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文档简介

1、细胞中的元细胞中的元素和化合物素和化合物第一节第一节实验原理:某些化学试剂可以使生物组织中的有关实验原理:某些化学试剂可以使生物组织中的有关 有机化合物产生特定的颜色反响。有机化合物产生特定的颜色反响。化学试剂化学试剂+ +有机化合物有机化合物特定的颜色特定的颜色复原糖复原糖 + 斐林试剂斐林试剂 砖红色沉淀砖红色沉淀脂肪脂肪 + 苏丹苏丹或苏丹或苏丹染液染液橘黄色或红色橘黄色或红色 蛋白质蛋白质 + 双缩脲试剂双缩脲试剂紫色紫色淀粉淀粉 + 碘碘蓝色蓝色水浴加热水浴加热检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1原理:复原糖原理:复原糖 + 斐林试剂斐林试剂 砖红色沉淀。砖红色沉淀。2选材:苹果、梨

2、、白萝卜。含糖量较高,颜色为选材:苹果、梨、白萝卜。含糖量较高,颜色为白色或近于白色的植物组织。白色或近于白色的植物组织。水浴加热水浴加热振荡混匀振荡混匀5065水浴水浴加热加热2min2mL组织组织样液样液刚配制的斐刚配制的斐林试剂林试剂1mL呈现浅蓝色呈现浅蓝色变成砖红色变成砖红色Cu2O砖红色的糖复原糖非斐林试剂常好吃砖红色的糖复原糖非斐林试剂常好吃1.1.可溶性复原糖的检测可溶性复原糖的检测 当质量浓度为当质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液与质量浓的氢氧化钠溶液与质量浓度为度为0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后,立刻生成淡蓝的硫酸铜溶液混合后,立刻生成淡蓝色的色的CuOH2悬浊液。

3、悬浊液。 CuOH2与葡萄糖、与葡萄糖、果糖、麦芽糖等可溶性复原糖共热,可以生成砖红果糖、麦芽糖等可溶性复原糖共热,可以生成砖红色的色的Cu2O沉淀。因此,利用该反响,可证明样液沉淀。因此,利用该反响,可证明样液中含可溶性复原糖。中含可溶性复原糖。RCHO+2Cu(OH)2RRCHO+2Cu(OH)2RCOOH+Cu2O+2H2OCOOH+Cu2O+2H2O制备组织样液制备组织样液梨或苹梨或苹果果研磨研磨取取5g,放入研钵中,放入研钵中洗净、去皮、切块洗净、去皮、切块过滤过滤滤液滤液用单层纱布用单层纱布显色反响显色反响 向试管中参与向试管中参与2ml组织样液组织样液向试管中参与向试管中参与1m

4、l新配制的斐林试剂新配制的斐林试剂振荡混匀振荡混匀5065水水浴加热浴加热2min察看景象察看景象 结论:生成砖红色沉淀,阐明梨或苹果中含有复原糖。结论:生成砖红色沉淀,阐明梨或苹果中含有复原糖。溶液颜色变化:溶液颜色变化:浅蓝色浅蓝色棕色棕色 砖红色沉淀砖红色沉淀2 ml组织样液组织样液50 65水浴加热水浴加热约约2min察看颜色变化察看颜色变化【斐林试剂】:甲液:【斐林试剂】:甲液:0.1g/mL0.1g/mL的的NaOHNaOH溶液,乙溶液,乙液:液:0.05 g/mL0.05 g/mL的的CuSO4CuSO4溶液,运用前等体积混合均溶液,运用前等体积混合均匀生成浅蓝色的匀生成浅蓝色的

5、CuCuOHOH2 2悬浊液,现配现用悬浊液,现配现用时间一长,时间一长,CuCuOHOH2 2 沉淀在溶液底部无法发生沉淀在溶液底部无法发生反响。且需求水浴加热。反响。且需求水浴加热。复原糖:主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。蔗糖、复原糖:主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。蔗糖、淀粉和纤维素属于非复原糖。淀粉和纤维素属于非复原糖。 检测复原糖时应水浴检测复原糖时应水浴50605060度加热,加热试管中度加热,加热试管中的溶液时的溶液时, , 用试管夹夹住试管上部用试管夹夹住试管上部, ,放入怒放水的放入怒放水的大烧杯中加热大烧杯中加热, ,留意试管底部不要接触烧杯底部留意试管底部不要接触烧杯底部, ,同

