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1、精选优质文档-倾情为你奉上(共16套)新人教版高中生物选修1(全套)导学案汇总专题1课题1 果酒和果醋和制作【补充知识】发酵1、概念:利用微生物或其他生物的细胞在有氧或无氧条件下繁殖或积累其代谢产物的过程。2、类型:(1)根据是否需要氧气分为: 和 。(2)根据产生的产物可分为: 、 、 等。一、基础知识(一)果酒制作的原理1菌种是 ,属于 生物,新陈代谢类型 ,有氧时,进行 ,大量繁殖,反应式为 ;无氧时,能进行 ,反应式为 。2酵母菌繁殖的最适温度 左右,且为有氧条件;酒精发酵一般控制在 ,缺氧酸性条件。(原因: )3自然发酵过程中,起作用的主要是附着于 上的野生型酵母菌。也可以在果汁中加
2、入人工培养的酵母菌。4.葡萄酒呈深红色的原因: (二)果醋制作的原理1菌种是 ,属于 生物,新陈代谢类型为 。只有在氧气充足时,才能进行旺盛的生命活动。变酸的酒表面观察到的菌膜就是 在液面大量繁殖形成的。2当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的 分解成 ,当缺少糖源时,醋酸菌将 变为 ,再将乙醛变为 ,反应简式为 。3醋酸菌的最适合生长温度为 。4菌种来源:到 或 购买,或从 中分离醋酸菌。二、实验设计1、流程图 葡萄 发酵 发酵 2、制作实例实验材料葡萄、榨汁机、纱布、醋酸菌(或醋曲)、发酵瓶(如右图)、气泵、体积分数为70%的酒精等。实验步骤1对发酵瓶、纱布、榨汁机等实验用具进行清洗并消
3、毒。先用温水反复冲洗几次,再用体积分数为 的酒精擦拭消毒,晾干待用。2取葡萄500g,去除枝梗和腐烂的子粒。3用清水冲洗葡萄12遍除去污物。(注意 。)4用榨汁机榨取葡萄汁后,将其装入发酵瓶中。(如果没有合适的发酵装置,可用500mL的_替代。但注入的果汁量不要超过塑料瓶总体积的_。)5将发酵瓶置于适宜的温度(_)下发酵。6由于发酵旺盛期CO2的产量非常多,因此需要及时_,以防止发酵瓶爆裂。(如果是简易发酵装置,每天_瓶盖24次。进行排气。)710天后,取样检验。例如,可以检验酒味、酒精的含量、进行酵母菌的镜检等工作。8当果酒制成以后,可在发酵液中加入醋酸菌(或醋曲),然后移至_条件下发酵,适
4、时用气泵向发酵液中_。(如果没有充气装置,可以将瓶盖打开,在瓶口上盖上_。)三、操作提示(一)材料的选择与处理选择_的葡萄,榨汁前先将葡萄进行_,然后再除去_。(二)防止发酵液被污染1、榨汁机要清洗_,并_。2、发酵瓶要清洗_,用体积分数_的酒精消毒。3、装入葡萄汁后,_充气口。(三)控制好发酵条件1、葡萄汁装入发酵瓶时,要留出大约_的空间。2、制作葡萄酒过程中,将温度严格控制在_,时间控制在_d左右,可通过出料口对发酵的情况进行及时的监测。3、制作葡萄醋的过程中,将温度严格控制在_,时间控制在_d左右,并注意适时通过充气口_。四、课题延伸果汁发酵后是否有酒精产生,可以用_来检验。在_条件下,
5、重铬酸钾与酒精反应呈现_。检测时,先在试管中加入发酵液2mL,再滴入物质的量的浓度为3mol/L的_3滴,振荡混匀,最后滴加常温下_3滴。【教材答案】(一)旁栏思考题1.你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗?为什么?答:应该先_,然后再_,以避免除去枝梗时引起葡萄破损,增加被杂菌污染的机会。2.你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染?提示:需要从发酵制作的过程进行_的考虑。例如,榨汁机、发酵装置要_干净;每次排气时只需_瓶盖、不要完全揭开瓶盖等。3.制葡萄酒时,为什么要将温度控制在1825 ?制葡萄醋时,为什么要将温度控制在3035 ?答:温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。_最适合酵母菌繁殖。因此
6、需要将温度控制在其最适温度范围内。而醋酸菌是嗜温菌,最适生长温度为_,因此要将温度控制在3035 。4.制葡萄醋时,为什么要适时通过充气口充气?答:醋酸菌是_菌,在将酒精变为醋酸时需要_的参与,因此要适时向发酵液中充气。(二)资料发酵装置的设计讨论题请分析此装置中的充气口、排气口和出料口分别有哪些作用。为什么排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接?答:充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行 用的;排气口是在酒精发酵时用来排出 的;出料口是用来取样的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接,其目的是 ,其作用类似巴斯德的鹅颈瓶。使用该装置制酒时,应该 充气口;制醋时,应将充气口连接气泵,输入 。
