免疫增殖病及检验

1、免疫学检验免疫学检验第二十七章第二十七章免疫增殖病及检验免疫增殖病及检验1. 免疫增殖病的概念免疫增殖病的概念和分类和分类2. 单克隆丙种球蛋白病单克隆丙种球蛋白病的概念的概念3. 常见的常见的单克隆丙种球蛋白病单克隆丙种球蛋白病4. 本周蛋白本周蛋白、M蛋白的概念蛋白的概念5. 单克隆丙种球蛋白病的单克隆丙种球蛋白病的检测检测本章要点本章要点目录目录 概述概述1单克隆丙种球蛋白病的临床免疫学特征单克隆丙种球蛋白病的临床免疫学特征2单克隆丙种球蛋白病的检测方法单克隆丙种球蛋白病的检测方法3 免疫增殖病免疫增殖病immunoproliferative diseaseimmunoprolifera

2、tive disease是免疫是免疫系统异常增生而引起的疾病。免疫增殖病的重要临床表系统异常增生而引起的疾病。免疫增殖病的重要临床表现包括免疫球蛋白数量和功能的异常，因此通过异常免现包括免疫球蛋白数量和功能的异常，因此通过异常免疫球蛋白的检测，可以为该类疾病的诊断提供重要根据，疫球蛋白的检测，可以为该类疾病的诊断提供重要根据，检测异常免疫球蛋白已经成为临床免疫检验的重要检测检测异常免疫球蛋白已经成为临床免疫检验的重要检测内容。内容。前前 言言第一节第一节 概述概述免疫增殖病的概念免疫增殖病的概念 免疫器官、免疫组织或免疫细胞异常增生包括良免疫器官、免疫组织或免疫细胞异常增生包括良性或恶性所致的

3、一组疾病。性或恶性所致的一组疾病。免疫增殖病的分类免疫增殖病的分类增殖细胞增殖细胞疾病疾病T细胞细胞急性淋巴细胞白血病（急性淋巴细胞白血病（20）淋巴母细胞瘤淋巴母细胞瘤部分非霍奇金淋巴瘤部分非霍奇金淋巴瘤Sezary综合征综合征蕈样霉菌病蕈样霉菌病B细胞细胞慢性淋巴细胞白血病慢性淋巴细胞白血病原发性巨球蛋白血症原发性巨球蛋白血症多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤重链病和轻链病重链病和轻链病Burkitt淋巴瘤淋巴瘤其他多数淋巴细胞瘤其他多数淋巴细胞瘤传染性单核细胞增多症传染性单核细胞增多症免疫增殖病的分类免疫增殖病的分类增殖细胞增殖细胞疾病疾病裸细胞裸细胞急性淋巴细胞白血病（急性淋巴细胞白血病（80）

4、部分非霍奇金淋巴瘤部分非霍奇金淋巴瘤组织组织-单核细胞单核细胞急性单核细胞白血病急性单核细胞白血病急性组织细胞增多症急性组织细胞增多症其他（分类不统一）其他（分类不统一）毛细胞白血病毛细胞白血病其他霍奇金病其他霍奇金病免疫球蛋白病的概念免疫球蛋白病的概念 由于由于B B细胞或细胞或浆细胞异常增殖所引起的免疫浆细胞异常增殖所引起的免疫球蛋白球蛋白的的异常增加，异常增加，从而导致从而导致机体病理损伤的免机体病理损伤的免疫增殖病疫增殖病。 分类分类单克隆免疫球蛋白病单一克隆、恶性单克隆免疫球蛋白病单一克隆、恶性多克隆免疫球蛋白病全面、良性或继发多克隆免疫球蛋白病全面、良性或继发第二节第二节 单克隆丙

5、种球蛋白病的临床免疫学特征单克隆丙种球蛋白病的临床免疫学特征 突出特点：患者血清存在异常增多的单克隆免疫球突出特点：患者血清存在异常增多的单克隆免疫球蛋白蛋白 M M蛋白蛋白monoclonal proteinmonoclonal protein：单克隆免疫：单克隆免疫球蛋白理化性质非常均一，但是多无免疫活性，球蛋白理化性质非常均一，但是多无免疫活性，可以是可以是IgGIgG、IgMIgM、IgAIgA、IgEIgE或或IgDIgD，也可以是，也可以是或或轻链中的任何一型。轻链中的任何一型。 本周蛋白本周蛋白Bence-Jone proteinBence-Jone protein：M M蛋白的