6、同时试管口不要朝向实验者时试管口不要朝向实验者, ,以免试管内溶液沸腾时以免试管内溶液沸腾时冲出试管冲出试管, ,呵斥烫伤。呵斥烫伤。1原理:脂肪原理:脂肪 + 苏丹苏丹或苏丹或苏丹染液染液橘黄橘黄色或红色色或红色 2选材:经浸泡去种皮的花生种子。选材:经浸泡去种皮的花生种子。苏三苏丹苏三苏丹送了我一个橘黄色的胭脂脂肪送了我一个橘黄色的胭脂脂肪制片制片选取最薄的切片置于干净的载玻片中央选取最薄的切片置于干净的载玻片中央制成暂时装片:滴制成暂时装片:滴12滴蒸馏水,盖上盖玻片滴蒸馏水,盖上盖玻片染色:在薄片上滴加染色:在薄片上滴加2 3滴苏丹滴苏丹染液,染色染液,染色2 3min洗去浮色:用吸水

7、纸吸去染液,滴加体积分数为洗去浮色:用吸水纸吸去染液,滴加体积分数为50%的酒精的酒精12滴滴镜检察看:在低倍镜下寻觅到已镜检察看:在低倍镜下寻觅到已着色的圆形小颗粒,然后用高倍着色的圆形小颗粒,然后用高倍镜察看。镜察看。切片:花生种子浸泡切片:花生种子浸泡h,去皮,将子叶削,去皮,将子叶削成薄片。成薄片。视野视野中有中有橘黄橘黄色颗色颗粒粒橘黄色小圆颗粒橘黄色小圆颗粒即为脂肪颗粒即为脂肪颗粒脂肪脂肪 + 苏丹苏丹或苏丹或苏丹染液染液 橘黄色或红色橘黄色或红色假设用花生种子作实验资料,必需提早浸泡假设用花生种子作实验资料,必需提早浸泡3 34 4小小时,浸泡时间短了,不容易切片,浸泡时间过长,

8、那时,浸泡时间短了,不容易切片,浸泡时间过长,那么组织太软,切下的薄片不易成形,切片要尽能够的么组织太软,切下的薄片不易成形,切片要尽能够的薄。薄。染色后一定要用染色后一定要用50%50%的酒精溶液洗去浮色酒精能的酒精溶液洗去浮色酒精能溶解苏丹溶解苏丹,染色和洗浮色时间不宜过长。,染色和洗浮色时间不宜过长。1原理:蛋白质原理:蛋白质 + 双缩脲试剂双缩脲试剂 紫色络合物紫色络合物2选材:黄豆、鸡蛋清稀释、牛奶、豆浆选材:黄豆、鸡蛋清稀释、牛奶、豆浆双双缩脲子紫色弹蛋白质双双缩脲子紫色弹蛋白质双缩脲试剂双缩脲试剂B 3-4滴滴双缩脲试双缩脲试剂剂A 1mL2mL组织组织样液样液无色无色紫色紫色发

9、明碱性条件发明碱性条件提供提供Cu2+ 在碱性条件在碱性条件NaOHNaOH下,蛋白质中下,蛋白质中的肽键的肽键NHCONHCO与与Cu2Cu2作用生生作用生生紫色络合物。因此,操作时,应先加紫色络合物。因此,操作时,应先加A A再再加加B B,且,且A A多多B B少,假设少,假设B B过量,过量, Cu2 Cu2的蓝的蓝色就会遮盖生成的紫色。色就会遮盖生成的紫色。 将尿素加热,两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩脲。反响式为: 双缩脲双缩脲H2NOC-NH-CONH2在碱性环境在碱性环境NaOH中能和中能和Cu2+作用生成紫色的络化物,这个作用生成紫色的络化物,这个反响叫做双缩脲反响。蛋白质