7、专题1课题2 腐乳的制作一、基础知识腐乳制作的原理1腐乳的发酵有多种微生物的 ,其中起主要作用的是 ,它是一种 生物,新陈代谢类型是 。2毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的 分解成小分子的 和 ;脂肪酶可以将 水解成 和 。3现代的腐乳生产是在严格的 条件下,将优良 菌种直接接种在豆腐上,这样可以避免 的污染,保证产品的质量。二、实验设计1、实验流程让豆腐 加 腌制加 装瓶 腌制。2、制作实例实验材料:含水量70%的豆腐,粽叶,盘子,盐,黄酒,米酒,糖,香辛料等,广口玻璃瓶,高压锅等。实验步骤1将豆腐切成3cm×3cm×1cm若干块。2将豆腐块平放在铺有干粽叶的盘内(粽
8、叶可以提供菌种,并能起到保温的作用),每块豆腐等距离排放,周围留一定的 。豆腐上面再铺上干净的粽叶。气候干燥时,将平盘用保鲜膜包裹,但不要封严,以免湿度太高,不利于毛霉的生长。3将平盘放在温度为 的地方,毛霉逐渐生长,大约5d后,豆腐表面丛生直立菌丝。4当毛霉生长旺盛,并呈 时,去除保鲜膜及铺在上面的粽叶,使豆腐块的热量和水分能够迅速散失,同时散去霉味,这一过程一般持续36h以上。5豆腐凉透后,将豆腐间的连在一起的菌丝拉断,并整齐排在容器内,准备腌制。6长满毛霉的豆腐块(以下称毛坯)分层摆放,分层加盐,并随层高而 ,在接近瓶口表面盐要铺厚一些,以防止杂菌污染,约腌制8d。(豆腐与盐质量分数比为
9、51)7将黄酒、米酒和糖、香辛料等混合制成卤汤。卤汤酒精含量控制在 左右为宜。8将广口玻璃瓶刷洗干净,用高压锅在1000C蒸汽灭菌30min,将腐乳成坯摆入瓶中,加入卤汤和辅料后,将瓶口用 加热灭菌,用胶条 。在常温下,一般六个月即可以成熟。三、操作提示(一)控制好材料的用量1、用盐腌制时,注意控制盐的用量。盐的浓度过低, ,可能导致豆腐腐败;盐的浓度过高,会 。2、乳汤中酒的含量应控制在 左右。酒精含量过低, ,可能导致豆腐腐败;酒精含量过高,腐乳成熟的时间将会 。(二)防止杂菌污染1、用来腌制腐乳的玻璃瓶,刷干净后要用 消毒。2、装瓶时要 ;加入卤汤后要用胶条将瓶口 ;封瓶时,最好将瓶口通
10、过酒精灯的火焰,防止瓶口被 。【教材答案】(一)旁栏思考题1.你能利用所学的生物学知识,解释豆腐长白毛是怎么一回事?答:豆腐上生长的白毛是毛霉的 。严格地说是直立菌丝,在豆腐中还有匍匐菌丝。2.王致和为什么要撒许多盐,将长毛的豆腐腌起来?答:盐能 ,避免豆腐腐败。3.我们平常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳?答:含水量为 的豆腐适于作腐乳。用含水量过高的豆腐制腐乳,不易成形。4.吃腐乳时,你会发现腐乳外部有一层致密的“皮”。这层“皮”是怎样形成的呢?它对人体有害吗?它的作用是什么?答:“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的 (匍匐菌丝),它能形成腐乳的“体”,使腐乳成形。“皮”对人体无害。(二)练习
11、1.答: ,因此要随着豆腐层的加高增加盐的用量,在接近瓶口的表面,盐要铺厚一些,以有效防止杂菌污染。专题1课题3 制作泡菜并检测亚硝酸盐含量一乳酸菌1.代谢类型为异养厌氧型,在 情况下,将葡萄糖分解成乳酸2.常见种类: 和 3.分布:分布广泛, 、土壤、植物 、人或动物的 内等均有分布。4.应用:常用于生产 二亚硝酸盐1.物理性质 粉末、易溶于 。2.应用在食品生产中常用作食品 3.分布自然界中分布广泛。据统计,亚硝酸盐在蔬菜中的平均含量约为 ,咸菜中平均含量在 以上,而豆粉中的平均含量可达 4.对人体的影响膳食中的亚硝酸盐一般不危害人体健康,当人体摄入总量达 时,会引起中毒;当摄入总量达 时
12、,会引起死亡5.我国卫生标准亚硝酸盐残留量在肉制品中不得超过 ,酱腌菜中不超过 ,婴儿奶粉中不得超过 。6.代谢绝大多数亚硝酸盐随 排出,但在特定条件下,即适宜的 和一定的 作用,会转变成致癌物质- 三泡菜腌制过程1.泡菜坛的选择(1)应选用火候好、无砂眼、 、坛沿深、 好的泡菜坛(2)检查时可将坛口 压入水中,看坛内有无 现象2.腌制(1)过程:将清水和盐以 的质量比例配制盐水。将盐水 后备用。将蔬菜装至 时加入香辛料,装至 时,加入盐水,要使盐水 盖好坛盖。将坛盖边沿的水槽中注满水,以保证坛内的 环境(2)条件:控制腌制的时间、温度和食盐的用量。温度 、食盐用量不足 ,腌制时间 ,容易造成
