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文档简介

1、人血白蛋白中辛酸钠含量测定气相色谱法1 试剂1.1氯仿（A.R）1.2辛酸（CP 标准液用氯仿配成 10mg/ml 溶液。1.3庚酸（CP 内示液用氯仿酸成 10mg/ml 溶液。1.41.5mol/L 高氯酸溶液2 仪器2.1带有积分仪及氢火焰检测器的气相色谱仪。2.2色谱柱色谱柱为内径 3mm 长 2m 的玻璃柱，内装涂有 10 燃乙二醇（20M 固定液的 ChromsorbVV 担体。2.3仪器工作条件气化室温度 230C,柱温 190C，载气（纯氮）流速 40ml/分钟；样品，标准液注入量为 2 卩 l2.4振荡器3 操作3.1标准曲线的绘制取 1.2 项的辛酸标准液各 10、20、3

2、0、40 及 50 卩 I，分别与 30 卩 I.3 项的庚酸内标液和 4ml 的氯仿组成 5 个标准管，混合 均匀后，在通风橱中将氯仿挥发至干，然后定量加入 0.1ml 氯仿溶解残渣，上机测定。典型的色谱图中内标庚酸的保留值为9 分钟左右，辛酸的保留值为 13 分钟左右。分别以自动积分仪显示 的各管样品的辛酸和内标庚酸的峰面积之比，对各管中所含辛酸加入量进行回归统计，也可得到回归方程。3.2样品测定步骤取已知蛋白浓度样品，用蒸馏水稀释至5 癥白浓度，然后准确取 0.5ml，加入庚酸内标液 30 卩 I , 1.5mol /L 高氯酸 0.2ml ,在振荡器上混合均匀，然后加入氯仿4ml，加盖，用振荡器剧烈混合 1 分钟，2800r/min 离心 10 分钟。用滤纸卷条小心吸去上 层水，再用吸管小心吸出氯仿层，移入10ml 管子中，在通风橱中待氯仿挥发至干，精确加入 0.1ml 氯仿，溶解残渣，上机测定。4 计算4.1根据样品测定时所得的辛酸与内标庚酸的峰面积比代入已得回归方程，即得辛酸绝对含量。 白蛋白中辛酸量（mmol /g 蛋白）/144.22X0.5X样品蛋白浓度X100 注：1. 辛酸量（mmo）

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