6、轻链蛋白的轻链分子量较小，容易从尿中排出，最早由分子量较小，容易从尿中排出，最早由Bence-Bence-JonesJones测知。测知。一、一、多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤 多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤multiple myelomamultiple myeloma是浆细胞是浆细胞异常增生的恶性肿瘤，也称浆细胞瘤，因其引起骨异常增生的恶性肿瘤，也称浆细胞瘤，因其引起骨破坏而得名。患者常伴有贫血、肾功损害和免疫功破坏而得名。患者常伴有贫血、肾功损害和免疫功能障碍。近年发病有增高趋势，男性多发，男女比能障碍。近年发病有增高趋势，男性多发，男女比约为约为2:12:1，平均发病年龄是岁。，平均发病年龄是岁。

7、临床表现：临床表现： 骨痛骨痛 贫血贫血 感染感染 高黏血症表现高黏血症表现 肾功能损害肾功能损害 患者骨破坏所致头颅肿物患者骨破坏所致头颅肿物及眼球突出及眼球突出特点：特点： 血清中有大量单克隆血清中有大量单克隆M M蛋白或尿中有大量本周蛋白蛋白或尿中有大量本周蛋白免疫球蛋白含量明显降低免疫球蛋白含量明显降低骨髓发现大量浆细胞或组织活检证实有浆细胞瘤骨髓发现大量浆细胞或组织活检证实有浆细胞瘤原发性的溶骨性损害或广泛骨质疏松原发性的溶骨性损害或广泛骨质疏松类类 型型发生率发生率（%）本周蛋白尿阳本周蛋白尿阳性（性（%）临床特点临床特点IgG506050 70典型症状典型症状IgA20 2550

8、 70高黏综合征较多见高黏综合征较多见IgD1 290骨髓外病变多见，溶骨病骨髓外病变多见，溶骨病变多见，变多见，44%淀粉样变淀粉样变IgE0.01少见少见 非 分 泌非 分 泌型型1 5无无溶骨病变较少，神经系统溶骨病变较少，神经系统损害较多见损害较多见 不同类型的多发性骨髓瘤特点不同类型的多发性骨髓瘤特点 二、二、原发性巨球蛋白血症原发性巨球蛋白血症 原发性巨球蛋白血症原发性巨球蛋白血症macroglobulinemiamacroglobulinemia是以分泌是以分泌IgMIgM的浆细胞恶性增殖为病理根底的疾病，的浆细胞恶性增殖为病理根底的疾病，好发于老年男性。好发于老年男性。 主要表

9、现骨髓外浸润，以淋巴结、肝和脾肿主要表现骨髓外浸润，以淋巴结、肝和脾肿大等为主要体征并伴有血黏滞过高综合征。大等为主要体征并伴有血黏滞过高综合征。实验室检查：实验室检查： 血清中患者血清血清中患者血清IgMIgM程度往往超过程度往往超过300mg/dl300mg/dl血清别离不出或呈胶冻状，电泳时血清有时难以泳动血清别离不出或呈胶冻状，电泳时血清有时难以泳动，集中于原点是该病的电泳特征，集中于原点是该病的电泳特征骨髓象可见淋巴细胞、浆细胞和介乎两者之间的浆细胞骨髓象可见淋巴细胞、浆细胞和介乎两者之间的浆细胞样淋巴细胞明显增多样淋巴细胞明显增多有些有些IgMIgM分子具有冷球蛋白的特征分子具有冷

10、球蛋白的特征有约有约4040的病人可出现本周蛋白尿的病人可出现本周蛋白尿三、三、良性单克隆丙种球蛋白病良性单克隆丙种球蛋白病 良 性 单 克 隆 丙 种 球 蛋 白 病 良 性 单 克 隆 丙 种 球 蛋 白 病 b e n i g n b e n i g n monoclonal gammopathymonoclonal gammopathy是指血清中出现高程度是指血清中出现高程度免疫球蛋白，但并无浆细胞恶性增殖的疾病。一般免疫球蛋白，但并无浆细胞恶性增殖的疾病。一般无临床病症，往往因其它疾病就诊时发现血中有无临床病症，往往因其它疾病就诊时发现血中有M M蛋白，但其并不呈进展性增加，在少部分