13、细胞大量繁殖, 含量增加四亚硝酸盐的测定1.原理(1)在 条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生 反应后,与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成 色染料。(2)将显色反应后的样品与已知浓度的 进行比较,可以大致 出泡菜中亚硝酸盐的含量2.测定步骤配制溶液 制备样品处理液 思考:亚硝酸盐可转化成致癌物质,为什么在食品生产中还可作为添加剂? 专题2课题1 微生物的实验室培养一基础知识1.培养基(1)培养基的种类包括 培养基和 培养基等。(2)培养基的化学成分一般都含有 、 、 、 四类营养成分,(3)在提供上述几种主要营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物生长对 、 以及 等的要求。例如:培养乳酸杆菌时需要
14、在培养基中添加 ;培养霉菌时需要将培养基的PH调至 ;培养细菌时需要将培养基的PH调至 ;培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件【思考】为什么各种营养基的具体配方不同,但一般都有水、无机盐、碳源和氮源?2.无菌技术(1)获得纯净培养物的关键是 。避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容: (2)消毒是指 灭菌是指 【思考】消毒与灭菌的相同点与区别分别是什么?(3)实验室常用的消毒方法是 ,此外,人们也常使用化学药剂进行消毒,如用 、 等。常用的灭菌方法有 、 、 ,此外,实验室里还用 或 进行消毒。二实验操作1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤: 倒平板【思考】
15、培养基灭菌后,需要冷却到50左右,才能用来倒平板。你用什么方法来估计培养基的温度?为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?平板冷凝后,为什么要将平板倒置?在倒平板的过程中,如果不小心瘵培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?2.纯化大肠杆菌(1)微生物接种的方法中最常用的是 和 。平板划线法是指 。稀释涂布平板法是指 。【思考】为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?在作第二次以及其后的划线操作是赤什么总是从上一次划线的末端开始划线?(3)平板划线法和稀释涂布平板
16、法的优缺点: (4)平板划线法和稀释涂布平板法的适用范围: 1. 菌种的保存为了保持菌种的纯净,需对菌种进行保藏。对于频繁使用的菌种,我们可以采用 法;对于需要长期保存的菌种,可以采用 法。将菌种放在低温环境中保藏的目的是 ,但时间长了菌种还是要老化的,因此对临时保存的菌种 个月后需重新接种【疑难点拨】1生物的营养营养是指生物摄取、利用营养物质的过程。营养物质是指维持机体生命活动,保证发育、生殖所需的外源物质。在人及动物,营养物质包括水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类;在植物,营养物质包括矿质元素、水、二氧化碳等三类;在微生物,则有水、无机盐、碳源、氮源及特殊营养物质五类。2培养基的制
17、作是否合格如果未接种的培养基在恒温箱中保温12天后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。3无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。4平板冷凝后,为什么要将平板倒置?平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。5为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;每次划线前灼烧接
18、种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。专题2课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1尿素只有被 分解成 之后,才能被植物吸收利用。2以土壤中能分解尿素的细菌为研究对象,要达到的两个主要目的是: ; 。3PCR( )是一种在体外将 。此项技术的自动化,要求使用耐高温的DNA聚合酶。思考:怎样找耐高温的酶呢?4实验室中微生物的筛选应用的原理是:人为提供有利于 生长的条件(包括 等
