肠道原虫检查方法与形态鉴别

1、肠道原虫检查方法与形态鉴别第一页，共52页常见的肠道原虫主要种类阿米巴溶组织内阿米巴原虫迪斯帕内阿米巴结肠内阿米巴哈氏内阿米巴布氏嗜碘阿米巴微小内蜒阿米巴波列基内（波氏）阿米巴鞭毛虫蓝氏贾第鞭毛虫脆弱双核阿米巴人毛滴虫孢子虫隐孢子虫人芽囊原虫纤毛虫结肠小袋纤毛虫常见的肠道原虫主要种类第二页，共52页 一、检查方法一、检查方法 常用的有常用的有生理盐水直接涂片、碘液染色生理盐水直接涂片、碘液染色和铁苏和铁苏木素染色、三色酸染色法、固定染色、抗酸染色木素染色、三色酸染色法、固定染色、抗酸染色法及培养法等。法及培养法等。 （一）实验器材（一）实验器材 显微镜（显微镜（10104040）、）、 显微镜

2、测微尺、玻显微镜测微尺、玻片、盖玻片、竹签片、盖玻片、竹签 、 记号笔等。记号笔等。 第三页，共52页（二）实验试剂（二）实验试剂 1 1、0.85%0.85%盐水盐水 NaCl 0.85g NaCl 0.85g 蒸馏水加至蒸馏水加至100ml100ml 2 2、卢戈氏碘液、卢戈氏碘液 碘化钾碘化钾6.0g, 6.0g, 碘碘4.0g 4.0g 蒸馏水至蒸馏水至100ml100ml （先用（先用30ml30ml左右蒸馏水溶解碘化钾，再加入碘混匀左右蒸馏水溶解碘化钾，再加入碘混匀溶解后加蒸馏水至溶解后加蒸馏水至100ml100ml，充分混匀后储存于棕色瓶，充分混匀后储存于棕色瓶中）中） 第四页，

3、共52页（三）操作步（三）操作步 u直接涂片法直接涂片法（用于滋养体检测（用于滋养体检测）l标本采集自然排出、无尿液掺混的新鲜粪便（注意保温);l取预温洁净载物玻片一张，加滴37预温的生理盐水1滴2滴;l在保温条件下，用竹签挑取粪便标本可疑部分（如有粘液、血液应尽可能采取粘液、血液部分），在盐水中涂抹成直径为1cm粪便薄膜，厚度以透过粪便薄膜能看清字为宜;l盖上盖玻片，置显微镜下观察有无活动的滋养体.第五页，共52页u碘液玻片法碘液玻片法（用于包囊检测）（用于包囊检测）l涂片时用碘液代替生理盐水，制法及注意事项同直接涂片法;l盖上盖玻片，显微镜下观察包囊。 注意事项l涂片的厚度以看清报纸上的字

4、迹为度，太薄易漏查，太厚难以观察;l因为虫体大小在鉴定上是重要的依据，因此显微镜必须装备有目镜测微器。第六页，共52页二、病原形态鉴别二、病原形态鉴别 原虫是由单一细胞构成，属于单细胞真核动物，它所有的生命活动都是在细胞内完成的。（一）基本结构（一）基本结构主要有表膜、细胞质和细胞核 1、表膜：包在虫体表面，可保持虫体的完整性，并参与虫体摄食、排泄、感觉、运动等生理活动，具有很强的抗原性。 第七页，共52页2、细胞质细胞质： 多数原虫分内质与外质两部分（1 1）内质）内质：呈细颗粒状，占细胞质的大部分，内含细胞核、食物泡、伸缩泡等。（2 2）外质）外质：分布在虫体表层，透明或有微细颗粒，运动细

5、胞器是由外质形成。伪足伪足：是肉足亚门原虫所特有的临时性运动器，为外质的暂时性突出部分，常见为叶状，偶可见树根状或网状。鞭毛鞭毛：是鞭毛虫纲原虫的运动细胞器官，为外质底下的毛基体发出的细胞质丝状延伸部分，鞭毛数目因虫种而异。纤毛纤毛：是纤毛虫纲原虫的运动细胞器，结构与鞭毛基本相似，也是从基体发出，但数量多，短而尖细。波动膜波动膜：是毛滴虫的运动细胞器。 第八页，共52页3、细胞核细胞核细胞核在内质中，与原虫的生长、繁殖有关，是原虫分类鉴别的重要依据。分两种类型：l泡状核：圆、椭圆或相类似型状。核染色质颗粒量少，分布不均，在碱性染料下着色很浅，呈现为泡状核。阿米巴、鞭毛虫及纤毛虫的小核均属此型。

