个塔板、板高H 第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际 1 塔板实际塔板实际 2假定假定 a

14、. 每一塔板内、组份迅速到达平衡。每一塔板内、组份迅速到达平衡。 b. 载气间歇进入，每一次为一个塔板体积。载气间歇进入，每一次为一个塔板体积。 c. 载气不可紧缩。载气不可紧缩。 d. 一开场组份都在一开场组份都在 0 号塔板上，沿柱长方向分号塔板上，沿柱长方向分散不思索。散不思索。 e. 组份的分配系数组份的分配系数 K = CL/ CG，在每个塔板，在每个塔板上是常数。上是常数。3色谱气过程的分解动作色谱气过程的分解动作 分配比分配比 k=p/q 组份在液相中分量组份在液相中分量 / 组组份在气相中分量份在气相中分量 对混合组份对混合组份 A ,B 假设假设 kA=1 即即 A 组份在平

15、衡时，气液中各组份在平衡时，气液中各一半量一半量 kB= 0即即 B 组份在平衡时，液相中不组份在平衡时，液相中不溶解溶解 进样初始态进样初始态 A+B 参与载气体积数参与载气体积数 N=0 第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际 1 塔板实际塔板实际进样初始态进样初始态 A+B r=0 1 2 3 4 A+B r=0 1 2 3 4 5 n5 n参与载气体积数参与载气体积数 N=0 N=0 平衡时平衡时 N=1 V1 N=1 V1 N=2 V2 N=2 V2 N=3 V3 N=3 V3 N=4 V4 N=4 V4 N=n Vn A B B

16、A N=n Vn A B B A第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际 1 塔板实际塔板实际 3色谱气过程的分解动作色谱气过程的分解动作 上图中的分布是一个二项式分布，可用上图中的分布是一个二项式分布，可用二项式展开计算。二项式展开计算。当当 N N 或或 n n 很大时，用数理统计，正态很大时，用数理统计，正态分布，概率分布函数给出表达式分布，概率分布函数给出表达式 n n， n n 为塔为塔板数。板数。第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际 1 塔板实际塔板实际 3色谱气过程的分解动作色

17、谱气过程的分解动作 4 4 表达式表达式柱效能概念上图可见，对于同一柱长柱效能概念上图可见，对于同一柱长L L，假设塔，假设塔板数板数n n 即即 H , H ,那么平衡分配次数愈多那么平衡分配次数愈多 . . 阐阐明该物质在这个柱上的效能愈大明该物质在这个柱上的效能愈大n n 可衡量一根柱的效能可衡量一根柱的效能,n ,n 愈大，被分别的能够愈大，被分别的能够愈大愈大 n n实际实际=16(tR/Wb)2=5.545 (tR/ W1/2)2=16(tR/Wb)2=5.545 (tR/ W1/2)2 H H实际实际= L/n= L/n实际实际n n 表示一定条件下，柱分别才干发扬程度的标表示一

18、定条件下，柱分别才干发扬程度的标志。志。由于由于tRtR中含有中含有t0,t0,实践在分配中发扬作用仅是实践在分配中发扬作用仅是tRtR中的中的tRtR部分部分 n n有效有效=16(tR / Wb)2=5.545 (tR / =16(tR / Wb)2=5.545 (tR / W1/2)2W1/2)2 H H有效有效= L/n= L/n有效有效 第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际 1 塔板实际塔板实际5关于塔板数计算的几个问题关于塔板数计算的几个问题a. n 是人为概念，不同方法测得的塔板数相差很是人为概念，不同方法测得的塔板数相差很大

19、，但它有用为比较类似色谱柱或制备柱时的大，但它有用为比较类似色谱柱或制备柱时的技术好坏建立了规范技术好坏建立了规范 b. n不仅决议于组分及两相的性质，还与一系列操不仅决议于组分及两相的性质，还与一系列操作条件有关因此作条件有关因此 比较柱效能时，必需指定组份、比较柱效能时，必需指定组份、固定相及含量、柱温、流动相及速度、进样量固定相及含量、柱温、流动相及速度、进样量等。等。c. 不同组份在同一柱上，不同组份在同一柱上，k值大的，值大的，n值较大值较大 。d. 不对称色谱峰，计算会产生较大误差，可到达不对称色谱峰，计算会产生较大误差，可到达1020%，峰愈近正态分布，误差愈小。，峰愈近正态分布

20、，误差愈小。e. 检测器呼应与浓度应有线性呼应，否那么检测器呼应与浓度应有线性呼应，否那么n值值不真实。不真实。f. 计算计算n时，保管值与峰宽应有一样单位。时，保管值与峰宽应有一样单位。 第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际 1 塔板实际塔板实际6 对塔板实际评价对塔板实际评价胜利：胜利： a. 解释色谱流出曲线外形呈正态分布解释色谱流出曲线外形呈正态分布 b. 浓度极大点位置浓度极大点位置 c. 评价柱效应能高低的塔板数计算评价柱效应能高低的塔板数计算存在问题：存在问题：a. 不能阐明板高的影响要素不能阐明板高的影响要素 b. 色谱宽变