19、),同时抑制或阻止其他微生物生长。5选择培养基是指 。6常用来统计样品中活菌数目的方法是 。即当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的 。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确,一般选择菌落数在 的平板进行计数。另外, 也是测定微生物数量的常用方法。7比较教材中两位同学的操作方法,哪位同学的结果接近真实值?你认为这两位同学的实验需要改进呢?如需要,如何改进?8一般来说,统计的菌落数往往比活菌的实际数目 。这是因为 。因此,统计结果一般用 而不是活菌数来表示。9设置对照实验的主要目的是 ,提高实验结果的可信度。10对照实验是 。1
20、1实验设计包括的内容有: 、 、 和 ,具体的实验步骤以及时间安排等的综合考虑和安排。12不同种类的微生物,往往需要不同的培养 和培养 。在实验过程中,一般每隔24小时统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以 。13无菌操作应注意什么问题? 14在进行多组实验过程中,应注意做好标记,其目的是 。思考:应标记哪些内容?怎样操作更有利于实验的进行?15对所需的微生物进行初步筛选,只是分离纯化菌种的第一步,要对分离的菌种进行一步的鉴定,还需要借助 的方法。思考:有哪些方法可以对菌种进行鉴定?【疑难点拨】1选择培养基选择培养基的含义是:在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生
21、物的生长,促进需要的微生物的生长。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。在培养基中加入某种化学物质可以做到这一点,如加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在培养的培养成分的基础上加入的。培养基中的营养成分的改变也可达到分离微生物的目的。如培养基中缺乏氮源时,可以分离固氮微生物,因为非固氮微生物不能在此培养基上生存。当培养基的某种营养成分为特定化学成分时,也具有分离效果。如石油是唯一碳源时,可以抑制不能利用石油的微生物的生长,使能够利用石油的微生物生存,达到分离能消除石油污染的微生物的目的。改变微生物的培养条件, 也可以达到分离微生物的目的,如将培
22、养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。2如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数?统计某一稀释度下平板上的菌落数,最好能统计3个平板,计算出平板菌落数的平均值,然后按课本旁栏的公式进行计算。3为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度?测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围相同吗?这是因为土壤中各类微生物的数量(单位:株/Kg)是不同的,例如在干旱土壤中的上层样本中:好氧及兼性厌氧型细菌数约为2185万,放线菌数约为477万,霉菌数约为23.1万。因此,为获得不同类型的微生物,就需要按不同的稀释度进行分离,同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。专题2
23、课题3 分解纤维素的微生物的分离一、课题背景分析纤维素是一种由 首尾相连而成的高分子化合物,植物每年产生的纤维素能被土壤中的某些微生物分解利用,是因为它们能产生 。对这些微生物的研究与利用,使人们能够利用秸秆等废弃物生产 ,用 处理服装面料等。二.基础知识:(一)纤维素和纤维素酶阅读课本27页基础知识部分第一、二段,回答下列问题:1、纤维素在生物圈的分布状况?纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中 是自然界中纤维素含量最高的天然产物。2、纤维素酶的组成及作用?纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即 、 和 ,前两种酶使纤维素分解成 ,