6、l实质核：形状多样，常见有椭圆形、肾形或马蹄形，核染色质颗粒量多。纤毛虫的大核属此型。第九页，共52页 阿米巴滋养体示意图阿米巴滋养体示意图第十页，共52页 内质内质外质外质内外质不明显，仅在伪足内外质不明显，仅在伪足伸出时，才可可见外质伸出时，才可可见外质第十一页，共52页 阿米巴包囊示意图阿米巴包囊示意图第十二页，共52页 纤毛虫滋养体示意图纤毛虫滋养体示意图肾形，核染肾形，核染色质颗粒多色质颗粒多第十三页，共52页 鞭毛虫滋养体示意图鞭毛虫滋养体示意图第十四页，共52页（二）鉴别要点（二）鉴别要点 1 1、大小、大小： 最小直径仅2m，大可达200m 第十五页，共52页 2 2、运动、运

7、动运动形式 伪足、鞭毛、纤毛运动速度 活泼或缓慢运动方向 定向或不定向 3 3、细胞核、细胞核核数量、形状、位置核膜厚、薄核仁大小、形状、位置 4 4、细胞质、细胞质滋养体界细胞质线是否明显，颗粒细密或粗大；浆内有无吞噬的红细胞。包囊 囊壁厚、薄，折光度，细胞质有无纤丝状排列、糖元块和拟染色体。 第十六页，共52页 （三）常见肠道原虫的形态特征（三）常见肠道原虫的形态特征 1 1、溶组织内阿米巴、溶组织内阿米巴 阿米巴痢疾和阿米巴结肠炎的病原体，寄生在结肠内;可侵犯肝、肺、脑等器官，引起肠外感染;生活史发育阶段为：包囊期和滋养体期。 第十七页，共52页 （1 1）滋养体滋养体 溶组织内阿米巴滋

8、养体具有侵袭性，随时可吞噬RBC；虫体大小在1060m之间，胞浆分为内外两层，外浆透明而均匀、折光强，内浆呈细颗粒状，当外浆伸出形成伪足作定向运动时，内浆颗粒即涌入伪足内，使虫体前进。虫体形态多变，运动活跃，在新鲜脓血便和阿米巴肝脓肿穿刺液中，滋养体可以每秒5微米的速度活泼运动。第十八页，共52页第十九页，共52页第二十页，共52页第二十一页，共52页 （2 2）包囊：）包囊：直径1020m，囊壁光滑，透明、折光性强、不着色，厚约0.5m，包囊内含14个核，成熟包囊内常见1个或多个两端钝圆的长棒状拟染色体。第二十二页，共52页 1个核包囊个核包囊 3个核包囊个核包囊2个核包囊个核包囊第二十三页

9、，共52页 2 2、结肠内阿米巴、结肠内阿米巴 结肠内阿米巴是非致病性阿米巴，也可引起腹泻，主要寄生在人体盲肠和结肠，常与溶组织阿米巴共存，是肠道最常见的共栖原虫。 滋养体：直径15 50m，运动迟缓，无定向，内外质界限不明显，仅在伪足形成时才能看见外质，内质呈颗粒状，内含1个细胞核和许多食物泡，食物泡中含有细菌，不含红细胞。核仁较大，常偏位。包囊：球形，较溶组织阿米巴大，直径10 30m，1 8个细胞核，偶见成熟包囊超过8个核，细胞质颗粒状，未成熟包囊常有较大的深棕色的糖原泡，位于核周围。拟染色体常不清晰，似碎片或草束状，两端尖细。第二十四页，共52页第二十五页，共52页 结肠阿米巴（未染色

10、）结肠阿米巴（未染色）碘染色碘染色第二十六页，共52页 结肠内阿米巴包囊结肠内阿米巴包囊 第二十七页，共52页 测微尺测量包囊大小测微尺测量包囊大小第二十八页，共52页 3 3、微小内蜓阿米巴、微小内蜓阿米巴 微小内蜓阿米巴是最常见的小型阿米巴，滋养体寄生在大肠，在大肠中成囊，成熟包囊污染食物和水源，偶可引起腹泻。（1）滋养体：直径6 15m，一般小于10m，内外浆不明显，伪足透明，短而钝，运动缓慢，不定向，核膜与核仁间有核丝连接，核仁大而不规则，位于中心或偏位，（2）包囊：卵圆形，5 14m，囊壁有折光，1 4个细胞核，集中在包囊一端，核仁大，常偏于一侧。偶见小而弯曲的拟染色体。第二十九页，

