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1、专题 4、5 DNA 和蛋白质技术、植物有效成分的提取1. (2017 年河南南阳三模)请回答下列与实验室提取芳香油有关的问题:(1) 植物芳香油的提取可采用的方法有压榨法、 _ 和_。(2) 橘子果实含有芳香油,通常可用 _作为材料提取芳香油,而且提取时往往选用新鲜的材料,理由是 _ 。(3) 得到的乳状液加入 NaCI 并放置一段时间后,芳香油将分布于液体的 _ 层,加入NaCI 的作用 是_。(4) 从乳状液中分离得到的芳香油中要加入无水Na2SO,其作用是_。2. (2017 年重庆巴蜀三诊)“树橘柚者,食之则甘,嗅之则香。”橘子全身都是宝:不 仅果肉的营养价值高,药用价值更高,其皮、
2、核、络、叶都是“地道药材”。请回答下列问 题:(1) 橘皮精油是一种广谱性的杀虫剂,具有很高的经济价值,常采用_ 法提取橘皮精油。若采取水中蒸馏法提取,橘皮精油的有效成分会发生_ 和产生_ 的问题。(2) 下图是提取橘皮精油的实验流程示意图:石灰水浸泡T漂洗T压榨T过滤T静置T再次过滤T 橘皮油图中过程处理的作用是 _;过程一般加入相当于橘皮质量 0.25%的 NaHCO 和 5%勺 NstSQ,其目的是 _。(3) 若想利用橘子生产果醋需要用到醋酸菌,醋酸菌的最适生长温度为_ ,当_ 都充足时,醋酸菌可将柑橘汁中的糖分解成醋酸。3下图为“ DNA 的粗提取与鉴定”实验的相关操作。(1)_ 图
3、中实验材料 A 可以是_ 等,研磨前加入的 B 应该是_。通过上述所示步骤得到滤液C 后, 再向滤液中加入 2 mol/L 的 NaCI 溶液的目的是2_ ,再过滤得到滤液 D,向滤液 D 中加入蒸馏水的目的是 _。(3)在“ DNA 的粗提取与鉴定”实验中, 将含有一定杂质的 DNA 丝状物分别放入体积为 2 mL的 4 种溶液中,经搅拌后过滤,获得下表所示的 4 种滤液,含 DNA 最少的是滤液_。1研磨液中搅拌研磨后过滤滤液 E22 mol/L 的 NaCI 溶液中搅拌后过滤滤液 F30.14 mol/L 的 NaCI 溶液中搅拌后过滤滤液 G4冷却的 95%的酒精溶液中搅拌后过滤滤液
4、HDNA鉴定的原理是4下列是有关血红蛋白的提取与分离的问题,请回答下列问题:人们用鸡的红细胞提取 DNA,用人的红细胞提取血红蛋白,其原因是(2)_ 凝胶色谱法是根据分离蛋白质的有效方法。所用的凝胶实际上是一些(3) 蛋白质的提取和分离实验中,首先要用 _(填写溶液名称)洗涤红细胞,其目的是去除_。(4) 在_和甲苯的作用下,红细胞破裂,释放出血红蛋白。用 _ 法可分离出血红蛋白。(5) 取血红蛋白溶液装入透析袋,再将透析袋放入pH 为 7.0 的_中,透析12 h。5胡萝卜素是一种常用的食用色素,可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得,流程如下:胡妙卜-淀粉亠 I:燥/(1) 筛选
5、产胡萝卜素的酵母菌 R 时,可选用 _ 或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环,其目的是 _。(2) 培养酵母菌 R 时,培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R 的生长提供 _和_。(3) 从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程应控制好温度和 _,以防止胡萝卜素分解;萃取过程中宜采用 _ 方式加热以防止温度过高;萃取液浓缩前需进行过滤,其目的是_(4) 纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为专题 4、5 DNA 和蛋白质技术、植物有效成分的提取1.(1)蒸馏法 萃取法(2) 橘子皮芳香油含量较高(3) 上增加水层密度使油和水分层3吸收芳香油中残留的水分解