21、宽缘由色谱宽变宽缘由 c. 不能解释不同流速的不能解释不同流速的 n 值不同值不同 假定与实践不相符引起假定与实践不相符引起 第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际 1 塔板实际塔板实际第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际 2 速率实际速率实际1范第姆特公式范第姆特公式 1956年年 荷兰荷兰 范范第姆特第姆特(Van Deemter)公式公式: H = A + B /u + Cu 概括了影响概括了影响 H 的动力学效应的动力学效应A项项涡流分散项涡流分散项 即多径项即多径项 t1 t0

22、t1t1峰变宽峰变宽 t1 A = 2dP 不规那么因子不规那么因子 颗粒平均直径颗粒平均直径 表示不均性表示不均性 填充物不规那么性，使途径不同填充物不规那么性，使途径不同 对空心柱对空心柱 A = 0 要使要使H小小 怎样办？怎样办？ 第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际 2 速率实际速率实际 1范第姆特公式范第姆特公式B/u项项分子分散项分子分散项 即纵向分散即纵向分散 试样试样塞塞 向两边纵向分散向两边纵向分散 要使要使H小小 怎怎样办？样办？ GC 中此项不计中此项不计 B = Bm + Bs = 2m Dm +s Ds k 流动

23、相流动相 固定相固定相 弯曲因子弯曲因子 分散系数分散系数 分配分配比比 1 Dm :0.011cm2/ss 分散时的途径弯曲即分散受阻系数分散时的途径弯曲即分散受阻系数 Ds: 10-410-5 Dm要要B 对一定柱对一定柱Dm ( 组份分子量组份分子量 柱温柱温 柱压柱压 载气分载气分子量子量)要要u 即停留时间短即停留时间短 留意留意:与与是有区别的是有区别的, 填充物均匀填充物均匀,而而不一定不一定第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际 2 速率实际速率实际 1范第姆特公式范第姆特公式第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19

24、2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际2 速率实际速率实际 1范第姆特公式范第姆特公式Cu项项传质阻力项传质阻力项 传质过程指什么？传质过程指什么？ 浓度不均匀而发生的质量迁移过浓度不均匀而发生的质量迁移过程程 表现为两相中的分散过程及溶解、平衡、转表现为两相中的分散过程及溶解、平衡、转移过程移过程GL例：例： 组分在气相任一部位组分在气相任一部位 挪动速度由气相转质阻力系数表示挪动速度由气相转质阻力系数表示 G 移至移至界面界面 C = Cm + Cs L 移至移至 挪动速度由液相转质阻力系数表示挪动速度由液相转质阻力系数表示 组分在液相中任一部位组分在液相中任一部位 第第19章章 色谱分

25、析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际2 速率实际速率实际 1范第姆特公式范第姆特公式Cu项项传质阻力项传质阻力项 传质阻力使峰变宽传质阻力使峰变宽组分在气相中浓度组分在气相中浓度 CG 柱间隔柱间隔组分在液相中浓度组分在液相中浓度 CL 理想形状瞬间平衡理想形状瞬间平衡 实践情况实践情况 有有 CL=KCG 气相在运动平衡气相在运动平衡 需需求时间求时间 平衡常数假设平衡常数假设K=1 传质阻力存传质阻力存在在 那么柱那么柱x 间隔有等浓度间隔有等浓度 A点：点： CLKCG B点：点： CLKCG 第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过

26、程的讨论实际色谱过程的讨论实际2 速率实际速率实际 1范第姆特公式范第姆特公式Cu项项传质阻力项传质阻力项 C= Cs+ Cm 构成因子构成因子 固定相液膜厚度固定相液膜厚度 分配比分配比 与容量因子有关的系数与容量因子有关的系数 GLC LLC Cs qk ds2 sds2固定相固定相 (1k2 Ds Ds Cm 0.01k2 dp2 (m+ sm) dp2流动相流动相 1k2 Dm Dm 流动相因流动对流动相因流动对 在微孔中滞留流动相在微孔中滞留流动相 传质阻力的奉献传质阻力的奉献 对传质阻力的奉献对传质阻力的奉献 第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际

27、色谱过程的讨论实际2 速率实际速率实际 1范第姆特公式范第姆特公式Cu项项传质阻力项传质阻力项 s固定相因流动对固定相因流动对 传质阻力的奉献传质阻力的奉献 m流动相因流动对流动相因流动对 传质阻力的奉献传质阻力的奉献 sm在微孔中滞留流动相在微孔中滞留流动相 对传质阻力的奉献对传质阻力的奉献 第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际2 速率实际速率实际 1范第姆特公式范第姆特公式第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际2 速率实际速率实际2范氏方程的开展范氏方程的开展GL中：中：1962年年