11、正常老年蛋白，但其并不呈进展性增加，在少部分正常老年人群中也可出现上述情况。人群中也可出现上述情况。 三、恶性与良性单克隆丙种球蛋白三、恶性与良性单克隆丙种球蛋白病的鉴别诊断病的鉴别诊断 恶性与良性单克隆丙种球蛋白病的鉴别恶性与良性单克隆丙种球蛋白病的鉴别 四、四、冷球蛋白血症冷球蛋白血症 冷球蛋白冷球蛋白cryoglobulincryoglobulin：指温度低于：指温度低于30 30 时易自发形成沉淀，加温后又可溶解的免疫球时易自发形成沉淀，加温后又可溶解的免疫球蛋白蛋白 冷球蛋白血症：当血中含有冷球蛋白时称为冷球冷球蛋白血症：当血中含有冷球蛋白时称为冷球蛋白血症蛋白血症特点：特点： 多见

12、于某些原发性疾病，例如感染、自身免疫病和某些免疫增殖多见于某些原发性疾病，例如感染、自身免疫病和某些免疫增殖病病患者常有因冷球蛋白沉淀所引起的高血黏度、红细胞凝集、血患者常有因冷球蛋白沉淀所引起的高血黏度、红细胞凝集、血栓形成等病理表现。栓形成等病理表现。常见病症有雷诺现象即寒冷性肢端紫绀、皮肤紫癜、坏死常见病症有雷诺现象即寒冷性肢端紫绀、皮肤紫癜、坏死、溃疡、寒冷性荨麻疹、关节痛、肾损害、神经系统病变、溃疡、寒冷性荨麻疹、关节痛、肾损害、神经系统病变如感觉麻木、运动障碍等以及肝、脾等器官损害。如感觉麻木、运动障碍等以及肝、脾等器官损害。五、五、淀粉样变性淀粉样变性 淀粉样变性淀粉样变性amy

13、loidosisamyloidosis是组织器官中有是组织器官中有淀粉样物质沉积的一种病理现象。该病比较少见，淀粉样物质沉积的一种病理现象。该病比较少见，常可累及各种不同的组织和器官，但以小动脉、肾常可累及各种不同的组织和器官，但以小动脉、肾小球、肝、脾和肾上腺最为常见。小球、肝、脾和肾上腺最为常见。第三节第三节 单克隆丙种球蛋白病的检测方法单克隆丙种球蛋白病的检测方法 血清蛋白区带电泳血清蛋白区带电泳 免疫球蛋白定量检测免疫球蛋白定量检测 免疫球蛋白的分类鉴定免疫球蛋白的分类鉴定 本周蛋白检测本周蛋白检测 冷球蛋白检测冷球蛋白检测一、血清蛋白区带电泳一、血清蛋白区带电泳 血清区带电泳是测定血

14、清区带电泳是测定M M蛋白的一种定性实验，常蛋白的一种定性实验，常采用醋酸纤维素膜和琼脂糖电泳两种方法。采用醋酸纤维素膜和琼脂糖电泳两种方法。 M M蛋白在电泳时出现于蛋白在电泳时出现于 区代中，不同类型区代中，不同类型的的M M蛋白的电泳后所处位置。蛋白的电泳后所处位置。二、二、免疫球蛋白定量检测免疫球蛋白定量检测 免疫球蛋白定量测定较常用的方法有免疫球蛋白定量测定较常用的方法有单向扩散法单向扩散法与与免疫比浊法免疫比浊法，前者较为简便，后者更为准确迅，前者较为简便，后者更为准确迅速。速。 恶性单克隆丙种球蛋白病常呈现某一类丙种球蛋白恶性单克隆丙种球蛋白病常呈现某一类丙种球蛋白的显著增高。的

15、显著增高。 在良性丙种球蛋白病的血清标本中，在良性丙种球蛋白病的血清标本中，M M蛋白的升蛋白的升高幅度一般不象恶性丙种球蛋白病那么高高幅度一般不象恶性丙种球蛋白病那么高 三、三、免疫球蛋白免疫球蛋白的分类鉴定的分类鉴定 免疫电泳免疫电泳 免疫选择电泳免疫选择电泳 免疫免疫固定固定电泳电泳免疫电泳：免疫电泳： 免疫电泳是将琼脂糖电泳和免疫双向扩散相结合免疫电泳是将琼脂糖电泳和免疫双向扩散相结合的一项技术。的一项技术。 血清标本先行区带电泳分成区带，继而用特定的抗血清标本先行区带电泳分成区带，继而用特定的抗血清进展免疫扩散，阳性样本的血清进展免疫扩散，阳性样本的M M蛋白将在适当的部蛋白将在适当