6、析: (1) 根据植物原料的特点,植物芳香油的提取方法有压榨法、萃取法和蒸馏法。(2) 橘皮精油主要储藏在橘皮部分, 所以可从橘子皮中提取到芳香油。 所用的橘子皮越新鲜, 芳香油的含量也越高,所以提取橘皮精油时要选用新鲜的橘子皮。 (3) 压榨材料后可得到糊 状液体,此时需过滤除去其中的固体物, 进而获得乳状液,由于芳香油的密度比水层小,所 以芳香油分布于液体的上层; 加入 NaCl 可以增加水层密度使油和水分层。 (4) 分离的油层还 会含有一定的水分,一般可以加入一些无水Na2SO4吸水,放置过夜,再过滤除去固体Na2SO4就可得到芳香油。2 (1) 压榨 部分水解 原料焦糊(2) 破坏细
7、胞结构,分解果胶,防止橘皮压榨时滑脱,提高出油率 使橘皮精油易于与 水分离(3)3035C氧气和糖源解析: (1) 由于橘皮精油的有效成分在水中蒸馏过程中会发生部分水解, 同时水中蒸馏 会导致原料焦糊问题,因此一般采用压榨法提取橘皮精油。 (2) 图中过程是将干燥去水的 橘皮用石灰水浸泡,该处理的作用是:破坏细胞结构,分解果胶,防止橘皮压榨时滑脱,提 高出油率。过程为压榨,在压榨过程中一般加入相当于橘皮质量0.25%的 NaHCO 小苏打)和 5%的 NatSQ(无水硫酸钠),并将 pH 调至 78,其目的是使橘皮精油易于与水分离。(3)醋酸菌的最适生长温度为 3035C,当氧气和糖源都充足时
8、,醋酸菌可将柑橘汁中的糖分 解成醋酸。3(1) 洋葱(菜花等) 洗涤剂和食盐使 DNA 溶解 使 DNA 析出(3)H(4)在沸水浴条件下,DNA 与二苯胺反应呈蓝色解析:选用洋葱、菜花等植物材料提取 DNA 时,要在切碎的材料中加入一定量的洗涤剂 和食盐,进行充分的搅拌和研磨;DNA 在 2 mol/L 的 NaCl 溶液中的溶解度较高,而在0.14mol/L 的 NaCl 溶液中的溶解度最小。向滤液中加入2 mol/L 的 NaCl 溶液可以使 DNA 溶解,过滤除去不溶的杂质。向滤液中加入蒸馏水可降低NaCl 溶液的浓度,使 DNA 析出,除去溶解在低盐溶液中的杂质;DNA 不溶于冷酒精
9、,可利用这一原理进一步提纯DNA 鉴定 DNA 的原理是在沸水浴的条件下,DNA 与二苯胺反应呈蓝色。4.(1)鸡红细胞具有细胞核,含有 DNA 适合用于提取 DNA人红细胞无细胞核,且血 红蛋白含量丰富,适合用于提取血红蛋白(2) 相对分子质量的大小 微小的多孔球体(3) 生理盐水 杂蛋白 (4) 蒸馏水 离心(5)( 磷酸)缓冲液解析:(1)鸡的红细胞有细胞核, 含 DNA 丰富;人的红细胞无细胞核,含血红蛋白丰富。(2) 凝胶色谱法的凝胶是多孔球体,蛋白质分子小的能通过凝胶颗粒内部而滞留,蛋白质分 子大的排阻在外,迅速通过。 (3) 蛋白质的提取和分离实验中,首先要用生理盐水洗涤红细 胞,去除杂蛋白。 (4) 红细胞吸水涨破后, 离心分离出血红蛋白。 (5) 透析时要将透析袋放入 pH 为 7.0 的磷酸缓冲液中。5. (1) 稀释涂布平板法 灭菌 ( 或防止杂菌污染 )(2) 碳源 氮源 (3) 时间 水浴 滤去不溶物(4) ( 实验)对照解析: (1) 接种微生物的方法主要是稀释涂布平板法和平板划线法;为了避免杂菌
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