10、分子中含有的肽键构造反响叫做双缩脲反响。蛋白质分子中含有的肽键构造与双缩脲构造类似,因此,蛋白质也可与双缩脲试剂与双缩脲构造类似,因此,蛋白质也可与双缩脲试剂发生颜色反响。发生颜色反响。双缩脲双缩脲双缩脲试剂双缩脲试剂制备组织样液制备组织样液黄豆组织样液或鸡蛋清稀释液黄豆组织样液或鸡蛋清稀释液黄豆黄豆浸泡浸泡研磨研磨过滤过滤滤液滤液去皮、切片去皮、切片蛋清液蛋清液鸡蛋鸡蛋鸡蛋清稀释液鸡蛋清稀释液稀释稀释显色反响显色反响向试管中注入向试管中注入2ml组织样液组织样液向试管中注入向试管中注入1ml双缩脲试剂双缩脲试剂A参与参与3-4滴双缩滴双缩脲试剂脲试剂B察看景象察看景象察看颜色变化:无察看颜色

11、变化:无紫色紫色结论:参与双缩脲试剂结论:参与双缩脲试剂A后,颜色呈现为无色,参与后,颜色呈现为无色,参与B后,变为后,变为紫色,阐明鸡蛋清中有蛋白质存在。紫色,阐明鸡蛋清中有蛋白质存在。假设用鸡蛋清作为资料,那么必需进展充分稀释,假设用鸡蛋清作为资料,那么必需进展充分稀释,否那么反响后的产物会粘固在试管内壁上,使反响不否那么反响后的产物会粘固在试管内壁上,使反响不彻底,且试管不易洗刷干净。彻底,且试管不易洗刷干净。 【双缩脲试剂】:【双缩脲试剂】:A A液:液:0.1g/mL NaOH0.1g/mL NaOH,B B液:液:0.01g/mL CuSO40.01g/mL CuSO4。先加。先加

12、A A液后加液后加B B液,且液,且B B不能过量,不不能过量,不需求加热。需求加热。过量的双缩脲试剂过量的双缩脲试剂B B会与试剂会与试剂A A反响,使溶液呈蓝色,反响,使溶液呈蓝色,而掩盖生成的紫色。而掩盖生成的紫色。先参与先参与A A液液2ml2ml,摇匀;再参与,摇匀;再参与B B液液3-43-4滴,摇匀。滴,摇匀。2选材:马铃薯匀浆选材:马铃薯匀浆1原理:淀粉原理:淀粉 + 碘碘 蓝色蓝色2 ml组织样液组织样液2滴碘液滴碘液蓝蓝色点淀粉点碘蓝蓝色点淀粉点碘制备组织样液制备组织样液马铃薯块马铃薯块茎茎研磨研磨取取5g,放入研钵中,放入研钵中洗净、去皮、切块洗净、去皮、切块过滤过滤滤液

13、滤液显色反响显色反响向试管中注入向试管中注入2ml组织样组织样液液参与参与2滴碘滴碘-碘化碘化钾钾察看景象察看景象察看溶液颜色变化:无色察看溶液颜色变化:无色蓝色蓝色结论:溶液变蓝,阐明马铃薯组织中有淀粉存在。结论:溶液变蓝,阐明马铃薯组织中有淀粉存在。鉴定物质鉴定物质生物材料生物材料所用试剂所用试剂颜色变化颜色变化还原糖还原糖脂肪脂肪蛋白质蛋白质淀粉淀粉苹果、梨、白萝卜苹果、梨、白萝卜斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀花生种子花生种子苏丹苏丹染液染液苏丹苏丹染液染液橘黄色橘黄色红色红色豆浆、牛奶、鸡蛋清豆浆、牛奶、鸡蛋清 双缩脲试剂双缩脲试剂紫色紫色面粉、马铃薯匀浆液面粉、马铃薯匀浆液碘液

14、碘液蓝色蓝色注:鉴定复原糖需加热;脂肪的鉴定不一定要用显注:鉴定复原糖需加热;脂肪的鉴定不一定要用显微镜,要察看脂肪颗粒,那么必需用显微镜。微镜,要察看脂肪颗粒,那么必需用显微镜。生物组织中普遍存在可溶性复原糖,试回答有关鉴定实验的问题:1实验资料的选择,下面哪一组较为适宜 A、西瓜和甜菜 B、甘蔗和甜橙C、苹果和梨子 D、淀粉和蛋清 2下述糖类物质中,不能与斐林试剂发生作用生成砖红色沉淀的是 A、葡萄糖B、果糖C、麦芽糖D、蔗糖 CD 3在做脂肪鉴定的实验中用到50%的酒精溶液,其作用是 A、消毒B、作为染色的辅助剂C、便于察看D、洗去切片的浮色4蛋白质鉴定时,事先留出一些黄豆组织样液的目的