11、共52页碘液染色碘液染色铁苏木素染色铁苏木素染色第三十页，共52页 4 4、布氏嗜碘阿米巴、布氏嗜碘阿米巴布氏嗜碘阿米巴是以包囊中独居特征的糖原泡而命名，人猪均可感染，是猪最常见的阿米巴。滋养体寄生在大肠，主要通过粪便排出的包囊传播。（1）滋养体形态不一，直径8 20m，细胞核较大，核仁约占直径的1/2，位于核中央，伪足宽大，不吞噬红细胞。细胞质内有1 2个糖原泡，为鉴定的重要特征。（2）包囊直径5 20m，囊壁折光性强，成熟包囊仅1个核，核仁位于核的一端，包囊中无拟染色体，但有1个大而明显的糖原泡，碘染色后，糖原泡呈红棕色团块。 第三十一页，共52页布氏嗜碘阿米巴包囊第三十二页，共52页第三

12、十三页，共52页第三十四页，共52页 寄生人体肠道的阿米巴滋养体鉴别特征寄生人体肠道的阿米巴滋养体鉴别特征 虫虫 种种 大大 小小( (m) m) 伪足与运动伪足与运动 细胞核细胞核 内含物内含物 溶组织内溶组织内 大大: 20: 2060 60 内外质分明内外质分明, ,伪足指伪足指 一个一个, ,不明显不明显, ,染色染色 大滋养体大滋养体: : 红细胞红细胞 阿米巴阿米巴 小小: 12: 1230 30 形或舌形形或舌形, ,形成快形成快, , 后可见后可见, ,细胞核小细胞核小 小滋养体小滋养体: : 细菌细菌 * * 12 12 1515 运动活泼，定向。运动活泼，定向。 位于中央。

13、位于中央。 很少有空泡很少有空泡 。 哈门氏内哈门氏内 5 512 12 内外质分明内外质分明, ,伪足指伪足指 一个，较小一个，较小, ,多位多位 细菌细菌阿米巴阿米巴 * * 1 1 8 8 状形成慢状形成慢, ,运动缓慢运动缓慢 于中央。于中央。 定向。定向。结肠内结肠内 202050 50 内外质不明显内外质不明显, ,伪足伪足 一个一个, ,易见，染色易见，染色 细菌、酵母菌和粪细菌、酵母菌和粪阿米巴阿米巴 * * 20 20 2525 足短、钝足短、钝, ,不透明不透明, , 后可见细胞核大后可见细胞核大, , 渣等；空泡较多。渣等；空泡较多。 形成较慢形成较慢; ;运动缓慢运动缓

14、慢, , 偏一侧偏一侧 。 无方向性。无方向性。布氏嗜碘布氏嗜碘 8 820 20 内外质不明显内外质不明显; ;伪足伪足 一个一个, ,不明显不明显, ,染色染色 细菌、酵母菌和细菌、酵母菌和阿米巴阿米巴 * * 12 12 1515 宽大透明宽大透明, ,形成缓慢形成缓慢 后可见细胞核小后可见细胞核小, ,位位 粪渣等粪渣等; ;有空有空 泡泡 无方向性。无方向性。 于中央。于中央。 微小内蜒微小内蜒 6 612 12 内外质不明显内外质不明显; ;伪足伪足 一个一个, ,不明显不明显, ,染色染色 细菌，有空泡。细菌，有空泡。阿米巴阿米巴 * * 8 8 1010 钝圆、透明钝圆、透明,

15、 ,形成较形成较 后可见细胞核小后可见细胞核小, ,位位 慢，运动缓慢慢，运动缓慢, ,无方无方 于中央。于中央。 向性。向性。 第三十五页，共52页 寄生人体肠道的阿米巴包囊鉴别特征（碘染色）寄生人体肠道的阿米巴包囊鉴别特征（碘染色）虫种虫种 大大 小小(m) (m) 形形 态态 细胞核细胞核 糖原块糖原块 拟染色体拟染色体溶组织内溶组织内 101020 20 圆形，折光性强，圆形，折光性强， 1 14 4个，清楚个，清楚 不明显，呈弥不明显，呈弥 不着色，两不着色，两阿米巴阿米巴 * * 1215 囊壁薄、透明。囊壁薄、透明。 核仁居中。核仁居中。 散状，红棕色散状，红棕色 端钝圆棒状端钝