24、第三种酶将 分解成葡萄糖。(二)纤维素分解菌的筛选阅读课本课本28页相关部分,回答下列问题:1、纤维素分解菌的筛选方法- ,这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选2、纤维素分解菌的筛选方法的原理刚果红是一种染料,它可以与纤维素形成 ,但并不和 、 发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后刚果红纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解为中心的 。这样我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌三、实验操作分离分解纤维素的微生物实验流程:土壤取样 梯度稀释 。旁栏思考题本实验的流程与课题2中的实验流程有哪些异同?提示:本实验流程与课题2的流程的区别如下。课题2是将土样制成的菌悬液直
25、接涂布在以尿素为惟一氮源的选择性培养基上,直接分离得到菌落。本课题通过选择培养,使纤维素分解菌得到增殖后,再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本一致。(一) 土壤取样采集土样时,应选择富含纤维素的环境。若找不到合适环境,可将滤纸埋在土壤中一个月左右,也会有能分解纤维素的微生物生长。旁栏思考题取样的环境是怎样的,作出这种选择的理由是什么?选择 的环境,如树林中多年落叶形成的腐殖土,多年积累的枯枝败叶等等。根据生物与环境的互相依存关系,在富含纤维素的环境中 的含量相对提高,因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境。旁栏思考题将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸应该埋进土壤多深?提示:
26、将滤纸埋在土壤中能使 ,实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将纸埋于深约 cm左右腐殖土壤中。(二)选择培养1.选择培养的目的:增加 ,以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。2.制备选择培养基:参照课本29页旁栏中的比例配置,回答下列问题:旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基?为什么?是液体培养基,原因是配方中无凝固剂。这个培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有,是如何进行选择的?有选择作用,本配方中的碳源是纤维素,所以能分解纤维素的微生物可以大量繁殖。你能否设计一个对照实验,说明选择培养基的作用用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照。3、选择培养将土样加入装有30ml选择培养基的锥
27、形瓶中,将锥形瓶固定在摇床上,在一定温度下震荡培养12天,直至培养液变浑浊。也可重复选择培养旁栏思考题为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物?提示:在选择培养的条件下,可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖,而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“浓缩”的作用(三)梯度稀释按照课题1的稀释操作方法,将选择培养后的培养基进行等比稀释101107倍。将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上。(四)将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上1.制备培养基:参照课本旁栏中的比例配制。2.倒平板操作。3.涂布平板:将稀释度为104106的菌悬液各取0.1ml涂布到平板培养基上,
28、30倒置培养,菌落周围会出现明显的透明圈。4.挑选产生透明圈的菌落(参照课本刚果红染色法,挑选产生透明圈的菌落,一般即为分解纤维素的菌落。)(五)刚果红染色法方法一:先 ,再加入刚果红进行颜色反应。方法二:在 时就加入刚果红。旁栏思考题这两种方法各有哪些优点与不足?提示:方法一 缺点是操作烦琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂;优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。 方法二 优点是操作简便,不存在菌落混杂问题。缺点一是由于培养基中还含有淀粉类物质,可以使能产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应;缺点二有些微生物具有降解色素的能力,它们在长时间培养过程中会降解刚果红,形成明显的透明圈