15、是 A、与反响后物颜色做对比B、失败后重做一遍C、鉴定可溶性复原糖D、留下次实验用 DA5分析下表,可推测 溶液溶液双缩脲试剂双缩脲试剂碘液碘液斐林试剂斐林试剂甲+-乙-+-甲、乙混合+注:“+显色,“+显色更深,“-不显色A.甲溶液含有淀粉B.乙溶液含有复原糖C.混合溶液不含淀粉D.混合溶液含有淀粉酶D6在1、3、5号试管中分别参与2mL蒸馏水,2、4、6号试管中分别参与2mL发芽的小麦种子匀浆样液,然后在14号试管中适量滴加斐林试剂,5、6号试管中合理滴加双缩脲试剂,摇匀。实验景象描画正确的选项是 A只需1、5号试管内呈蓝色B3组实验中甲组和乙组的实验结果一样C4号试管内呈砖红色,其他试管

16、内都呈蓝色D4号试管内呈砖红色,6号试管内呈紫色紫紫色色砖红色砖红色D7表格中是某同窗探求不同资料中复原糖含量高低的表格中是某同窗探求不同资料中复原糖含量高低的实验。以下是对结果的分析,正确的选项是多项选择实验。以下是对结果的分析,正确的选项是多项选择 A.苹果组织细胞中复原糖含量较高苹果组织细胞中复原糖含量较高B.白菜叶肉细胞中也含有复原糖白菜叶肉细胞中也含有复原糖C.试管试管4中溶液为无色中溶液为无色D.三种植物资料与斐林试剂反响的原理一样三种植物资料与斐林试剂反响的原理一样试管试管试管试管试管试管试管试管苹果提取液苹果提取液2ml雪梨提取液雪梨提取液2ml白菜提取液白菜提取液2ml蒸馏水

17、蒸馏水2ml斐林试剂斐林试剂1ml1ml1ml1ml水浴加热水浴加热砖红色砖红色很深很深砖红砖红色深色深砖红色砖红色较浅较浅无砖红无砖红色色ABD蓝色蓝色8现有无标签的稀蛋清、葡萄糖、淀粉和淀粉酶溶液现有无标签的稀蛋清、葡萄糖、淀粉和淀粉酶溶液各一瓶,请利用下面提供的资料和资料将它们区分开来。各一瓶,请利用下面提供的资料和资料将它们区分开来。资料:淀粉酶的化学本质是蛋白质,可以催化淀粉分解为资料:淀粉酶的化学本质是蛋白质,可以催化淀粉分解为复原糖。复原糖。提供资料:带有标签的双缩脲试剂,斐林试剂和淀粉溶液提供资料:带有标签的双缩脲试剂,斐林试剂和淀粉溶液各一瓶。实验方法:各一瓶。实验方法:先用

18、一种试剂将上述先用一种试剂将上述4种溶液区分为两组,这种试剂是种溶液区分为两组,这种试剂是_,其中发生显色反响的一组是,其中发生显色反响的一组是_和和_溶液,不发生显色反响的一组是溶液,不发生显色反响的一组是_和和_。再用再用_试剂区分不发生显色反响的一组溶液。试剂区分不发生显色反响的一组溶液。出现出现_的是的是_,另一种是,另一种是_。区分发生显色反响的一组溶液的方法及鉴定结果是区分发生显色反响的一组溶液的方法及鉴定结果是_。双缩脲试剂双缩脲试剂鸡蛋清鸡蛋清淀粉酶淀粉酶葡萄糖葡萄糖淀粉淀粉斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀葡萄糖葡萄糖淀粉淀粉将淀粉与两种溶液分别混合,再参与斐林试剂,水浴加热,假设将淀粉与两种溶液分别混合,再参与

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