16、的部位形成异常沉淀弧，根据抗血清的种类、电泳位置及位形成异常沉淀弧，根据抗血清的种类、电泳位置及沉淀弧的形状可以对沉淀弧的形状可以对M M蛋白作出断定。蛋白作出断定。 正常及某些患者免疫电泳图谱正常及某些患者免疫电泳图谱 上孔中为血清，下孔中为尿液，槽中为抗血清，箭头所指为骨髓瘤蛋白上孔中为血清，下孔中为尿液，槽中为抗血清，箭头所指为骨髓瘤蛋白a：抗正常人血清；：抗正常人血清；b：抗：抗IgG血清；血清；c：抗：抗IgA血清；血清；d：抗：抗IgM血清血清e：抗：抗血清；血清；f：抗：抗血清血清A：IgA/型骨髓瘤；型骨髓瘤； B：IgG/型骨髓瘤；型骨髓瘤； C：IgG重链病重链病免疫选择电

17、泳：免疫选择电泳： 制备含抗制备含抗或或血清的薄层琼脂板，打孔并参加待测血清的薄层琼脂板，打孔并参加待测标本进展火箭电泳，待形成相应的火箭样沉淀峰后，标本进展火箭电泳，待形成相应的火箭样沉淀峰后，于孔的两侧各挖一槽，参加抗某类免疫球蛋白血清或于孔的两侧各挖一槽，参加抗某类免疫球蛋白血清或另一型抗轻链血清，温育扩散后，根据沉淀弧形成的另一型抗轻链血清，温育扩散后，根据沉淀弧形成的情况，进展分析鉴定。情况，进展分析鉴定。免疫选择电泳图谱示意图免疫选择电泳图谱示意图 琼脂中含抗琼脂中含抗及抗及抗抗血清，例如孔中为血清标本，抗血清，例如孔中为血清标本，槽中为抗槽中为抗IgA重链抗血清重链抗血清 A：正

18、常人；：正常人；B：重链病；重链病；C：IgA骨髓瘤骨髓瘤免疫固定电泳：免疫固定电泳： 免疫固定电泳是血清区带电泳与免疫沉淀反响相结免疫固定电泳是血清区带电泳与免疫沉淀反响相结合的定性实验。合的定性实验。 与免疫电泳比较免疫固定电泳具有更高的灵敏性，与免疫电泳比较免疫固定电泳具有更高的灵敏性，M M蛋白在免疫固定电泳中显示狭窄而界限明确的区带，蛋白在免疫固定电泳中显示狭窄而界限明确的区带，而多克隆增殖或正常血清而多克隆增殖或正常血清球蛋白区带那么比较弥散球蛋白区带那么比较弥散。 IgG/型多发性骨髓瘤的免疫固定电泳图谱型多发性骨髓瘤的免疫固定电泳图谱四、四、本周蛋白检测本周蛋白检测3.直接定量

19、分析直接定量分析尿液透析浓缩尿液透析浓缩50倍后进展倍后进展2.免疫固定电泳免疫固定电泳1.本周蛋白定性检查本周蛋白定性检查(筛查筛查)溶解溶解(+)90 沉淀沉淀标本标本5060 五、五、冷球蛋白检测冷球蛋白检测 冷球蛋白是血清中的一种特殊蛋白质，在冷球蛋白是血清中的一种特殊蛋白质，在44时自时自发沉淀，加温至发沉淀，加温至3737时又可溶解，故常利用这种可逆时又可溶解，故常利用这种可逆性冷沉淀的特性对其进展测定。性冷沉淀的特性对其进展测定。 取患者外周血，别离出血清置取患者外周血，别离出血清置44冰箱中，一冰箱中，一般在般在24h24h72h72h出现沉淀，假设出现沉淀，假设1 1周仍不出现沉淀周仍不出现沉淀者方可判断为阴性。者方可判断为阴性。 如形成沉淀，再置如形成沉淀，再置373