29、,与纤维素分解菌不易区分。四、结果分析与评价(一)培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落?设置对照,若对照的培养基在培养过程中无菌落生长则说明培养基制作合格。如果观察到产生透明圈的菌落,则说明可能获得了分解纤维素的微生物。(二)分离的结果是否一致如果不同,分析产生不同结果的原因。五、课题延伸本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选,但是这只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌,还需要进行 的实验,纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的 进行定量的测定。专题3课题1 菊花的组织培养一 植物组织培养的相关概念和基本过程1. 植物组织培养的相关概念(1)细
30、胞分化:植物的个体发育过程中,细胞在_、_和_上都会出现稳定性的差异,形成这些差异的过程就叫做细胞分化。细胞分化是基因_的结果。(2)细胞的全能性:_的植物细胞仍然具有发育成为_的潜能。细胞全能性是组织培养的基本原理。(3)愈伤组织:由离体的植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下经过_过程形成的组织,就叫愈伤组织,愈伤组织的细胞排列疏松而无规则,是一种_的呈无定形状态的_。(4)脱分化:由_的植物组织或细胞产生_的过程,称为脱分化,又叫去分化。(5)再分化:脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成_,这个过程叫做再分化。(6)外植体:用于离体培养的植物器官或组织片段。2. 植物组织培
31、养的基本过程离体的植物组织、器官或细胞组织培养脱分化愈伤组织组织培养再分化根、芽等器官人为使用植物激素控制 移植试管苗完整的植物体二 影响植物组织培养的因素1.内部因素:不同的植物组织,培养的难易程度差别很大。同种植物材料,_ ,_ 等也会影响实验结果。菊花的组织培养,一般选择 _的茎上部新萌生的侧枝。2.外部因素:(1)营养条件 常用的是_ 培养基,其主要成分包括: _,如_;_ ,如_ ;_ 等。(2)植物激素 植物激素中_ 和_ 是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。_、_ 以及_ 等,都会影响实验结果。(3)环境因素 _ 、_ 、 _等条件也能影响植物组织培养。菊花组织培养,一般
32、PH控制在 _ ;温度控制在 _ ;每天用日光灯照射_小时。【思考】(1)MS培养基中,各种营养成分各有什么作用?与微生物培养基的配方相比,有什么不同?(2)生长素使用的先后顺序、用量比例不同分别会造成哪些影响?三、实验操作过程1.制备MS固体培养基实验室一般使用4保存的配制好的培养基母液来制备(1)配制各种母液。配制母液时,大量元素浓缩_ ,微量元素浓缩_ 。常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照1mg/ml的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量。(2)配制培养基。配制1LMS培养基时,将称量好的琼脂加入800mL蒸馏水,加热熔化,
33、然后加入蔗糖30g,依次加入母液,定容至1000mL。_,然后分装到锥形瓶中,每瓶分装_。(3)灭菌。高压蒸汽灭菌2、外植体消毒选取菊花茎段时,要取 _。无菌技术包括培养基消毒灭菌和植物材料(外植体)的消毒灭菌。对培养材料进行表面灭菌时,一方面要考虑_;另一方面还要考虑植物材料的_。不同药剂、不同植物材料,甚至不同器官要区别对待。一般情况下,细菌污染可能是由接种人员造成的,真菌污染可能是_灭菌不当。过程:流水冲洗软刷刷洗流水冲洗过程流水冲洗软刷刷洗流水冲洗_无菌吸水纸吸干外植体表面体积分数为_的酒精中摇动23次,持续_无菌水清洗无菌吸水纸吸干外植体表面质量分数为0.1的_溶液中12min无菌水
34、中至少清洗3次3、接种接种前,用体积分数70%的酒精将工作台擦拭,然后点燃酒精灯。所有的接种操作必须在酒精灯旁进行,并且每次使用器械后,都要用火焰灼烧灭菌4、培养接种后的锥形瓶最好放在_中培养。培养期间定期消毒,温度控制在18-22,并且每天用日光灯光照12h5、移栽6、栽培附:一般来说,容易进行_的植物,也容易进行组织培养。【思考】:实验操作过程中为什么要进行一系列的消毒、灭菌,实验中是如何做到无菌操作的?【知识补充】1. 无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键植物组织培养不同于扦插、分根、叶插等常规无性繁殖。由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,所以对培养条件的要求较高,对无菌