16、圆棒状 中央着色较深中央着色较深 哈门氏内哈门氏内 5 510 10 圆或椭圆形圆或椭圆形, 1, 14 4个，染色后个，染色后 弥散状，棕色弥散状，棕色 短棒状、碎短棒状、碎阿米巴阿米巴 * * 68 可见核仁，其占可见核仁，其占 粒状，折光粒状，折光 比例较溶组织阿比例较溶组织阿 性强性强 米巴大。米巴大。 结肠内结肠内 101030 30 圆形，折光强，圆形，折光强， 1 18 8个个, , 核仁大核仁大 未成熟包囊明未成熟包囊明 折光性强折光性强阿米巴阿米巴* * 1 1525 囊壁厚囊壁厚 多偏位。多偏位。 显块状，红棕显块状，红棕 呈白色。呈白色。 色。色。微小内蜒微小内蜒 5 5

17、10 10 椭圆或长圆形，椭圆或长圆形， 1 14 4个个, ,多数多数4 4个，早期偶有，个，早期偶有， 少见，偶少见，偶 阿米巴阿米巴 * * 6 6 8 8 折光强，囊壁薄。折光强，囊壁薄。 很小。很小。 淡棕色，弥散淡棕色，弥散 有呈小点有呈小点 状。状。 或小棒状或小棒状布氏嗜碘布氏嗜碘 5 520 20 圆、卵圆、三角圆、卵圆、三角 1 1个，偶有个，偶有2 2个，个， 大而明显，棕色大而明显，棕色 无无阿米巴阿米巴* * 101012 12 形等，囊壁厚形等，囊壁厚 核仁大核仁大, ,偏一侧。偏一侧。 或红棕色。或红棕色。 第三十六页，共52页5 5、蓝氏贾第鞭毛虫、蓝氏贾第鞭毛

18、虫寄生人体小肠、胆囊主要在十二指肠，可引起腹痛、腹泻和吸收不良等症状，粪便呈水样、量大、恶息、一般无脓血。分布于世界各地，在旅游者中发病率较高，故又称旅游者腹泻。生活史有滋养体和包囊两个阶段，在粪便中均可查见。第三十七页，共52页5 5、蓝氏贾第鞭毛虫、蓝氏贾第鞭毛虫 （1）滋养体滋养体：形似半个倒梨形，前段钝圆，后端尖细，长：921m，宽515m，厚24m。腹面扁平，背面隆起，胞浆呈颗粒状，腹面前半部至3/4处凹陷形成左右2个大吸盘，一对椭圆形的核位于吸盘中央，虫体有两条轴索和4对鞭毛。 第三十八页，共52页第三十九页，共52页 （2 2）包囊）包囊椭圆形，大小812710m；囊壁较厚，折光

19、性强，细胞质收缩形成双层壁，与细胞间有明显间隙，可见2-4个细胞核，多偏于一端。囊内可见鞭毛残体、丝状物及轴柱等，碘染色后呈棕黄色。第四十页，共52页 6 6、 结肠小袋纤毛虫结肠小袋纤毛虫结肠小袋纤毛虫是人体最大的寄生原虫，寄生宿主广泛，通常认为猪是人体感染的主要传染源。主要寄生于宿主结肠，引起痢疾。（1 1）滋养体）滋养体椭圆形，前端略尖，后端较钝，虫体甚大，大小5020030 100m，周身有纤毛，呈斜纵排列，能前后运动。胞浆内有2个细胞核，大核呈肾形，小核呈球形（一般不易见），新鲜粪便可见虫体前、后端各有一个伸缩泡。（2 2）包囊）包囊圆或卵圆形，直径40 60m，囊壁厚而透明，呈双层

20、内有核和伸缩泡各1个。新鲜包囊可见囊内有活动的滋养体。寄生人体的滋养体很少转变为包囊，包囊主要在猪肠内形成。第四十一页，共52页 结肠小袋纤毛虫滋养体、包囊结肠小袋纤毛虫滋养体、包囊伸缩泡伸缩泡大核大核食物泡食物泡第四十二页，共52页 包囊包囊 滋养体滋养体第四十三页，共52页第四十四页，共52页7.7.人芽囊原虫人芽囊原虫人芽囊原虫广泛分布于世界各地。该虫是寄生在高等灵长类和人类肠道内可致病的原虫。人芽囊原虫可侵入肠粘膜上皮。临床表现轻重不一，带虫者可高达44.12%。感染重者可有消化道症状，如腹泻、腹胀、厌食、恶心、呕吐，甚至出现发烧寒战等。免疫功能正常的患者多数为自限性。艾滋病患者容易感染人芽囊原虫，而且症状严重，治疗十分困难。预防应加强卫生宣传教育，注意个人卫生和饮食卫生；粪便无害化处理，保护