28、吉丁斯吉丁斯Giddings“涡流分散耦合实际涡流分散耦合实际 展宽要素相互影响、不是简单加和、流动方式极展宽要素相互影响、不是简单加和、流动方式极为复杂为复杂 A项修正为与气相传质相互作用有关项修正为与气相传质相互作用有关 A=(1/ 2dP)+(1/ Cm u)-1 第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际2 速率实际速率实际 2范氏方程的开展范氏方程的开展 LL 中：中： 范氏方程可进范氏方程可进 一步简化一步简化 当当dP足够小时，足够小时， 2dP与与 mdp2/Dm合并，合并， 近似表达为近似表达为Au 0.33 H = Au 0.

29、33 + B /u + Cs+ Cm u 填充良好，粒径较大多孔膜填充良好，粒径较大多孔膜ds很小时，很小时，HPLC中纵向分散很小中纵向分散很小 H = Au 0.33 +Cm u第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际2 速率实际速率实际3 3胜利之处胜利之处 解释影响板高要素解释影响板高要素 填充均匀度填充均匀度 颗粒大小颗粒大小 流动相流速流动相流速 类型类型 固定相厚度固定相厚度 对选择操作条对选择操作条件具有指点意义件具有指点意义 第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 10 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际3 柱的总分

30、别效能目的柱的总分别效能目的1n 作为柱效能目的作为柱效能目的即反映物质在柱中到达分配平衡次数即反映物质在柱中到达分配平衡次数但不能直接反映难分别物质对但不能直接反映难分别物质对A、B的的分别效果分别效果第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际3 柱的总分别效能目的柱的总分别效能目的2分别度分别度R 即总分别效能目的即总分别效能目的 R=2(tR2-tR1)/(Wb1+Wb2) 浓度浓度A/B=1/1时时 R=1 分别程度分别程度 98% R=1.5 分别程度分别程度99.9% 完全分别完全分别 相邻两峰相邻两峰Wb1+Wb2= 8 R= (t

31、R2-tR1)/ 4第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际3 柱的总分别效能目的柱的总分别效能目的3色谱分别方程式色谱分别方程式R、k、n三者关系三者关系令令 Wb1+Wb2= 2W R= (tR2-tR1)/W= (tR2-tR1 )/W 即即 W= (tR2-tR1)/ R= (tR2-tR1 )/R又又 n有效有效=16(tR2 / W2)2 或或n实际实际=16(tR2/W2)2即有即有 n有效有效=16R tR2 / (tR2-tR1 )2 =16R2(2,1 / 2,1 1)2 R=(n有效有效 /4)(2,1 1)/2,1 第第

32、19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际 3 柱的总分别效能目的柱的总分别效能目的 3色谱分别方程式色谱分别方程式管值管值 R=(n实际实际/4) ( -1) / k2/ 1+k 2) 色谱分别根本方程式色谱分别根本方程式k 220 k2/(1+k 2)=1 n有效有效=n实实际际 第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际3 柱的总分别效能目的柱的总分别效能目的 4讨论讨论R是是 容量因子容量因子k2 分别系数分别系数 即相对保管值即相对保管值2,1 柱效能柱效能 n 函数函数第第19章章 色谱分析

33、法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际3 柱的总分别效能目的柱的总分别效能目的 4讨论讨论 提高提高R的方法的方法: A. 使使k 那么那么k2/(1+k 2) R 太大太大 a. 延伸分析时间延伸分析时间 b. 呵斥检测困难呵斥检测困难 K 普通在普通在 27 k10分别度提高不明显分别度提高不明显 k2淋洗时间会出现极小值淋洗时间会出现极小值B. 使使n那么那么R。分别改善、峰变窄有利提高分析灵敏。分别改善、峰变窄有利提高分析灵敏度度 但添加柱长使但添加柱长使n, 延伸分析时间。延伸分析时间。 设法使设法使H，才是添加，才是添加R 的最好方法的最好方法第第19

34、章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 19 2 色谱过程的讨论实际色谱过程的讨论实际3 柱的总分别效能目的柱的总分别效能目的 4讨论讨论 提高提高R的方法的方法:C. 使使 那么那么 1/ R 2 时时 短时间内组分会完全分别短时间内组分会完全分别 接近接近1 时时 延伸时间才干完全分别延伸时间才干完全分别 (=1.01分别时间是分别时间是=1.1时的时的84倍倍) =1时时 无法分别无法分别 一定，一定，R正比于正比于n有效有效,即分别度直接与即分别度直接与n有有效有关效有关 阐明阐明n有效更能正确地代表柱效能。有效更能正确地代表柱效能。第第19章章 色谱分析法引论色谱分析法引论 17 3 色谱的定性定量色谱的定性定量 1. 色谱的定性对照色谱的定性对照 利用保管值进展