35、操作的要求非常严格。无菌技术包括培养基消毒灭菌和植物材料(外植体)的消毒灭菌。对培养材料进行表面灭菌时,一方面要考虑药剂的消毒效果;另一方面还要考虑植物材料的耐受能力。不同药剂、不同植物材料,甚至不同器官要区别对待。2.妥善处理被污染的培养物即使对于有经验的操作人员,操作后出现培养物被污染的情况也常有。一般情况下,细菌污染可能是由接种人员造成的,如未戴口罩,接种时说话,或手及器械消毒不严等。真菌污染可能是植物材料灭菌不当。3.你能说出各种营养物质的作用吗?同专题2中微生物培养基的配方相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同?微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐;蔗糖提供碳源,同时能够
36、维持细胞的渗透压;甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,MS培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。3. 植物组织培养技术的应用植物组织培养技术的应用范围是很广的,除了快速繁殖、培育无病毒植物外,还可以通过大规模的植物细胞培养来生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂等。例如,从大量培养的紫草愈伤组织中提取的紫草素,是制造治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料。用植物组织培养的方法,诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构,包裹上人造
37、种皮,制成人工种子,可以解决有些作物品种繁殖能力差,结子困难或发芽率低等问题。此外,转基因植物的培育,也要用到植物组织培养的方法。专题3课题2 月季的花药培养一被子植物花粉发育过程1被子植物的花粉是在 中由 经过 分裂形成的。所以,花粉是 的生殖细胞。2结合教材内容填下列示意图:小孢子母细胞(2n)( )时期(n)单核( )期(n)双核期( )细胞核(n)( )细胞核(n)( )细胞(n)( )细胞(n)( )个精子(n)( )分裂( )分裂单核( )期(n)( )分裂思考1由此可见,被子植物的花粉的发育要经历 时期, 期和 期等阶段。思考2在正常情况下,一个小孢子母细胞可以产生 个精子;在一
38、枚花药中可以产生 个花粉。二产生花粉植株的两条途径1产生花粉植株(即单倍体植株)的两种途径:一是花粉通过 阶段发育为植株,二是通过 阶段发育为植株。这两种途径的区别主要取决于培养基中 的种类及其 的配比。2填写培育花粉植株的途径图解:( )花药中的花粉( )( )( 胚状体 )( 愈伤组织 )( )丛芽生根移栽3胚状体的结构及其发育过程与种子相似,所以把胚状体到从芽的过程称为 ,而把从愈伤组织到从芽的过程称为 。4.植物体细胞发育而来的胚状体又叫 ,花粉发育而来的胚状体叫 ,可发育为 植物,要使其成为纯合的正常植株,可用 处理发育中的幼苗。三影响花药培养的因素1影响花粉植株成功与否和成功率的主
39、要因素: 和 等。2材料的选择:从花药来看,应当选择(初花期、盛花期、晚花期)的花药;从花粉来看,应当选择(四分体期、单核期、双核期、萌发期)的花粉,因为单核期以前的花药 ,选择单核期以后的花药接种, 。;从花蕾来看,应当选择(完全未开放、略微开放、完全盛开)的花蕾。思考3除此之外,你认为影响花粉诱导成功率的因素还有哪些?植物的种类、亲本生长条件、材料的低温处理、接种密度、培养基组成、培养的环境条件等。思考4为什么花瓣松动会给材料消毒带来困难? 花瓣松动后,微生物就可能已经侵入到花药,给材料消毒带来困难。四实验设计1.材料的选择选择花药时一般通过 确定花粉发育时期,此时需要对花粉细胞核进行染色,最常用的染色剂是 和 ,它们分别可以将细胞核染成 色和 色。2.材料的消毒花蕾(无菌水)清洗(无菌吸水纸)吸干水分(无菌水)冲洗3.接种和培养(1)剥取花药:消毒后的花蕾,要在 条件下除去花萼、花瓣。在剥离花药时,要尽量不损伤花药,否则 还要彻底除去
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