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文档简介

1、实验六实验六 酵母菌细胞酵母菌细胞的形状察看、死活细胞的形状察看、死活细胞的鉴别的鉴别一、目的和要求一、目的和要求 n1 1察看酵母菌的出芽繁衍方式,学习区察看酵母菌的出芽繁衍方式,学习区分酵母菌死活细胞的实验方法。分酵母菌死活细胞的实验方法。n2 2掌握酵母菌的普通形状特征及其与细掌握酵母菌的普通形状特征及其与细菌的区别。菌的区别。 二、根本原理二、根本原理 n1 1形状察看:酵母菌是不运动的单细胞真形状察看:酵母菌是不运动的单细胞真核微生物,通常比常见细胞大几倍甚至十核微生物,通常比常见细胞大几倍甚至十几倍。大多数酵母菌以出芽方式进展无性几倍。大多数酵母菌以出芽方式进展无性繁衍,有的分裂繁

2、衍;有性繁衍是经过接繁衍,有的分裂繁衍;有性繁衍是经过接合产生子囊孢子。合产生子囊孢子。n2 2死活鉴定:美蓝是一种无毒性的染料,死活鉴定:美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,复原型呈无色。用美它的氧化型呈蓝色,复原型呈无色。用美蓝对酵母的活细胞进展染色时,由于细胞蓝对酵母的活细胞进展染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的复原的新陈代谢作用,细胞内具有较强的复原才干,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色才干,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的复原型。因此,具有复原才干的酵母活的复原型。因此,具有复原才干的酵母活细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的衰

3、老细胞那么成蓝色或淡蓝色。的衰老细胞那么成蓝色或淡蓝色。啤酒酵母酵母出芽酵母出芽酵母菌出芽繁衍及芽体三、器材三、器材 n1 1、染液:吕氏碱性美蓝染液、染液:吕氏碱性美蓝染液n2 2、菌种:酿酒酵母的斜面培育物、菌种:酿酒酵母的斜面培育物n3 3、仪器和其他器具:、仪器和其他器具: 显微镜、载玻片、显微镜、载玻片、盖玻片等盖玻片等四、操作步骤四、操作步骤 n1 1、美蓝浸片的察看:、美蓝浸片的察看:n 1 1在载玻片中央加一滴在载玻片中央加一滴0.1%0.1%吕氏碱性美吕氏碱性美蓝染色液,然后按无菌操作用接种环挑取蓝染色液,然后按无菌操作用接种环挑取少量少量酵母菌苔放在染液中,混合均匀。少量少

4、量酵母菌苔放在染液中,混合均匀。染液不宜过多或过少,否那么在盖上盖玻染液不宜过多或过少,否那么在盖上盖玻片时菌液会溢出或出现大量气泡而影响察片时菌液会溢出或出现大量气泡而影响察看。看。n 2 2用镊子取一块盖玻片,先将一边与菌用镊子取一块盖玻片,先将一边与菌液接触,然后渐渐将盖玻片放下使其盖在液接触,然后渐渐将盖玻片放下使其盖在菌液上。盖玻片不宜平放着放下,以免产菌液上。盖玻片不宜平放着放下,以免产生气泡影响察看。生气泡影响察看。3 3将制片放置约将制片放置约3min3min后镜检,先用低倍镜然后镜检,先用低倍镜然后用高倍镜察看酵母的形状和出芽情况,并后用高倍镜察看酵母的形状和出芽情况,并据颜

5、色来区别死活细胞。据颜色来区别死活细胞。4 4染色约染色约0.5h0.5h后再次进展察看,留意死活细后再次进展察看,留意死活细胞数量能否添加。胞数量能否添加。5 5用用0.05%0.05%吕氏碱性美蓝染液反复上述操作。吕氏碱性美蓝染液反复上述操作。n2 2、水、水- -碘液浸片的察看碘液浸片的察看n 在载玻片中央加一小滴革兰氏染色用碘在载玻片中央加一小滴革兰氏染色用碘液,然后在其上加三滴水,取少量酵母菌液,然后在其上加三滴水,取少量酵母菌苔放在水苔放在水- -碘液中混匀,盖上盖玻片镜检。碘液中混匀,盖上盖玻片镜检。五、实验报告五、实验报告 n1 1、绘图阐明所察看的酵母菌的形状特征。、绘图阐明所察看的酵母菌的形状特征。n 酵母死活细胞的对比酵母死活细胞的对比六、思索题n1 1吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同,对酵母菌死细胞数量有何影响?试不同

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